積雪草的開發(fā)研究

王翕+李早慧+孫旭

摘要：對積雪草的提取、化學(xué)成分、生理活性、加工生產(chǎn)等方面進(jìn)一步的開發(fā)研究。本文依據(jù)對近年來的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行總結(jié)和分析，綜合調(diào)查積雪草的產(chǎn)地、主要化學(xué)成分、藥理作用與提取方法等內(nèi)容，發(fā)現(xiàn)積雪草對皮膚組織有很好的修復(fù)作用，并能消腫解毒、防治皮膚水腫，其開發(fā)利用空間較大。

關(guān)鍵詞：積雪草；積雪草苷；生理功能；提取方法

中圖分類號： R282.71 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.13.043

積雪草，學(xué)名Centella asiatica （L.） Urban，別稱：銅錢草、馬蹄草、錢齒草、崩大碗等，最早收載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。《本草綱目》記載，其全草入藥，性甘、辛、涼，主要功效用于止痛、活血化瘀、促進(jìn)皮膚生長、暑瀉、痢疾，有醒腦提神等。

1積雪草的產(chǎn)地

世界上存在20種積雪草類植物，在南、北半球的熱帶地區(qū)存在較多，南非、印度、馬來西藥、澳大利亞等國家為主要產(chǎn)地。積雪草在我國僅存1個(gè)品種，華南、華東、中南及西南地區(qū)為主要的分布地區(qū)，主要產(chǎn)地為江蘇、江西、福建、四川、陜西、云南等省區(qū)，其主要生長于海拔2000米以下的山路旁、田邊和草地等處，大多生于陰濕的草地或水溝旁。

2積雪草的化學(xué)成分

積雪草所含化學(xué)成分中三萜類、黃酮類、多炔烯烴類，以及揮發(fā)油類成分占絕大部分。

2.1三萜皂苷類

積雪草中含量比較豐富的化學(xué)成分為為三萜皂苷類。這類屬于五環(huán)三萜皂苷類，包括羥基積雪草苷、異參枯尼苷、積雪草苷和波熱米苷等。除此類外，還包括馬達(dá)積雪草酸、積雪草酸、波熱米酸和羥基積雪草酸等一些處于游離狀態(tài)的三萜酸。近幾年，隨著對積雪草的研究逐步加深，還發(fā)現(xiàn)了其他三萜類的成分，如：28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-O-β-D-吡喃葡糖基-（1→6）。-β-D-吡喃葡糖酯、2α，3β，6β-三羥基烏蘇-12-烯-28-酸等[1]。

2.2多炔烯烴類

在對積雪草的進(jìn)一步研究中，還發(fā)現(xiàn)了14種多炔烯烴類組成的化合物，通過儀器分析與結(jié)構(gòu)的鑒定，主要分為C19H28O3，C16H21O2，C17H21O3，C19H27O和C15H20O2。

2.3揮發(fā)油類

目前，已檢測鑒定的揮發(fā)油種類超過45種，主要有石竹烯、長葉烯、法尼烯、欖香烯等。其中，含量相對比較高的成分為石以竹烯和長葉烯[2]。

3積雪草苷的提取方法

積雪草各種提取物中都有一定的藥理活性，積雪草苷為主要作用的代表成分，經(jīng)過現(xiàn)代藥理學(xué)研究，積雪草苷對皮膚組織有修復(fù)作用，能治療皮膚潰腸、促進(jìn)傷口愈合、抗焦慮免疫調(diào)節(jié)等。常見的積雪草苷的提取方法主要有以下幾種。

3.1醇提法提取

李濤等[3]采用乙醇回流法及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)獲得積雪草苷的最優(yōu)提取工藝，最終確定提取條件為積雪草粉碎粒度140目，乙醇濃度70%，料液比1∶10（克/毫升），提取時(shí)間為6小時(shí)。提取條件穩(wěn)定，有實(shí)踐意義。但所得的積雪草苷提取物需要進(jìn)一步分離純化。

3.2超聲法提取

侯文硯等通過超聲提取法與傳統(tǒng)的提取方法比較，最終確定積雪草粉碎至80～100目，乙醇濃度60%，料液比1∶12，超聲時(shí)間1小時(shí)，浸泡時(shí)間10小時(shí)，在經(jīng)過重結(jié)晶純化，所得的積雪草苷純化至97.94%[4]。

3.3酶提取法

由于傳統(tǒng)提取法，水、酸、堿、有機(jī)溶劑等提取方法需要使用大量溶劑，時(shí)間長，產(chǎn)率有限。韓偉等[5]采用酶提取法及正交試驗(yàn)，對酶的種類，用量、料液比、pH值等因素進(jìn)行考察，最終確定提供工藝為纖維素酶：底物（1∶50）、料液比1∶25、pH值為6.0，酶解溫度40℃，酶解時(shí)間1.5小時(shí)。此法提取率高，提取溫度低，重復(fù)性好、工藝穩(wěn)定。

4積雪草的藥理作用

4.1 促進(jìn)創(chuàng)傷愈合

Jeong-Hyun Lee 等通過實(shí)驗(yàn)研究表明，積雪草苷主要是通過干預(yù)人皮膚成纖維細(xì)胞積來改變細(xì)胞的粘附和遷徙，使人皮膚成纖維細(xì)胞產(chǎn)生增殖，從而促進(jìn)傷口的愈合[6]。LUL等通過在體外的人皮膚成纖維細(xì)胞上試驗(yàn)和 cDNA微陣列技術(shù)檢測基因表達(dá)譜，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明負(fù)責(zé)細(xì)胞增殖及細(xì)胞外基質(zhì)合成的基因，在不同的時(shí)間點(diǎn)上調(diào)、編碼I型和III型的膠原蛋白mDNA 水平和蛋白水平也明顯增加[7]。

4.2 抑制皮膚疤痕的形成

研究發(fā)現(xiàn)，積雪草苷濃度在0.1～1.0毫克/毫升時(shí)能使瘢痕成纖維細(xì)胞的增殖受到抑制，也會(huì)抑制人皮膚成纖維細(xì)胞的增殖。其主要原理是積雪草苷抑制成纖維細(xì)胞來減少肉芽組織與膠原等細(xì)胞外基質(zhì)的合成，從而減少瘢痕形成[8]。王德堅(jiān)[9]等通過對21例痤瘡瘢痕的病人采取積雪草苷的治療，觀察癥狀及體征變化，發(fā)現(xiàn)積雪草苷有較好的抑制瘢痕增生和軟化瘢痕的作用。

4.3 抗腫瘤的作用

在對積雪草現(xiàn)代藥理學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)，積雪草中的藥效成分積雪草苷可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，阻斷腫瘤細(xì)胞DNA的合成以及減少腫瘤細(xì)胞的增殖[9]。王錦菊等[10]曾對積雪草苷的抗腫瘤作用進(jìn)行初步的試驗(yàn)，主要是觀察積雪草苷對體外培養(yǎng)的L929細(xì)胞和CNE細(xì)胞的增殖的影響，以及移植S80細(xì)胞和荷瘤小鼠生存時(shí)間，其結(jié)果表明，積雪草苷能夠抑制體外培養(yǎng)的L929細(xì)胞和CNE細(xì)胞增殖，對移植S80細(xì)胞也存在抑制作用，并能夠延長荷瘤小鼠的生存時(shí)間，說明積雪草苷具有抗腫瘤的作用。

4.4 抗纖維化的作用

王策等通過干預(yù)大鼠心梗后的模型，發(fā)現(xiàn)積雪草苷可改善心梗大鼠非梗死區(qū)心肌組織膠原的表達(dá)，使細(xì)胞外基質(zhì)聚積減少，從而使抗心肌間質(zhì)纖維化發(fā)揮作用。究其原因是通過調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)[11]。

4.5 抗炎及肺臟保護(hù)

Jing Yuan Wan等將脂多糖注射到大鼠體內(nèi)制作發(fā)熱及炎癥模型，并給予積雪草苷干預(yù)，發(fā)現(xiàn)其具有退熱和抗感染的作用，作用機(jī)制為抑制腫瘤壞死因子-α、白介素-6 的水平，環(huán)氧合酶-2及前列腺素E2炎癥前因子的表達(dá)，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)其抑制機(jī)制為調(diào)節(jié)血紅素氧合酶-1的表達(dá)。其主要試驗(yàn)流程為血紅素氧合酶-1的抑制劑ZnPPIX干預(yù)，發(fā)現(xiàn)該阻斷劑能阻斷積雪草苷的退熱作用，部分改變積雪草苷抑制腫瘤壞死因子-α、白介素-6水平[12]。

5 積雪草的利用價(jià)值

5.1地被植物

積雪草可以用來當(dāng)做茶園雜草，是一種有益的、能夠覆蓋茶園和土壤的植物，可以達(dá)到防治土壤侵蝕的目的，是一種很好的地被植物。

5.2食用性

積雪草其口感較好，可以直接生食，味道與薄荷相似。在印度、巴基斯坦等地，也常將積雪草作為蔬菜食用。我國南方也常將其作為茶飲。

5.3草坪植物

積雪草也可當(dāng)做觀賞植物來使用，主要是因?yàn)槠淙~優(yōu)美、草層平整，可用于草坪建植中，具有較高的美化和凈化環(huán)境的作用。

6結(jié)語

積雪草含有多種類的化學(xué)成分，并且具有多種多樣的藥理活性，因此是一味很有臨床應(yīng)用價(jià)值的中藥，在對多種疾病及病理生理過程的臨床作用表現(xiàn)良好。且中藥本身具有創(chuàng)傷小，對患者毒副作用小的特點(diǎn)，能夠有效改善治療的效果，減輕患者的痛苦。目前，在我國對積雪草的研究和應(yīng)用還應(yīng)該增加深度和廣度，對其進(jìn)行開發(fā)利用還有待提高，為積雪草產(chǎn)品的開發(fā)利用提供相應(yīng)的理論基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

[1]黃益麒，裘生梁，毛水龍，戚益銘，王冰清. 積雪草主要化學(xué)成分和提取工藝的研究進(jìn)展[J]. 北方藥學(xué)，2013，（01）：45-46.

[2]殷林虹. 積雪草的化學(xué)成分分析及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 化工管理，2015，（17）：48-49.

[3]李濤，朱慧娟. 正交試驗(yàn)優(yōu)化乙醇回流提取積雪草苷的工藝研究[J]. 氨基酸和生物資源，2016，（02）：71-74.

[4]侯文硯. 積雪草苷的提取和分離[D].西安建筑科技大學(xué)，2011.

[5]韓偉，陳惠丹，樊亮，王春麗. 酶法提取積雪草苷[J]. 南京工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2009，（03）：18-22.

[6]Lee JH， Kim HL， Lee MH， et al. Asiaticoside enhances

normal human skin cell migration， attachment and growthin vitro wound healing model[J]. Phytomedicine， 2012，19 （13）：1223.

[7]Lu L， Ying K， Wei S， et al. Asiaticoside induction for cell - cycle progression， proliferation and collagen synthesis in human dermal fibroblasts[J]. Int J Dermatol， 2004，43 （11）：801.

[8]李珊珊，王瑋蓁，曾憲玉.積雪草苷對瘢痕組織成纖維細(xì)胞I、III 膠原和TGF-β1 mRNA表達(dá)的影響[J].中國麻風(fēng)皮膚病雜志，2013，29（05）：310.

[9]王德堅(jiān)，車斌，黃超芬.積雪甙治療痤瘡后疤痕的臨床觀察[J]. 海峽藥學(xué)，2003，（06）：62-63.

[10]王錦菊，王瑞國，王寶奎，余祥彬. 積雪草甙抗腫瘤作用的初步實(shí)驗(yàn)研究[J]. 福建中醫(yī)藥，2001，（04）：39-40.

[11]黃云虹，張勝華，甄瑞賢，等.積雪草甙誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及增強(qiáng)長春新堿的抗腫瘤作用[J].癌癥，2004， 23（02）：1599.

[12]王策，積雪草苷對心梗大鼠心肌纖維化影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國生化藥物雜志，2014，34（08）：19.

作者簡介：王翕，在讀本科生，研究方向：新藥的研究與開發(fā)。

通訊作者：李早慧，碩士，講師，研究方向：中藥現(xiàn)代給藥系統(tǒng)和中藥新藥的研究。