室溫下不同血液標本及存放時間對神經元特異性烯醇化酶檢測結果的影響

郭健

【摘要】 目的：分析研討室溫下不同血液標本及存放時間對神經元特異性烯醇化酶（NSE）檢測結果的影響。方法：隨機采集25名健康體檢者的血樣本，空腹采集靜脈血，將每份血液分別用肝素抗凝管（設為對照組）和促凝劑管/分離膠管（設為研究組），在1 h內離心，并檢測血液標本中NSE水平，再將標本存放于室溫（25±0.5）℃中，分別測定存放2、3、4 h時的NSE水平。結果：對照組血液樣本在室溫下放置1～4 h時NSE水平均明顯高于研究組，組間數據比較差異有統計學意義（P<0.05）；研究組血液標本在室溫下存放不同時間點的NSE檢測結果對比差異無統計學意義（P>0.05）；對照組血液標本在室溫下存放2、3、4 h時NSE檢測結果均顯著高于1 h時，且4 h時NSE檢測結果均高于2、3 h，組間數據比較差異有統計學意義（P<0.05）。結論：室溫存放4 h內的促凝管/分離膠管血液樣本，其重復性較好，檢測結果可靠，可作為臨床樣本復核、檢測，為分析前檢測質量提供科學合理依據。

【關鍵詞】 神經元特異性烯醇化酶； 血液標本； 室溫； 存放時間； 檢測結果

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.11.038 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2017）11-0070-02

神經元特異性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）主要是參與糖酵解途徑中的一種甘油分解而出的最后的酶，其存在于神經內分泌組織以及神經組織中[1]。并且NSE在腦組織細胞中的活性最高，其次神經分泌組織和外周神經組織的活性居中，可作為神經元損傷的一種標志物，同時也可作為一種腫瘤標志物用在垂體腺瘤、小細胞肺癌及神經母細胞癌等疾病的診斷中。由于血小板和紅細胞也有著NSE同工酶共存在，若全血標本存放周期延長或者有溶血現象出現時，這是NES同工酶將會釋放至細胞外，因此引起血清中NES水平明顯偏高[2]。為了減少影響NSE分析的因素，此次將25名健康體檢者的血樣本納入討論中，其目的則在于分析室溫下不同血液標本及存放時間對神經元特異性烯醇化酶（NSE）檢測結果的影響，具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取來筆者所在醫院參與健康體檢者25名，男18名，女7名，年齡26～59歲，平均（43.17±5.09）歲。每位體檢者分別應用肝素鋰真空采血管（對照組）和促凝劑/分離膠（研究組）收集血液標本。

1.2 方法

儀器：羅氏全自動電化學發光免疫分析系統；試劑：采取新購買的配套試劑。兩組均嚴格依照正規操作方式，于空腹狀態下，采集4 ml靜脈血，抗凝管采集后，及時充分混勻，將標本均放置于室溫（25±0.5）℃內，在1 h內離心，檢測NSE水平，血液標本無溶血及明顯黃疸、脂血；離心后再將標本存放于室溫（25±0.5）℃中，分別測定存放2、3、4 h時的NSE水平。血液標本每次檢測時，均要對其上層血漿或血清進行混勻，對每份樣本檢測2次，并取其平均值。

1.3 統計學處理

用SPSS 13.0軟件分析所得數據，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

對照組血液樣本在室溫下放置1～4 h時NSE水平均明顯高于研究組，組間數據比較差異有統計學意義（P<0.05）；研究組血液標本在室溫下存放不同時間點的NSE檢測結果對比差異無統計學意義（P>0.05）；對照組血液標本在室溫下存放2、3、4 h時NSE檢測結果均顯著高于1 h時，且4 h時NSE檢測結果均高于2、3 h，組間數據比較差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

*與存放1 h對比，P<0.05；#與存放2 h對比，P<0.05；△與存放3 h對比，P<0.05

3 討論

NES為烯醇化酶中的一種同工酶，而烯醇化酶是五種同工酶構成，各自由γ、β、α這三種亞基構成的二聚體，在這里面由兩個γ亞基組成的二聚體存在于神經元和神經內分泌細胞，故稱之為NSE。NSE不僅作為反映腦損傷的程度的重要指標之一，而且也是神經母細胞瘤臨床診斷敏感度和特異性、小細胞肺癌較好的腫瘤標志物[3]。

NSE在臨床中應用廣泛，但是其檢測的影響因素較多。NSE在紅細胞和血小板中同時存在，溶血標本肯定會對NSE的檢測結果產生影響。所以，在分離標本的時候要盡可能地避免溶血，在臨床檢驗中若是遇到了溶血標本應該及時退回重新采集，不然簽發檢驗報告的時候必須予以注明。另外標本在處理前的放置過程中，存放時間的延長、不同程度的振蕩、多次離心、溫度的改變等都可能會使紅細胞和血清中的NSE進入血清當中，導致NSE檢測結果的錯誤偏高[4-5]。NSE檢測要求在樣本采集完成后，應該在1 h以內離心樣本并完成NSE的測定。但是實際工作中往往達不到此要求，這是因為病房里的血液標本大多在凌晨6點開始采集，標本被送去測定的時候至少已經過了3 h，另外若是醫院規模過于龐大，則樣本NSE的測定需要推延到第2天送到總院集中測定，故臨床檢驗中的NSE結果往往都是偏高的，這在一定程度上增加了患者的檢查負擔和心理壓力，因此在本試驗中觀察了不同的采血管、標本存放時間對NSE檢測結果的影響，以便能夠為臨床提供更為精確的檢測結果。

本次研究結果顯示放置1 h的標本的NSE檢測結果的差異有統計學意義。當標本放置時間延長后，并且經過了標本的保存、送檢、處理等流程后，這時做的NSE檢測結果和陽性率都有了較大幅度的提高。將標本在低溫下靜置幾小時，不經過任何的處理流程直接進行NSE的測定，其結果差異并有統計學意義。另外在檢驗中，使用血清分離膠可以有效地縮短血液凝固時間，離心完畢后形成的固化屏障隔離層同時可以使細胞和血清完全分離，保證了血清的成分不會受到細胞成分的影響。在日常工作中，醫院應盡量使用分離膠采血管，同時臨床采血人員應能夠正確使用采血管和及時送檢待檢測樣本，當標本送達實驗室時，應立即離心測定，這樣可以縮短標本的放置時間，減少紅細胞和血清間的相互干擾，保證NSE檢測結果的準確性和穩定性[6]。

綜上所述，檢測室溫存放4 h內的促凝管/分離膠管血液樣本，其重復性較好，檢測結果可靠，可作為臨床樣本復核、檢測，為分析前檢測質量提供科學合理依據。

參考文獻

[1]隋靖喆，李山，秦雪，等.標本不同處理因素對神經元特異性烯醇化酶測定的影響[J].國際檢驗醫學雜志，2014，25（14）：1950-1951.

[2] Tolan N V，Vidal-Folch N，Algeciras-Schimnich A，et al.Individualized correction of neuron-specific enolase （NSE） measurement in hemolyzed serum samples[J].Clinica Chimica Acta：International Journal of Clinical Chemistry and Applied Molecular Biology，2013，424（4546）：216-221.

[3]黃嫵姣，田春華，朱偉才，等.不同采血管、標本處理過程以及存放時間對，NSE檢測結果的影響[J].檢驗醫學與臨床，2016，13（15）：2090-2091.

[4]仇彩霞，江崇才，王盛楠，等.影響神經元特異性烯醇化酶檢測的新因素[J].青島醫藥衛生，2013，45（1）：19-21.

[5]謝軍，張俠，李紅林，等.不同血液標本及存放時間對神經元特異性烯醇化酶測定的影響[J].蚌埠醫學院學報，2013，38（12）：1654-1655.

[6] Torsetnes S B，L?vbak S G，Claus C，et al.Immunocapture and LC-MS/MS for selective quantification and differentiation of the isozymes of the biomarker neuron-specific enolase in serum[J].Journal of Chromatography，B.Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences，2013，929（7）：125-132.

（收稿日期：2016-12-23）