男性年齡與精子質量和精漿生化的關系

毛金觀，彭忠英，李琴

(1.南京市仙林鼓樓醫院，南京 210046；2.嘉興市婦幼保健院，嘉興 314000)

男性年齡與精子質量和精漿生化的關系

毛金觀1*，彭忠英2，李琴2

(1.南京市仙林鼓樓醫院，南京 210046；2.嘉興市婦幼保健院，嘉興 314000)

目的 探討不同年齡段男性精子質量與精漿彈性硬蛋白酶和精漿中性α-葡萄糖苷酶的關系。 方法 回顧性分析在嘉興市婦幼保健院門診檢測精子質量和精漿生化(精漿彈性硬蛋白酶、精漿中性α-葡萄糖苷酶)的3 262例患者的臨床資料。根據年齡分為5組：<25歲組、25～29歲組、30～34歲組、35～39歲組和≥40歲組；并按精子質量分為少弱精子癥(301例)、少精子癥(193例)、弱精子癥(1 335例)及正常精子組(1 433例)。統計分析不同精子質量不同年齡段男性的精漿彈性硬蛋白酶、精漿中性α-葡萄糖苷酶資料。 結果 (1)3 262例精液分析，精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率7.14%，精漿彈性硬蛋白酶水平確診感染率29.25%；(2)各年齡組總體精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率相似(P>0.05)，生殖道感染發生率隨年齡增加有增高趨勢(P<0.05)；(3)不同精子質量各組總體精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率不同(P<0.05)，其中少精子癥和少弱精子癥組均顯著高于弱精子癥組及精子正常組(P<0.05)，但生殖道感染發生率相似(P>0.05)；(4)隨著年齡增加，不同精子質量各組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率相似(P>0.05)，而精漿彈性硬蛋白酶異常發生率有增高趨勢(P<0.05)，其中少弱精子癥、少精子癥患者各年齡組間比較均有統計學差異(P<0.05)；(5)各精子質量組精漿彈性硬蛋白酶測定值均隨著年齡增加呈增高趨勢，且正常精子組的精漿彈性硬蛋白酶測定值在35～39歲組及≥40歲組均顯著高于<25歲組(P<0.05)。 結論 男科門診患者中生殖道感染具有普遍性；伴隨難以自愈的生殖道感染的少弱精子癥、少精子癥和弱精子癥可能與男性患者年齡增加有關，亦可能與附性腺病變嚴重程度、病程進展所處不同階段有關。

年齡； 精子質量； 彈性硬蛋白酶； 中性α-葡萄糖苷酶

(JReprodMed2017，26(7)：679-684)

男性不育患者以精子數量減少、精子活力異常多見。精漿彈性硬蛋白酶檢測是一種敏感、特異性炎癥指標[1]。中老年年齡增加會使機體免疫力下降，可能更容易發生生殖道感染。生殖道感染可能會影響男性生殖腺，尤其是附睪炎癥，影響附睪分泌精漿中性α-葡萄糖苷酶。精漿中性α-葡萄糖苷酶含量和活力與精子活力及精子濃度都有密切關系[2-3]。本文通過回顧性分析本院門診檢測的不同年齡段的男性精子質量與精漿生化資料，探討男性年齡與精子質量與精漿彈性硬蛋白酶和精漿中性α-葡萄糖苷酶的關系。

資料與方法

一、對象及分組

回顧性分析2014年1月至2015年12月在嘉興市婦幼保健院門診檢測精子質量并同時行精漿彈性硬蛋白酶和精漿中性α-葡萄糖苷酶檢測者3 262例。根據年齡分為5組：<25歲組、25～29歲組、30～34歲組、35～39歲組和≥40歲組；并按精液質量分為少弱精子癥、少精子癥、弱精子癥及正常精子組。

二、精液分析及精子質量判定

取樣前3 d禁酒并且禁欲3～7 d精液檢查。精液采集后置37℃恒溫箱內液化，采用SCA精子質量分析儀(西班牙)檢測精子濃度和活力。

精子質量診斷標準參照第五版《世界衛生組織人類精液檢查與處理實驗室手冊》[4]。參考值下限：精液體積1.5 ml，精子總數39×106/一次射精，精子濃度15×106/ml，前向運動(PR)32%。

正常精子：精子總數(或濃度，取決于報告結果)、前向運動(PR)精子百分率均等于或高于參考值下限；

弱精子癥：前向運動(PR)精子百分率低于參考值下限；

少弱精子癥：精子總數(或濃度，取決于報告結果)和前向運動(PR)精子百分率低于參考值下限；

少精子癥：精子總數(或濃度，取決于報告結果)低于參考值下限。

三、精漿生化檢測

精液分析的同時采用相應的定量檢測試劑盒(深圳華康生物)行精漿彈性硬蛋白酶和精漿中性α-葡萄糖苷酶定量檢測；檢測儀器為深圳雷杜RT-6000酶標分析儀，實驗操作按試劑盒說明書。

精漿彈性硬蛋白酶定量測定結果判斷：正常者<290 ng/ml，隱行感染者290～1000 ng/ml，確診感染者>1 000 ng/ml。

精漿中性α-葡萄糖苷酶定量測定結果判斷：正常參考值為≥20 mU/一次射精。

四、分析指標

精漿生化檢測異常的總體發生率、在各年齡組的發生率以及在不同精子質量組的發生率；不同精子質量在不同年齡段的精漿生化異常發生率和精漿生化測定值。

五、統計方法

結 果

一、一般情況

3 262例精液分析結果，精漿中性α-葡萄糖苷酶異常233例，發生率7.14%；精漿彈性硬蛋白酶>1 000 ng/ml為確診感染者954例，發生率29.25%。

二、總體各年齡組精漿生化異常發生率比較

各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率比較，無統計學差異(χ2=4.448，P=0.349)；總體各年齡組精漿彈性硬蛋白酶確診感染異常發生率比較，差異有統計學意義(χ2=47.365，P=0.000)(表1)。

三、不同精子質量各組精漿生化異常發生率比較

少精子癥、少弱精子癥、弱精子癥、正常精子者中的精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率不同，差異有統計學意義(χ2=3.355E2，P=0.000)，其中少精子癥異常發生率顯著高于弱精子癥和正常精子者(χ2=2.496E2、1.766E2，均P=0.000)，少弱精子癥異常發生率顯著高于弱精子癥和正常精子者(χ2=1.514E2、98.220，均P=0.000)；精漿彈性硬蛋白酶異常發生率相似，差異無統計學意義(χ2=5.545，P=0.136)(表2)。

表1 不同年齡各組總體精漿生化異常發生率比較

注：各年齡組總體比較，*P<0.05

表2 不同精子質量各組精漿生化異常發生率比較

注：精子質量各組總體比較，*P<0.05；與弱精子癥和正常精子組比較，#P<0.05

四、不同精子質量組各年齡段的精漿生化異常發生率比較

1.少弱精子癥組：各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率相似(P>0.05)；隨年齡增加精漿彈性硬蛋白酶異常發生率增高(P<0.05)，其中≥40歲組顯著高于<25歲組(P<0.05)。

2.少精子癥組：各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率相似(P>0.05)，其中<25歲組最低；年齡增加精漿彈性硬蛋白酶異常發生率增高(P<0.05)，其中35～39歲組和≥40歲組顯著高于<25歲組(均P<0.05)。

3.弱精子癥組：各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率相似(P>0.05)，其中以<25歲組最高；精漿彈性硬蛋白酶異常發生率在25～29歲組顯著低于其他各組(均P<0.01)。

4.正常精子組：各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率相似(P>0.05)；隨年齡增加，精漿彈性硬蛋白酶異常發生率增高(P<0.01)，其中35～39歲組和≥40歲組顯著高于<25歲組(均P<0.05)(表3)。

五、不同精子質量各組精漿彈性硬蛋白酶檢測結果比較

不同精子質量各年齡組精漿彈性硬蛋白酶檢測結果比較顯示，大部分隨年齡增加，檢測結果有增高趨勢，但只有正常精子組中35～39歲組和≥40歲組顯著高于<25歲組(均P<0.05)(表4)。

表3 不同精子質量不同年齡段各組精漿生化異常發生率比較[%(n)]

注：同一精子質量組各年齡組總體比較，※P<0.05；與同一精子質量組<25歲組比較，*P<0.05；與同一精子質量組其他各年齡組比較，#P<0.01

討 論

本研究結果顯示，男科門診患者精漿彈性硬蛋白酶>1 000 ng/ml確診感染者的總體發生率為29.25%，少弱精子癥、少精子癥等不同精子質量各組檢測精漿彈性硬蛋白酶異常為確診感染者大約為25%～35%，男性患者生殖道感染具有普遍性。不同精子質量各組生殖道感染普遍存在且發病率都很高，少精子癥確診感染者占34.72%，與文獻報道的32.9%[5]相似，鄭九嘉等[6]報道IVF-ET治療的男性不育患者中感染發生率高達37.57%(275/732)。不同精子質量各組精漿彈性硬蛋白酶檢測異常的總體發生率相似，但精漿中性α-葡萄糖苷酶異常的總體發生率在不同精子質量組間有統計學差異，生殖道感染對附睪的影響值得深入研究。

我們2011～2012年男科門診篩查精液者的確診感染發生率為31.87%(363/1139)[7]，前期研究資料弱精子癥患者確診感染發生率為34.85%(92/264)，精子檢查正常者的確診感染發生率為31.30%(41/131)[8]。男性生殖道感染普遍存在，大部分隨著年齡增加，精漿彈性硬蛋白酶異常發生率和精漿彈性硬蛋白酶測定值有增高趨勢。臨床上經

表4 不同精子質量各年齡組精漿彈性硬蛋白酶檢測結果比較(x-±s)

注：與同一精子質量組內<25歲組比較，*P<0.05

常遇見精液量增多超過正常范圍者，可能為感染早期，可能與感染早期各生殖腺腺體分泌量增多有關。

少弱精子癥和弱精子癥患者中確診感染者的精液量及精子總數均降低[9]，梗阻性無精子癥、嚴重少精子癥等精子質量越差，精漿果糖異常發生率越發增高[10]，弱精子癥和精子檢查正常者中確診感染者的精漿果糖測定值降低[8]。生殖道感染很難自愈也很難徹底治愈，男性患者生殖道感染隨年齡增加，生殖腺病變時間更久，慢性感染持續存在，部分患者病情越來越嚴重。一個35歲的男性患者，可能在30歲時感染，精子濃度、精子活力、精子總數出現下降，35歲來院檢查時，有的精子質量可能還在正常范圍，有的可能已經為少弱精子癥。男科門診經常遇見間隔6個月、一年或更久要求復查精液的男性不育患者精子質量越來越差，生殖道感染可能是重要的致病因素之一。男科門診中我們需要關注精子檢查正常者，他們隨年齡增加，也有可能存在精漿生化異常，更有可能因為生殖道感染已經引起精子濃度、精子活力、精子總數下降，但尚未到不正常狀態，增加精漿生化檢查有可能盡早發現男性不育病因。

不同年齡各組測定精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率相似，不同精子質量各組測定精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率在少精子癥和少弱精子癥中較高，而且屬于同一精子診斷學分類的各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率隨年齡增加有增高趨勢，提示生殖道感染隨患者的年齡增加附睪破壞越來越嚴重。精漿中性α-葡萄糖苷酶定量檢測結果異常者，其一次射精精液量及一次射精精子總數均降低[11]。確診感染者的精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率增加；精子活力小于10%者，精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發生率及精漿中性α-葡萄糖苷酶測定值也是顯著降低[9]。本研究顯示，男性患者年齡增長導致精漿生化異常發生率增加。由此我們推測，男性患者的慢性生殖道感染隨年齡增長，慢性炎癥長期影響附睪等生殖腺病變嚴重，可能會導致少弱精子癥等男性不育患者精液量、精子總數和精子活力明顯降低。

精漿彈性硬蛋白酶含量<290 ng/ml的男性不育患者的精子DNA碎片指數明顯低于精漿彈性硬蛋白酶含量>1 000 ng/ml的患者[12]。生殖道感染的男性不育患者的精子DNA損傷程度增加[13]。生殖道感染是導致男性不育患者精子DNA損傷的重要因素之一。40歲及以上男性不育患者的精子DNA碎片率的檢出值明顯高于40歲以下者[14]。與<35歲者和35～39歲者相比，≥40歲的男性不育患者的DNA完整精子百分率降低[15]；精子DNA完整性差，影響輔助生殖技術臨床結局[16]。因此，我們也建議，評價輔助生殖技術臨床結局的影響因素時，應該考慮生殖道感染和年齡因素。

綜上所述，男性不育患者尤其是實施輔助生殖技術的患者應常規檢查精漿生化，尤其是二胎國策放開后，40歲以上的中年男性更應常規檢測精漿生化。

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[編輯：羅宏志]

Relationship between ages and sperm quality and seminal plasma biochemical indexes

MAOJin-guan1*，PENGZhong-ying2，LIQin2

1.NanjingXianlin-GulouHospital，Nanjing2100462.JiaxingMaternal&ChildHealthHospital，Jiaxing314000

Objective：To investigate the relationship between age and sperm quality and biochemical indexes of seminal plasma.

Methods：The clinical data of 3 262 patients with sperm quality and seminal plasma biochemistry indicators (seminal plasma elastase & α-glycosidase) in Jiaxing Maternal & Child Health Hospital were analyzed retrospectively.The patients were divided into 5 groups according to the age：<25 year group，25-29 year group，30-34 years group，35-39 years group and≥40 years group.In addition，the patients were divided into oligoasthenospermia (n=301)，oligozoospermia (n=193) and asthenospermia (n=1335) and normal sperm group (n=1433) according to sperm quality.The correlation between the age or sperm quality and seminal plasma elastase & α-glycosidase was analyzed.

Results：The abnormal rate of seminal plasma α-glycosidase was 7.14%，and the infection rate confirmed by seminal plasma elastase level was 29.25% in 3 262 patients.The abnormal rate of α-glycosidase was similar among the different age groups (P>0.05).The infection rate was significantly increased with age (P<0.05).The abnormal rate of α-glycosidase was significantly different among the different sperm quality groups (P<0.05).The abnormal rate of α-glycosidase in oligoasthenospermia or oligozoospermia was significantly higher than that of asthenospermia or normal sperm group (P<0.05)，while the infection rate was similar (P>0.05).The abnormal rate of α-glycosidase was similar in different sperm quality group with the increase of age (P>0.05)，while the abnormal rate of seminal plasma elastase was significantly increased with age (P<0.05)，which also was significant different in the patients with oligoasthenospermia or oligozoospermia among the different age group (allP<0.05).The tendency of the seminal plasma elastase levels was increased with age in different sperm quality groups.Compared with<25 years old group，the seminal plasma elastase levels of normal sperm group with 35-39 years old and≥40 years old was significantly increased (P<0.05).

Conclusions：Reproductive tract infection in male clinic patients is universality. Oligoasthenospermia，oligozoospermia，and asthenospermia in patients with difficult to self-healing of reproductive tract infections may be related the patients’ age and the severity and advancement of infertile patients’ accessory sex gland lesions.

Age； Sperm Quality； Elastasey； α-glycosidase

10.3969/j.issn.1004-3845.2017.07.012

2016-12-22；

2017-01-23

嘉興市科技計劃(2015AY23035)

毛金觀，男，浙江平湖人，學士，主任醫師，生殖醫學、男科專業.(*通訊作者，課題主持人原嘉興市婦幼保健院毛金觀于2016年9月入職南京市仙林鼓樓醫院)