垂體腺瘤組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α、白細(xì)胞分化抗原147表達(dá)及其與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的關(guān)系

李深譽(yù) 陽(yáng)永東 黃蕃俊 陳 前 羅朗昭 嚴(yán) 峻

(桂林醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，廣西 桂林 541000)

垂體腺瘤組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α、白細(xì)胞分化抗原147表達(dá)及其與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的關(guān)系

李深譽(yù) 陽(yáng)永東 黃蕃俊 陳 前 羅朗昭 嚴(yán) 峻

(桂林醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科，廣西 桂林 541000)

目的 檢測(cè)垂體腺瘤中缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α和白細(xì)胞分化抗原(CD)147的表達(dá)，關(guān)注二者與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的相關(guān)性。方法 經(jīng)病理確診的垂體腺瘤手術(shù)患者48例為觀察組，6例尸檢中留取的垂體(腺垂體)為對(duì)照組，均留取術(shù)后石蠟包埋組織。應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)兩組HIF-1α、CD147和VEGF的表達(dá)。結(jié)果 觀察組HIF-1α、CD147和VEGF表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(均P<0.05)，觀察組HIF-1α、CD147和VEGF的表達(dá)與是否為侵襲性垂體腺瘤、Ki67的表達(dá)密切相關(guān)(均P<0.05)，而三者均與是否為功能性的腺瘤無(wú)關(guān)(均P>0.05)。線性相關(guān)分析顯示觀察組HIF-1α、CD147和VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論 垂體腺瘤中HIF-1α、CD147和VEGF表達(dá)升高可能與腫瘤侵襲性生長(zhǎng)有關(guān)。HIF-1α、CD147均與VEGF有一定的協(xié)同作用。

垂體腺瘤；缺氧誘導(dǎo)因子-1α；白細(xì)胞分化抗原147；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

垂體腺瘤是鞍區(qū)最常見(jiàn)的腫瘤，部分腫瘤在生長(zhǎng)過(guò)程中可表現(xiàn)為侵襲性，手術(shù)較難完全切除，術(shù)后復(fù)發(fā)率高〔1〕。研究認(rèn)為垂體腺瘤的間質(zhì)富于血管〔2〕。缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α在局部組織缺氧時(shí)產(chǎn)生，對(duì)腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移及血管生成均有重要促進(jìn)作用〔3〕。白細(xì)胞分化抗原(CD)147是跨膜糖蛋白的一種，在腫瘤組織中表達(dá)升高，可以引起腫瘤細(xì)胞增殖，同時(shí)其對(duì)血管生成可能有一定作用〔4〕。本研究檢測(cè)垂體腺瘤中HIF-1α、CD147的表達(dá)，關(guān)注二者與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的關(guān)系，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013年1月至2016年2月桂林醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院進(jìn)行手術(shù)治療并經(jīng)病理證實(shí)為垂體腺瘤患者48例為觀察組，其中男23例，女25例，年齡40～76(平均58.6)歲。均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，患者臨床資料完整。其中侵襲性20例，非侵襲性28例。術(shù)前均行內(nèi)分泌學(xué)檢查及術(shù)后免疫組化檢查分型，其中無(wú)功能型18例，有功能型30例(泌乳素腺瘤7例，生長(zhǎng)激素腺瘤6例，卵泡刺激素腺瘤5例，促皮質(zhì)激素腺瘤4例，促甲狀腺激素腺瘤3例，混合性腺瘤5例)。術(shù)前均未進(jìn)行任何放、化療。6例尸檢中檢取的垂體(腺垂體)作為對(duì)照組，其中男3例，女3例，年齡45～64(平均51.3)歲。兩組性別、年齡無(wú)顯著差異(P>0.05)。

1.2 兩組HIF-1α、CD147和VEGF的檢測(cè) 組織常規(guī)取材后均應(yīng)用石蠟包埋、切片，HIF-1α、CD147和VEGF的檢測(cè)應(yīng)用免疫組化SP法，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，按說(shuō)明書進(jìn)行操作，做好質(zhì)控工作。

1.3 HIF-1α、CD147和VEGF的判定 HIF-1α、CD147和VEGF的表達(dá)部位均為細(xì)胞質(zhì)，以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒樣物質(zhì)為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞。在低倍鏡下染色較為典型區(qū)域進(jìn)行觀察，然后選擇5個(gè)400倍視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值，以陽(yáng)性細(xì)胞≤5%為陰性，>5%為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)及Pearson相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組HIF-1α、CD147和VEGF陽(yáng)性率比較 對(duì)照組HIF-1α、CD147均無(wú)表達(dá)。觀察組HIF-1α、CD147和VEGF陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組HIF-1α、CD147和VEGF陽(yáng)性率比較〔n(%)〕

2.2 觀察組不同臨床特征中HIF-1α、CD147和VEGF陽(yáng)性率比較 觀察組HIF-1α、CD147和VEGF表達(dá)與侵襲性垂體腺瘤、Ki67的表達(dá)密切相關(guān)(均P<0.05)，而與是否為功能性腺瘤無(wú)關(guān)(均P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 觀察組不同臨床特征中HIF-1α、 CD147和VEGF陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

2.3 觀察組HIF-1α、CD147和VEGF表達(dá)的相關(guān)性 觀察組HIF-1α和VEGF呈正相關(guān)(r=0.49,P=0.030 6)，CD147和VEGF呈正相關(guān)(r=0.46,P=0.042 3)。

3 討 論

垂體腺瘤是發(fā)生在蝶鞍的腫瘤，主要來(lái)源于腺垂體細(xì)胞。部分患者表現(xiàn)為侵襲性生物學(xué)行為，通常指突破包膜生長(zhǎng)并侵犯鄰近結(jié)構(gòu)的垂體腺瘤，常向鞍外生長(zhǎng)，侵犯鄰近硬膜、顱骨、海綿竇和包繞頸內(nèi)動(dòng)脈。此種患者手術(shù)時(shí)的風(fēng)險(xiǎn)較高，術(shù)后復(fù)發(fā)率高〔5,6〕。垂體腺瘤形成過(guò)程涉及細(xì)胞增殖、血管生成的各個(gè)環(huán)節(jié)〔7〕。本研究結(jié)果提示HIF-1α、CD147和VEGF三種蛋白高表達(dá)是促進(jìn)垂體腺瘤形成的重要促進(jìn)因素，三者高表達(dá)時(shí)腫瘤呈侵襲性的狀態(tài)。三者高表達(dá)可以在一定程度上促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，這與三者均為腫瘤促進(jìn)基因的特征性一致。HIF-1α、CD147均可以在一定程度上促進(jìn)VEGF的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤間質(zhì)的血管生成。HIF-1是由 HIF-1α 和 HIF-1β亞單位形成的異源性的二聚體，HIF-1α亞基是其活性單位， 與內(nèi)環(huán)境中的低氧有關(guān)，也被稱為缺氧狀態(tài)時(shí)“缺氧基因表達(dá)的總開(kāi)關(guān)”， HIF-1α可以對(duì)下游多個(gè)基因進(jìn)行有效的調(diào)控，并與缺氧相關(guān)的反應(yīng)結(jié)構(gòu)域結(jié)合，誘發(fā)細(xì)胞的低氧反應(yīng)，啟動(dòng)靶基因的轉(zhuǎn)錄〔8,9〕。HIF-1α 可以促進(jìn)間質(zhì)血管的生成步驟：①血管發(fā)生階段：HIF-1α能通過(guò)合成一氧化氮引起血管擴(kuò)張及增加血管壁的通透性；②進(jìn)展階段：HIF-1α通過(guò)上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶進(jìn)而誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，形成出芽狀的新生血管；③形成階段：在 VEGF等血管生成因子的作用下，血管內(nèi)皮細(xì)胞相互吻合成具有功能的血管腔，進(jìn)而形成血管網(wǎng)；④塑形和改建階段：通過(guò)血小板生長(zhǎng)因子等使血管平滑肌或其他細(xì)胞遷移包繞新生血管，同時(shí)形成基質(zhì)，完善血管壁的功能〔10,11〕。而CD147在腫瘤形成中也具有促進(jìn)作用，CD147包括細(xì)胞外N端2個(gè)C2型免疫球蛋白區(qū)、24個(gè)氨基酸殘基組成的跨膜區(qū)和C端39個(gè)氨基酸殘基組成的胞內(nèi)區(qū)，相對(duì)分子量為58 kD，能和其他跨膜蛋白進(jìn)行有效結(jié)合后形成復(fù)合物〔12,13〕。而CD147的胞內(nèi)段在不同種屬中的保守程度非常高，其作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)作用較強(qiáng)〔14〕。也有研究認(rèn)為表皮生長(zhǎng)因子受體中酪氨酸蛋白激酶啟動(dòng)后可以誘導(dǎo) CD147的表達(dá)〔15,16〕。 CD147表達(dá)的改變?cè)赗NA和蛋白質(zhì)兩種水平上影響VEGF的產(chǎn)生，在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，過(guò)表達(dá)CD147能刺激腫瘤血管生成和腫瘤生長(zhǎng)，用反義RNA抑制 CD147表達(dá)，則二者都被抑制〔17〕。HIF-1α、CD147對(duì)間質(zhì)血管生成的作用主要是通過(guò)誘導(dǎo)VEGF表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。

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〔2017-03-16修回〕

(編輯 苑云杰)

2014年度廣西急診與醫(yī)學(xué)求援人才課題資歷項(xiàng)目(No.GXJZ201422)；2016年度廣西醫(yī)藥衛(wèi)生自籌經(jīng)費(fèi)計(jì)劃課題項(xiàng)目(No.Z2016037)

嚴(yán) 峻(1978-)，男，博士，副主任醫(yī)師，主要從事神經(jīng)外科研究。

李深譽(yù)(1984-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事神經(jīng)外科研究。

R739

A

1005-9202(2017)11-2747-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.11.065