尼可地爾保護(hù)大鼠缺血再灌注心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激機(jī)制的研究

葉 明，吳 輝

· 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)論著·

尼可地爾保護(hù)大鼠缺血再灌注心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激機(jī)制的研究

葉 明，吳 輝

目的 觀察尼可地爾對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)標(biāo)志因子表達(dá)的影響。方法 48只SD大鼠隨機(jī)分為6組：平衡灌注(Bal)組、平衡灌注+尼可地爾預(yù)處理(Bal+Nic100)組、缺血再灌注(I/R Ctrl)組、缺血再灌注+尼可地爾30 μmol/L預(yù)處理(Nic 30)組、缺血再灌注+尼可地爾100 μmol/L預(yù)處理(Nic 100)組、缺血再灌注+尼可地爾300 μmol/L預(yù)處理(Nic 300)組。采用Langendorff 灌流裝置，建立離體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型，分別給予不同劑量的尼可地爾預(yù)處理。采用多道生理信號(hào)采集系統(tǒng)記錄分析各項(xiàng)心功能參數(shù)：左心室收縮峰壓(LVPSP)、左心室舒張末壓(LVEDP)、左心室等容期壓力最大變化速率(±dp/dt max)、心率(HR)等，并計(jì)算左室發(fā)展壓(LVDP=LVPSP-LVEDP)；采用LDH檢測(cè)試劑盒測(cè)定冠脈流出液中的乳酸脫氫酶(LDH)活性；氯化三苯基四氮唑(TTC)染色檢測(cè)心肌梗死面積；Real-Time PCR檢測(cè)心肌組織中GRP78及CHOP的mRNA表達(dá)水平；Western blot檢測(cè)心肌組織中GRP78、CHOP的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 與I/R Ctrl組比較，尼可地爾預(yù)處理可顯著改善大鼠離體缺血再灌注心臟的各項(xiàng)心功能指標(biāo)。與平衡灌流期比較，I/R Ctrl組再灌注120 min后冠脈流出液中的LDH活性水平顯著上升，而尼可地爾預(yù)處理各組冠脈流出液LDH活性水平顯著低于I/R Ctrl 組。與I/R Ctrl組比較，尼可地爾預(yù)處理各組心肌梗死面積顯著縮小。與Bal 組比較，I/R Ctrl組心肌組織中的GRP78及CHOP mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著上調(diào)，而與I/R Ctrl組比較，尼可地爾預(yù)處理可顯著降低GRP78及CHOP mRNA及蛋白表達(dá)水平，且尼可地爾作用均呈劑量依賴(lài)性。結(jié)論 在大鼠離體心肌缺血再灌注損傷模型中，尼可地爾預(yù)處理可呈劑量依賴(lài)性地減輕心肌細(xì)胞損傷，促進(jìn)缺血再灌注后心臟功能的恢復(fù)，還可抑制心肌缺血再灌注誘發(fā)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)。

缺血再灌注損傷；尼可地爾；心肌；左心室舒張末壓；左心室等容期壓力最大變化速率；心率；乳酸脫氫酶；78 kPa糖調(diào)節(jié)蛋白；C/EP源蛋白

隨著經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療、冠脈旁路移植術(shù)等各種血運(yùn)重建技術(shù)的不斷完善及多種新型抗血栓藥物的應(yīng)用，增強(qiáng)冠心病病人的治療效果。恢復(fù)心肌血液再灌注過(guò)程中繼發(fā)的心肌損傷嚴(yán)重減弱血運(yùn)重建治療效果，稱(chēng)為心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion，I/R)損傷。多種機(jī)制參與心肌I/R損傷的病理生理過(guò)程，包括氧化應(yīng)激、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、線(xiàn)粒體通透性轉(zhuǎn)換孔開(kāi)放、炎癥反應(yīng)等[1]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)及其介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡在心肌I/R損傷的發(fā)生發(fā)展中具有關(guān)鍵作用[2]。尼可地爾是臨床常用的抗心絞痛藥物，基礎(chǔ)及臨床研究均已證實(shí)其可有效減輕急性心肌梗死后的心肌損傷。在動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型研究中發(fā)現(xiàn)，尼可地爾可顯著降低ERS反應(yīng)標(biāo)志因子78kDa糖調(diào)節(jié)蛋白(glucose regulated protein 78kDa，GRP78)和C/EBP同源蛋白(C/EBP- homologous protein，CHOP)的表達(dá)水平[3]。尼可地爾是否影響心肌I/R誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及其介導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷尚不清楚。鑒于此，本研究通過(guò)建立離體大鼠心肌I/R損傷模型，觀察尼可地爾預(yù)處理對(duì)缺血再灌注心肌的保護(hù)作用，及其對(duì)缺血再灌注誘發(fā)的心肌細(xì)胞凋亡及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 健康雄性(Sprague-dawley SD)大鼠48只，8周齡，SPF級(jí)，體重250 g～280 g，分籠飼養(yǎng)于清潔、恒溫的實(shí)驗(yàn)環(huán)境中，允許自由活動(dòng)，自由取食飲水。將大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。采用隨機(jī)數(shù)字表法將48只大鼠隨機(jī)分為6組(每組8只)：平衡灌注(Bal)組，平衡灌注+尼可地爾預(yù)處理(Bal+Nic100)組，缺血再灌注(I/R Ctrl)組，缺血再灌注+尼可地爾30 μmol/L預(yù)處理(Nic 30)組，缺血再灌注+尼可地爾100 μmol/L預(yù)處理(Nic 100)組，缺血再灌注+尼可地爾300 μmol/L預(yù)處理(Nic 300)組。

1.2 主要試劑及儀器 尼可地爾(sigma-aldrich公司)、GAPDH抗體(sigma-aldrich公司)、GADD153/CHOP抗體(Abcam公司)、GRP78抗體(Abcam公司)、HRP標(biāo)記羊抗兔二抗(武漢博士德生物工程有限公司)、picopure RNA提取試劑盒(Arcturus Bioscience)、Realtime PCR Master Mix(Toyobo公司)；GAPDH管家基因(Sangon公司)、PCR引物及寡核苷酸序列(Sangon公司)、凝膠成像系統(tǒng)(Biotop公司)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(Agilent公司)、PowerLab生理信號(hào)采集系統(tǒng)(AD Instruments公司)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 動(dòng)物模型建立及實(shí)驗(yàn)方案 1 000 IU/kg體重的肝素鈉經(jīng)腹腔注射，20 min后經(jīng)腹腔注射2%的戊巴比妥鈉(50 mg/kg)麻醉。將大鼠固定于仰臥位，開(kāi)胸，剪開(kāi)心包，迅速將心臟取出，置于4 ℃的改良K-H液中，擠壓心臟排出心腔殘余血液，將多余組織修剪掉，把充滿(mǎn)K-H液套管插進(jìn)主動(dòng)脈并固定好。快速連接套管至Langendorff離體灌注裝置上，使用改良K-H液進(jìn)行灌流。采用恒流泵維持灌流系統(tǒng)的灌注壓在80 cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa)；恒溫系統(tǒng)保持灌流液的溫度為37 ℃。離體心臟平衡灌流20 min穩(wěn)定跳動(dòng)后，于左心房壁上切開(kāi)一個(gè)小孔，取小乳膠水囊通過(guò)二尖瓣插進(jìn)左心室中，采用連接導(dǎo)管及三通管將其與壓力轉(zhuǎn)換器相連。壓力換能器信號(hào)經(jīng)橋式放大器，輸?shù)絇owerLab/8s多道生理信號(hào)采集分析系統(tǒng)，并采用Lab chart軟件采集處理各種信號(hào)。離體心臟再經(jīng)過(guò)25 min的平衡灌流后，給予持續(xù)30 min的全心缺血，即缺血(Ischemia)期，期間停止灌流，心臟浸泡在37 ℃的 K-H液中；之后恢復(fù)灌流，持續(xù)120 min，即再灌注(Reperfusion)期。尼可地爾組在缺血前分別給予不同濃度的尼可地爾(Nic 30 μmol/L，100 μmol/L，300 μmol/L)持續(xù)灌流5 min，之后以灌流液洗脫5 min，再進(jìn)入缺血期及再灌注期。排除標(biāo)準(zhǔn)：平衡灌流20 min后，心率<170次/min，左心室最高收縮壓<70 mmHg，或室顫持續(xù)>5 min。

1.3.2 心臟功能相關(guān)指標(biāo) 連續(xù)記錄整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的各項(xiàng)心功能參數(shù)：左心室舒張末壓(left ventricular end-diastolic pressure，LVEDP)、左心室收縮峰壓(left ventricular peak systolic pressure，LVPSP)，并計(jì)算左心室發(fā)展壓(left ventricular developing pressure，LVDP)，LVDP=LVPSP-LVEDP；左心室等容期壓力最大變化速率(the derivative of left ventricular pressure，±dP/dt max)、心率(heart rate，HR)。

1.3.3 冠脈流出液中乳酸脫氫酶(LDH)活性 各組于平衡灌流期及復(fù)灌120 min完成后各收集冠脈流出液2 mL。采用LDH試劑盒檢測(cè)LDH的活性，按試劑盒使用說(shuō)明書(shū)操作。

1.3.4 心肌梗死面積 采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色測(cè)定最終心肌梗死面積。用Image J圖像分析軟件，分析左室心肌片總面積及梗死區(qū)面積(TTC未染區(qū))；心肌梗死面積比=左室梗死區(qū)(未染區(qū))面積/心肌片總面積。

1.3.5 心肌組織中的GRP78、CHOP mRNA表達(dá)水平 采用Real-Time PCR檢測(cè)各組心肌組織中GRP78、CHOP mRNA表達(dá)水平。各目的基因引物均由上海生工合成(詳見(jiàn)表1)，采用GAPDH為管家基因。

表1 各基因PCR引物信息

1.3.6 心肌組織中各種因子的表達(dá)水平 采用Western blot法檢測(cè)各組心肌組織中的GRP78、CHOP的蛋白表達(dá)變化。應(yīng)用Gel-Pro Analyzer 3.0軟件對(duì)各蛋白條帶進(jìn)行定量分析。

2 結(jié) 果

2.1 尼可地爾對(duì)離體缺血再灌注心臟心功能的影響 與平衡灌流期比較，再灌注120 min后各處理組心臟的各項(xiàng)心功能指標(biāo)：LVDP、LVEDP及± dp/dt max等明顯受損(P<0.05或P<0.01)。與I/R Ctrl組比較，尼可地爾預(yù)處理可顯著改善離體缺血再灌注心臟的LVDP、LVEDP、±dp/dt max、HR(P<0.05或P<0.01)。當(dāng)尼可地爾劑量增加時(shí)，心功能各項(xiàng)指標(biāo)恢復(fù)更加明顯(P<0.05或P<0.01)。詳見(jiàn)表2。

表2 尼可地爾對(duì)離體缺血再灌注心臟心功能指標(biāo)的影響

2.2 尼可地爾對(duì)離體缺血再灌注心臟冠脈流出液中LDH活性水平的影響 各組大鼠離體灌流心臟平衡灌流期冠脈流出液中的LDH活性水平比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。與平衡灌流期比較，各處理組再灌注120 min后冠脈流出液中的LDH活性水平顯著上升(P<0.01)；而尼可地爾預(yù)處理各組冠脈流出液中的LDH活性水平顯著低于I/R Ctrl組(P<0.05或P<0.01)，隨著尼可地爾劑量的增加，降低冠脈流出液中LDH活性水平的效果越明顯。詳見(jiàn)圖1。

注：與I/R Ctrl組比較，*P<0.05，**P<0.01；與Baseline期比較，#P<0.01，##P<0.01。

圖1 尼可地爾對(duì)離體缺血再灌注心臟冠脈流出液中LDH 活性水平的影響

2.3 尼可地爾對(duì)離體缺血再灌注心臟心肌梗死面積

的影響 采用TTC染色發(fā)現(xiàn)，I/R Ctrl組的心肌梗死面積為(48.4±6.7)%。與I/R Ctrl組比較，提示尼可地爾預(yù)處理可顯著縮小心肌梗死面積[Nic 30組(33.8±4.3)%，P<0.05；Nic 100組(25.2±3.8)%，P<0.01，Nic 300組(20.6±2.1)%，P<0.01]，隨著尼可地爾劑量增加，縮小心肌梗死面積的效果越明顯。詳見(jiàn)圖2。

注：與I/R Ctrl組比較，*P<0.05，**P<0.01。

圖2 尼可地爾對(duì)離體缺血再灌注心臟心肌梗死面積的影響

2.4 尼可地爾對(duì)離體缺血再灌注心肌GRP78及CHOP的 mRNA表達(dá)的影響 采用Real-Time PCR法分別檢測(cè)各組心肌組織中GRP78及CHOP 的mRNA表達(dá)變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，I/R Ctrl組、Nic 30組、Nic 100組、Nic 300組心肌組織中GRP78 mRNA的表達(dá)量分別是Bal 組的14.50倍、 11.92倍、6.84倍、2.25倍，CHOP mRNA的表達(dá)量分別是Bal 組的5.28倍、 3.32倍、2.15倍、2.33倍。與Bal 組比較，離體缺血再灌注心肌組織中GRP78及CHOP mRNA的表達(dá)顯著上調(diào)，而尼可地爾預(yù)處理可呈劑量依賴(lài)性降低GRP78及CHOP mRNA的表達(dá)(Nic 30組與I/R Ctrl組比較，P<0.05；Nic 100組及Nic 300組與I/R Ctrl組比較，P<0.01)。提示尼可地爾預(yù)處理不影響平衡灌流離體心臟心肌組織中GRP78及CHOP mRNA的表達(dá)。詳見(jiàn)圖3。

注：圖A為各組GRP78 mRNA的相對(duì)表達(dá)量比較；圖B為各組CHOP mRNA的相對(duì)表達(dá)量比較。與I/R Ctrl組比較，*P<0.05，**P<0.01；與Bal組比較，#P<0.05，##P<0.01。

圖3 尼可地爾對(duì)離體缺血再灌注心肌GRP78及CHOP mRNA表達(dá)的影響

2.5 尼可地爾離體缺血再灌注心肌CHOP及GRP78蛋白表達(dá)的影響 采用Western blot法檢測(cè)ERS標(biāo)志因子GRP78及促凋亡轉(zhuǎn)錄因子CHOP的蛋白表達(dá)變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與Bal組比較，缺血再灌注后心肌組織中的GRP78及CHOP蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P<0.01)；與I/R Ctrl組比較，尼可地爾預(yù)處理各組心肌組織中的CHOP及GRP78蛋白表達(dá)水平顯著降低(P<0.05或P<0.01)。而尼可地爾預(yù)處理不影響平衡灌流離體心臟心肌組織中GRP78及CHOP的蛋白表達(dá)。詳見(jiàn)圖4。

注：與I/R Ctrl組比較，*P<0.05，**P<0.01；與Bal組比較，#P<0.05，##P<0.01。

圖4 尼可地爾對(duì)缺血再灌注心肌CHOP及GRP78蛋白表達(dá)的影響

3 討 論

Langendorff離體心臟灌流模型可較好地排除其他器官、體液環(huán)境及神經(jīng)系統(tǒng)信號(hào)等因素對(duì)心臟功能的影響，揭示某種藥物對(duì)不同心臟參數(shù)的潛在作用，還可精確控制給藥濃度，準(zhǔn)確判斷藥物的量效關(guān)系，因此研究藥物對(duì)心臟的直接作用明顯。目前廣泛用于心血管病及藥理學(xué)研究，從單一基因改變對(duì)心臟生理學(xué)的影響，到各種心肌保護(hù)措施的機(jī)制研究，均可采用這一實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蚚4-6]。本研究采用Langendorff灌流裝置，建立離體大鼠心肌缺血再灌注損傷模型，分別給予不同劑量尼可地爾預(yù)處理，驗(yàn)證尼可地爾對(duì)缺血再灌注心肌的保護(hù)作用、及其對(duì)缺血再灌注誘發(fā)的心肌損傷、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)的影響。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在大鼠離體心肌缺血再灌注損傷模型中，尼可地爾預(yù)處理可呈劑量依賴(lài)性地促進(jìn)缺血再灌注后心臟功能的恢復(fù)，減輕心肌組織損傷，縮小

心肌梗死面積，證實(shí)尼可地爾預(yù)處理可減輕心肌缺血再灌注損傷，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[7-9]。Horn等[10]在大鼠離體缺血再灌注模型中研究發(fā)現(xiàn)，尼可地爾可通過(guò)激活鉀通道及促進(jìn)一氧化氮釋放而發(fā)揮心肌保護(hù)作用。在兔離體心臟模型中研究發(fā)現(xiàn)，尼可地爾在缺血之前不能改變激活恢復(fù)時(shí)間間隔(activation recovery interval，ARI)；但在缺血開(kāi)始后，它能縮短ARI，并縮小心肌梗死面積達(dá)90%。線(xiàn)粒體KATP通道阻滯劑5-羥基奎酸鹽(5-HD)可取消尼可地爾的保護(hù)效應(yīng)，而不影響ARI[11]。Lu等[12]在離體大鼠心肌I/R損傷模型中研究發(fā)現(xiàn)，尼可地爾預(yù)處理(缺血前10 min給藥)可保護(hù)心臟I/R后的左心室功能，其機(jī)制可能與開(kāi)放線(xiàn)粒體KATP通道，減少活性氧(reactive oxygen species，ROS)自由基，增加冠脈血流有關(guān)。上述研究證實(shí)，尼可地爾的心肌保護(hù)作用可能通過(guò)激活線(xiàn)粒體KATP通道而實(shí)現(xiàn)，其機(jī)制是否涉及對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)的影響未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。

有研究報(bào)道顯示，尼可地爾可顯著減少動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)標(biāo)志物CHOP和GRP78的表達(dá)水平[3]。而本研究發(fā)現(xiàn)，尼可地爾可抑制心肌缺血再灌注誘發(fā)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)標(biāo)志因子GRP78及CHOP的表達(dá)。近年來(lái)，多項(xiàng)研究證實(shí)缺血或再灌注可激活心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)[13]。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞模擬缺血時(shí)可誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶GRP78及CHOP的表達(dá)增高。采用小分子干擾核糖核酸(SiRNA)抑制CHOP的表達(dá)，可減輕缺血導(dǎo)致的心肌細(xì)胞凋亡。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ERS在缺血相關(guān)的心肌細(xì)胞損傷中具有重要作用[14]。在體外Langendorff灌流的小鼠心肌I/R損傷模型中發(fā)現(xiàn)，GRP78和GRP94的表達(dá)上調(diào)[15]。Zhang等[16]采用Langendorff離體大鼠心臟I/R模型研究發(fā)現(xiàn)，提前給予Ghrelin腹腔注射可減低心肌CHOP和caspase-12蛋白的表達(dá)水平，減輕心肌損傷和細(xì)胞凋亡，并顯著改善I/R導(dǎo)致的心臟功能損傷；進(jìn)一步在體外實(shí)驗(yàn)中證實(shí)，Ghrelin能直接抑制衣霉素和二硫蘇糖醇誘導(dǎo)的培養(yǎng)心肌細(xì)胞的ERS反應(yīng)。因此認(rèn)為Ghrelin能通過(guò)抑制ERS介導(dǎo)的凋亡途徑減輕心肌I/R損傷。可見(jiàn)，多種心肌保護(hù)措施可以通過(guò)抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)而對(duì)缺血再灌注心肌發(fā)揮保護(hù)作用。

綜上所述，本研究證實(shí)大鼠離體心肌I/R模型中，尼可地爾可呈劑量依賴(lài)性地減輕心肌缺血再灌注損傷，其機(jī)制可能與抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)信號(hào)通路相關(guān)因子的表達(dá)有關(guān)。

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(本文編輯薛妮)

Nicorandil Protect the Myocardium from Ischemia Reperfusion Injury through Inhibiting Endoplasmic Reticulum Stress in Rats

Ye Ming，Wu Hui

The First College of Clinical Medical Sciences，China Three Gorges University，Yichang 443003，Hubei，China；Corresponding Author：Wu Hui，Yichang Central People’s Hospital，Yichang，Hubei，China

Objective To observe the effect of nicorandil preconditioning on rat in vitro myocardial ischemia reperfusion(I/R)injury and the expression of the key factors in endoplasmic reticulum stress signal pathway.Methods Forty-eight Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into six groups：balance group，balance+100 μmol/L nicorandil preconditioning group，I/R control group，30 μmol/L nicorandil preconditioning group，100 μmol/L nicorandil preconditioning group and 300 μmol/L nicorandil preconditioning group.Hearts from each group were excised and subjected to 30 min global ischemia followed by 120 min reperfusion in a Langendorff apparatus.Homodynamic parameters of left ventricular (LV) were recorded and evaluated with Powerlab system，including LV developed pressure (LVDP)，LV end-diastolic pressure (LVEDP)，and the derivative of left ventricular(+dP/dtmax and -dP/dtmax).Cell death was reflected by lactate dehydrogenase (LDH) activity assay in coronary effluent.Cardiac infarct size was also measured after nicorandil treatment by Triphenyl Tetrazolium Chloride (TTC) staining.The mRNA levels of ER stress markers，including glucose-regulated protein (GRP) 78 and C/-EBP homologous protein (CHOP) were examined by real time-PCR.The protein expressions of GRP78 and CHOP were detected by western blot.Results Nicorandil preconditioning improved post-ischemic cardiac function of isolated rat heart in a concentration dependent manner，and reduced LDH activity in coronary effluent.Consistent with the above observation，nicorandil preconditioning significantly reduced the infarct size after ischemia reperfusion.The mRNA level and protein expression of GRP78 and CHOP were upregulated in I/R heart.When the I/R hearts were treated with nicorandil，both CHOP and GRP78 levels were significantly attenuated，which emerged in an dose-dependent way.Conclusion Nicorandil preconditioning could alleviate myocardial I/R injury，ameliorate post-ischemic contractile function recovery，and inhibit endoplasmic reticulum stress induced by myocardial I/R in a dose-dependent manner in vivo.

ischemia reperfusion injury；nicorandil；myocardium； left ventricular developed pressure； left ventricular end-diastolic pressure； the derivative of left ventricular；heart rate；lactate dehydrogenase； glucose-regulated protein 78； C/-EBP homologous protein

湖北省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.2015CFB286)

三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院/湖北省宜昌市中心人民醫(yī)院(湖北宜昌 443003)

吳輝，E-mail：cardiology_wh@126.com

信息：葉明，吳輝.尼可地爾保護(hù)大鼠缺血再灌注心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激機(jī)制的研究[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2017，15(11)：1310-1314.

R542.2 R256

A

10.3969/j.issn.1672-1349.2017.11.007

1672-1349(2017)11-1310-05

2017-01-25)