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珠子參地上部分急性毒性試驗研究

2017-07-10 10:28:17許銀鳳
現代養生·下半月 2017年5期
關鍵詞:小鼠劑量

許銀鳳

云南經濟管理學院 云南省昆明市 650106

珠子參地上部分急性毒性試驗研究

許銀鳳

云南經濟管理學院 云南省昆明市 650106

目的:測定珠子參地上部分的LD50,為珠子參地上部分的安全性評價提供毒理學依據。方法:采用小鼠經口毒性試驗,參考《食品安全性毒理學評價程序和方法》進行。結果:在14d的觀察期內動物未見死亡和明顯的中毒癥狀,最大耐受量為124g/kg,該藥材的臨床用藥安全范圍大。

珠子參;地上部分;急性毒性試驗

珠子參,為五加科人參屬植物珠子參Panax japonicus C.A.May. var. major (Burk.) C. Y. Wu et K.M.Feng或羽葉三七Panax japonicus C.A.May. var. bipinnatifidus (Burk.) C. Y. Wu et K.M.Feng的干燥根莖。其味苦、甘,微寒。歸肝、肺、胃經。其根莖可補肺、養陰、活絡、止血。用于氣陰兩虛,煩熱口渴,虛勞咳嗽,跌打損傷,關節疼痛,咳血,吐血,外傷出血[1]。其葉可清熱生津、潤喉利咽、解暑。用于熱傷津液、煩渴、骨蒸勞熱、口干舌燥、心煩神倦、風火牙痛、腰腿痛、咽喉干燥、聲音嘶啞、中暑等[2~4];作茶常飲有滋補強壯之效,并能解暑熱[2];并有用葉煎湯作生發之用[4]。果實(藏族):有利尿、止痛之功,用于水腫、尿閉、風濕疼痛[5]。如果能將珠子參的地上部分很好開發利用出來,不僅保護了珠子參這一寶貴的自然資源、提高了藥用植物資源的綜合利用率,而且還能更好的為人類的健康事業服務。本實驗采用珠子參地上部分水提物小鼠經口給藥急性毒性試驗對其急性毒性進行考察,以期為臨床用藥提供理論依據。

1 實驗材料

1.1 藥物

供試藥分別以10、10、10倍量水提取30、30、30min,濃縮至4.1g/ml,4℃冷藏備用。藥材采集與于云南石林圭山。

1.2 實驗動物

SPF級昆明種小鼠,雌雄各半,體重20±2g,由昆明市艾尼莫實驗動物養殖中心提供,合格證號:SCXK(滇)2016008。飼料批號:SCXK(滇)2016009。

2 實驗方法

2.1 預試驗

取合格昆明種小鼠20只,雌雄各半,按體重與性別隨即分為5組,每組4只。試驗前禁食不禁水12h。供試藥以生理鹽水按等比例稀釋得到,系數為0.75,最大劑量以164g/kg劑量開始給藥,共得供試藥的5個劑量組。5組小鼠分別經口給藥,給藥體積為0.4ml/10g。給藥后即刻觀察,持續40分鐘。以后每天上午、下午各觀察一次,連續14天,觀察各組小鼠的外觀,行為及毒性反應,記錄各組小鼠的死亡數。結果:164g/kg的劑量組有2只小鼠活動活動明顯減少,呼吸急促,渾身無力,其中一只32分鐘時死亡,大體解剖見胃、腸有明顯脹氣;另一只在40分鐘之內沒有死亡,待第二天上午來觀察已開始少量進食,下午觀察時已基本恢復正?;顒?。因在大劑量下,僅有少數動物死亡,難以測出半數致死量LD50,故進行最大耐受量的測定。

2.2 最大耐受量的測定

取合格昆明種小鼠40只,雌雄各半,按體重和性別隨即分為試驗組和空白對照組,試驗前禁食不禁水12h,試驗組給藥劑量為124g/kg,給藥體積為0.4ml/10g。空白對照組給予等體積的生理鹽水。給藥后連續觀察14天,每天上午、下午各觀察一次。觀察動物狀態并記錄動物的體重(見表1)和進食量(見表2)變化。第14天處死,解剖小鼠,肉眼觀察其主要臟器的外觀[6]。

兩組數據進行t檢驗p>0.05,差異無顯著性意義。

表1:珠子參地上部分小鼠經口給藥急性毒性試驗動物體重(g)變化(n=20,)

表1:珠子參地上部分小鼠經口給藥急性毒性試驗動物體重(g)變化(n=20,)

給藥天數 體重試驗組 對照組0 1 8 . 5 2 ± 1 . 8 1 1 8 . 0 1 ± 2 . 7 0 2 1 8 . 5 8 ± 2 . 9 3 1 7 . 9 5 ± 1 . 9 7 4 1 8 . 6 8 ± 2 . 6 4 1 8 . 1 2 ± 2 . 2 0 6 1 9 . 2 6 ± 2 . 3 7 1 8 . 9 1 ± 2 . 3 6 8 2 0 . 2 3 ± 2 . 4 5 1 9 . 9 ± 2 . 5 8 1 0 2 0 . 2 6 ± 3 . 5 8 2 0 . 5 3 ± 2 . 5 7 1 2 1 9 . 7 3 ± 5 . 6 4 2 0 . 8 2 ± 2 . 8 5 1 4 2 2 . 4 1 ± 2 . 9 1 2 2 . 0 6 ± 3 . 0 0

表2:珠子參地上部分小鼠經口給藥急性毒性試驗動物進食量變化(n=20,X)(g)

3 結果

經觀察試驗組小鼠14天內未見死亡,進食量在給藥后的4天內比試驗前有少量減少,體重在前四天也增長較少,4天后進食量和體重均開始正常增長。試驗結束后大體解剖見試驗組小鼠與空白對照組比較,主要臟器未見明顯異常。珠子參地上部分水提物的最大耐受量為124g/kg,按成人(60kg)用量12g[7]計算,小鼠對珠子參地上部分水提物的最大耐受量為成人用量的 620倍。試驗結果表明,該藥材的臨床用藥安全范圍大。通過對試驗藥材水提物小鼠經口給藥的急性毒性試驗,為臨床用藥的安全性提供試驗依據。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業出版社,2005:192.

[2]江繼武.藥用植物辭典[M].天津科學技術出版社,2005:565.

[3]陜西省革命委員會衛生局、商業局.陜西中草藥[M].科學出版社,1971:590.

[4]葉覺銓.本草推陳(正篇)[M].江蘇人民出版社,1965:20-21.

[5]云南省地方志編纂委員會.云南省志(卷七十)[M].昆明:云南人民出版社,995:713.

[6]中華人民共和國衛生部藥政管理局.中藥新藥研究指南(藥學、藥理學、毒理學)[M].203.

[7]國家中醫藥管理局、《中華本草》編委會.中華本草(第五冊)[M].上??茖W技術出版社,1999:836-839,850-851.

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