不同時期母乳中脂肪酸水平的變化

李 慧，郭倩穎，柳 鵬，張巖春，戴智勇，高 瑩，王軍波

(1北京大學公共衛生學院營養與食品衛生學系，北京100191； 2食品安全毒理學研究與評價北京市重點實驗室，北京 100191； 3北京大學人民醫院，北京 100044；4澳優乳業(中國)有限公司，長沙 410200； 5中國科學院上海生命科學研究院營養科學研究所，上海 200031)

不同時期母乳中脂肪酸水平的變化

李 慧1，2，郭倩穎3，柳 鵬3，張巖春4，戴智勇4，高 瑩5，王軍波1，2

(1北京大學公共衛生學院營養與食品衛生學系，北京100191；2食品安全毒理學研究與評價北京市重點實驗室，北京 100191；3北京大學人民醫院，北京 100044；4澳優乳業(中國)有限公司，長沙 410200；5中國科學院上海生命科學研究院營養科學研究所，上海 200031)

目的：了解不同哺乳期母乳中各種脂肪酸水平的差異及其變化趨勢，為母乳喂養及嬰幼兒配方奶粉的配制提供科學依據。方法：收集2015年7月—2016年3月，在北京大學人民醫院足月順產的25～40歲產婦產后1～5d的初乳、6～10d的過渡乳和30d的成熟乳123份，采用氣相色譜質譜聯用法(GC-MS)檢測母乳中的脂肪酸成分，分析母乳中各脂肪酸水平的差異及隨時間的變化趨勢。結果：隨著泌乳時間的延長，C18∶0、C14∶1ω5、C18∶3ω6水平和ω-6/ω-3比例呈增高趨勢；C24∶0、C16∶1ω9、C20∶1ω9、C20∶2ω6、C20∶3ω6、C20∶4ω6(AA)、C22∶2ω6、C22∶4ω6、C22∶5ω6、C22∶5ω3和C22∶6ω3(DHA)水平呈下降趨勢，總體SFA含量逐漸增加，但無顯著性意義；而PUFA 尤其是ω-3 PUFA水平顯著減少(P<0.05)。 結論：母乳中的各種脂肪酸隨著泌乳時間的延長而不斷變化，新生兒喂養及配方奶粉的配制時應考慮母乳中各種脂肪酸含量的微觀變化。

母乳；脂肪酸；飽和脂肪酸；單不飽和脂肪酸；多不飽和脂肪酸

自20世紀80年代起，母乳成分的含量及其質量就一直受到研究者們的關注[1-4]。研究發現，隨著個體種族差異、母親身體狀況以及泌乳時間等因素的影響，母乳中宏量營養素的水平也會隨之發生變化[5-6]。國內外關于母乳中各種脂肪酸水平的動態變化的研究較少。脂肪酸作為母乳中的一種營養物質，能提供嬰兒所需能量的45%～55%[7]和必需脂肪酸，對嬰兒大腦、視網膜、認知能力的發育具有重要的促進作用[8]，了解不同泌乳期母乳中脂肪酸組成與含量的差異及隨著時間的變化趨勢，對科學模擬母乳進行嬰幼兒奶粉配制可為母乳喂養及嬰幼兒配方奶粉的配制提供科學依據。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

選擇2015年7月—2016年3月在北京大學人民醫院足月順產的，年齡25～40歲，本科及以上學歷，無嚴重的心、肝、肺、腎、內分泌疾病、遺傳性疾病、精神心理疾患以及傳染性疾病，分娩后仍在本地居住，且采用母乳喂養，母親本人及家屬愿意配合者進行研究。排除早產、低出生體重兒(<2 500g)的母親，在哺乳期間再次妊娠，4w內參加過其他臨床試驗或相關資料收集不全者。

1.2 乳樣采集

連續收集每位產婦產后1～5d的初乳、6～10d的過渡乳和30d的成熟乳。由于產后早期，手擠法可以獲得更多的初乳[9]，因此本研究以手法擠乳為主，消毒器具擠奶為輔，采樣前洗手并清潔產婦乳房，采樣后恒溫水箱62.5℃消毒，-80℃冰箱保存待測。

1.3 母乳脂肪酸檢測

1.3.1 試劑 Nu-chek 569B脂肪酸甲酯混合標準品、甲醇/氯仿(1∶1)、內標(0.5mg/mL C19∶0甲醇溶液)、二氯甲烷、甲基化試劑(MeOH∶H2SO4=25∶1)、正己烷、去離子水、異辛烷等。

1.3.2 儀器 氣相色譜儀GC-6890-MS、7673 自動進樣儀(Palo Alto，California)。

1.3.3 標本處理及檢測方法 采用甲酯化法對母乳樣本中的脂肪酸進行抽提和酯化；以氦氣為載氣(流速為0.7mL /min)，熔融石英毛細管柱SP-2560(100m × 0.25mm × 0.20 μm)作為色譜柱，取1μL脂肪酸甲酯10：1分流進樣，進樣器溫度240℃；程序升溫：初始溫度90℃，以10℃/min升溫到170℃，保持5min；5℃/min升溫至175℃，保持1min；1℃/min升溫至210℃，保持5min；5℃/min升溫至240℃，保持20min。

MS參數：電子轟擊離子源EI；溶劑延長時間：12min；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；質譜接口溫度：250℃；四極桿質量掃描范圍：40～400amu。

根據脂肪酸的質譜特征離子和保留時間定性，利用內標及已知質量的脂肪酸甲酯混合物(GLC569B；NuCheck Prep，Elysium，Minnesota)作為標準進行定量。用ChemStation E.02.01軟件進行數據分析。

1.4 統計學分析

使用SAS 9.3對數據進行統計分析。母乳脂肪酸水平以百分含量用中位數和四分位間距表示。對不同時期的脂肪酸水平進行正態性檢驗、方差齊性及球形性檢驗，采用重復測量資料的方差分析比較各時期母乳中的脂肪酸水平差異，并用一元線性回歸分析脂肪酸水平隨時間的變化趨勢。檢驗水準為α=0.05。

2 結果與分析

2.1 一般情況

本研究共收集初乳、過渡乳和成熟乳樣本123份，納入統計分析者為同時具有各時期樣本的乳母24人(72份樣本)。所有研究對象均為本科及以上學歷，平均年齡為31.7± 3.6歲。檢測母乳中飽和脂肪酸(SFA)10種，約占脂肪酸總量的37.34%；單不飽和脂肪酸(MUFA)6種，占總脂肪酸的35.38%；ω-6系列多不飽和脂肪酸(ω-6 PUFA)9種、ω-3系列多不飽和脂肪酸(ω-3 PUFA)4種，分別占總脂肪酸的24.46%和1.96%。

2.2 不同時期母乳中各脂肪酸水平的差異及趨勢性

附表結果顯示，C10∶0、C12∶0、C14∶0、C18∶0、C24∶0、C16∶1ω9、C20∶1ω9、C18∶3ω6、C20∶2ω6、C20∶3ω6、C20∶4ω6(AA)、C22∶2ω6、C22∶4ω6、C22∶5ω6、C22∶5ω3和C22∶6ω3(DHA)水平在初乳、過渡乳和成熟乳中存在顯著差異(P<0.05)；綜合分析，ω-3 PUFA、ω-6/ω-3以及C20：4ω6/ C22：6ω3 (AA/DHA)比值隨著泌乳期的延長而發生顯著改變(P<0.05)。而對于其他SFA、ω-6 PUFA水平以及C20∶5ω3/ C22∶6ω3 (EPA/DHA)、C20∶5ω3/ C18∶3ω3 (EPA/ALA)、AA/EPA、AA/DHA等比值則未見顯著性變化。趨勢性檢驗結果顯示，隨著泌乳時間的延長，C18∶0、C14∶1ω5、C18∶3ω6水平和ω-6/ω-3比例呈顯著增高趨勢；而C24∶0、C16∶1ω9、C20∶1ω9、C20∶2ω6、C20∶3ω6、AA、C22∶2ω6、C22∶4ω6、C22∶5ω6、C22∶5ω3和DHA水平呈下降趨勢(P<0.05)，總體SFA逐漸增加，但無顯著性意義；而PUFA 尤其是ω-3 PUFA水平顯著減少(P<0.05)(附表)。

3 討論

本研究脂肪酸測定，采用氣相色譜質譜聯用技術(GC-MS)靈敏度較高、且穩定性好[10]，可測定30余種脂肪酸，更全面地反映母乳中脂肪酸的分布及差異。本研究還收集了初乳、過渡乳、成熟乳3個不同階段的母乳樣本，控制了研究對象的年齡、文化程度、地區等因素，使得不同時期的組間可比性更強。

附表 不同時期母乳中各種脂肪酸水平的差異及其隨時間的變化趨勢

注：Fa和P值由重復測量資料的方差分析檢驗所得；Fb和Ptrend由一元線性回歸分析所得；*P<0.05

母乳脂肪酸具有其特定的組成，本研究中SFA、PUFA、MUFA分別占總脂肪酸的37.34%、26.76%和35.38%，與國內外其他報道中各脂肪酸所占的比例范圍類似[11-13]。所測母乳脂肪酸中以油酸(C18∶1ω9)含量最多，約占總脂肪酸的30%，其次為棕櫚酸(C16∶0)(23%)和亞油酸(C18∶2ω6，LA)(21%)；3種脂肪酸在初乳、過渡乳、成熟乳各階段的水平較穩定，沒有發生顯著性變化，與吳立芳[14]、杜芳芳[15]等的研究結果一致。母乳中SFA的含量隨著泌乳時間的延長而逐漸增加，其中天然存在于母乳中的月桂酸(C12∶0)、肉豆蔻酸(C14∶0)在不同時期中水平含量存在顯著差異，但該變化無顯著的趨勢性，而肉豆蔻油酸(C14∶1ω5)雖然在各階段母乳中水平無顯著性差異，卻有隨著時間延長而上升的趨勢。有研究顯示，當乳母膳食中脂肪攝入較少[16]或者延長哺乳期[17]時，母乳中的月桂酸和肉豆蔻酸的含量會增加。硬脂酸(C18∶0)含量也隨著哺乳期的延長顯著增加，而C24∶0水平則顯著下降。Mihályi等[13]對匈牙利母親哺乳第1天、第6周和第6個月時的母乳成分進行比較也發現硬脂酸含量在初乳中含量最低，隨后逐漸升高。而陳愛菊等[13]對上海地區的人乳脂肪酸研究顯示在初乳、過渡乳和成熟乳中C10∶0、C12∶0、C14∶0水平存在顯著差異，C24∶0在初乳中含量最高，在過渡乳和成熟乳中逐漸下降，但硬脂酸水平卻逐漸減小，在對長春、重慶、上海等地的母乳成分進行比較則發現，母乳中的硬脂酸在第1～7d逐漸降低，而到第42天逐漸增加，各地區間存在顯著差異[19]。

Moltó-Puigmartí[20]等對巴塞羅那市區產婦的初乳、過渡乳和成熟乳中脂肪酸分析結果顯示，十八碳以上的MUFA如C20∶1ω9、C22∶1ω9含量從初乳到成熟乳顯著降低。由于母乳中二十碳以上的MUFA含量很少，檢測數據離散程度較大，本研究中未予討論。所檢測的MUFA結果顯示，總體MUFA水平穩定，C16∶1ω9和C20∶1ω9在初乳中含量最高，隨后逐漸降低，其他MUFA水平無顯著性改變。可能是由于母乳中的脂肪酸除了可通過內源性貯藏的脂肪動員、乳腺和肝臟組織的自身合成而獲得外，還可以來自食物中的脂肪。因此，母親的飲食會影響母乳中的脂肪酸成分[21]。不同國家和地區，由于飲食習慣的不同，人乳中的脂肪酸成分也會有所差別。

對于與人體健康密切相關的多不飽和脂肪酸，一直受到研究者們的關注。ω-6 PUFA系列的LA和ω-3 PUFA系列的ALA作為人體的必需脂肪酸，可促進嬰兒大腦和視網膜的發育，但自身不能合成，只能通過食物獲取。母乳是嬰幼兒獲得這些脂肪酸的重要來源，尤其是純母乳喂養的嬰兒。本研究發現，母乳中LA含量豐富，且在初乳、過渡乳、成熟乳中穩定存在。ALA和LA在體內可通過碳鏈延長和脫飽和作用分別形成與嬰幼兒生長發育直接相關的DHA、EPA以及AA。DHA和AA是大腦中的主要結構性脂肪酸，兩者在大腦中的含量相當，約占總脂肪酸的25%[22]。新生兒在出生后的前幾個月腦部發育尚未完成，腦細胞的數量、體積仍在增長，是腦部發育的關鍵時期，為滿足這一時期的生長發育需求，必須供給嬰兒豐富的DHA，而此時嬰兒體內的脂肪酸去飽和酶活性較低，自身合成能力低下，因此在早期的母乳中DHA含量較高。隨著嬰幼兒發育的逐漸成熟、自身合成能力的提高，母乳中的DHA和AA含量逐漸下降。Weiss等[23]對1個月內的母乳成分進行分析也發現，隨著時間的延長，DHA和AA呈下降趨勢，但AA水平的下降無顯著性意義。在本研究中DHA和AA水平均呈顯著降低趨勢，DHA的前體脂肪酸除C22∶5ω3含量降低外，其他如ALA、EPA以及AA/DHA的比值則沒有明顯的變化；AA的前體脂肪酸C20∶2ω6、C20∶3ω6及下游產物C22∶2ω6、C22∶4ω6和C22∶5ω6含量逐漸降低，而C18∶3ω6水平增加；這與嬰幼兒的生長發育相適應，隨著時間的延長，嬰兒體內的脂肪酸碳鏈延長酶和減飽和酶活性逐漸成熟，可利用C18∶2ω6、C18∶3ω6等前體脂肪酸自身合成長鏈PUFA[24]，對母乳中的這些脂肪酸的需求降低。總體而言，ω-3 PUFA水平隨著泌乳時間的延長呈下降趨勢，ω-6 PUFA水平保持穩定，但是ω-6長鏈脂肪酸水平逐漸減小，與Mihályi[13]、Moltó-Puigmartí[20]等所得結果一致。Jiang等[25]對杭州、蘭州和北京等地的母乳進行研究則發現，隨著時間的延長，ω-3 PUFA水平保持穩定，而ω-6 PUFA逐漸下降；同時，他們也發現ω-6 PUFA和ω-3 PUFA水平變化在北京、杭州等產婦中的存在顯著性差異。可見，各研究結果仍存在一定的差異，產后不同時期母乳中脂肪酸水平的變化比較還需結合各地區乳母的飲食攝入情況、人種等因素綜合考慮。

為適應嬰幼兒生長發育的需求，母乳中的各種脂肪酸水平隨著泌乳時間的延長而不斷發生著變化。因此，在進行新生兒喂養以及配方奶粉的配制時應考慮各種脂肪酸等營養素的微觀變化，使之更符合嬰幼兒的營養需求。◇

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(責任編輯 李婷婷)

Changes in Fatty Acids Among Colostrum，Transitional，and Mature Milk from Chinese Women

LI Hui1，2，GUO Qian-ying3，LIU Peng3，ZHANG Yan-chun4，DAI Zhi-yong4，GAO Ying5，WANG Jun-bo1，2

(1Department Of Nutrition and Food Hygiene，School of Public Health，Peking University，Beijing 100191，China;2Beijing Key Laboratory of Toxicological Research and Risk Assessment for Food Safety，Peking University，Beijing 100191，China;3Peking University People’s Hospital，Beijing 100044，China；4Ausnutria Dairy (China)Company Ltd，Changsha 410200，China；5CAS Key Laboratory of Nutrition and Metabolism，Institute for Nutritional Sciences， Shanghai Institutes for Biological Sciences，Chinese Academy of Sciences，Shanghai 200031，China)

human milk；fatty acids；saturated fatty acids(SFA)；polyunsaturated fatty acids；monounsaturated fatty acids

長沙市科技計劃項目(項目編號：K1005092-11)。

李 慧(1991— )，女，在讀碩士研究生，研究方向：營養與疾病。

王軍波(1973— )，男，博士，副教授，研究方向：營養與疾病、嬰幼兒營養。