烏司他丁治療試驗犬急性壞死性胰腺炎的臨床觀察

魯夢婷， 薛新梅， 魏 娜， 林德貴

(1.新疆巴音郭楞蒙古自治州動物疾病控制與診斷中心 ， 新疆巴州841000 ； 2.西班牙海博萊生物大藥廠股份公司北京代表處 ， 北京海淀100086 ； 3.中國農業大學動物醫學院 ， 北京海淀100193)

烏司他丁治療試驗犬急性壞死性胰腺炎的臨床觀察

魯夢婷1， 薛新梅1， 魏 娜2， 林德貴3

(1.新疆巴音郭楞蒙古自治州動物疾病控制與診斷中心 ， 新疆巴州841000 ； 2.西班牙海博萊生物大藥廠股份公司北京代表處 ， 北京海淀100086 ； 3.中國農業大學動物醫學院 ， 北京海淀100193)

為了探討烏司他丁(尿抑制素 ,Ulinastatin)治療犬急性壞死性胰腺炎的療效，為臨床治療犬急性壞死性胰腺炎提供參考依據。選用18只健康試驗犬，隨機分成3組，分別為對照組，低劑量烏司他丁治療組和高劑量烏司他丁治療組。3組試驗犬通過改良胰管逆行注射法，造出胰腺炎模型。觀察對比3組試驗犬的臨床癥狀、血常規、生化、B超影像變化。結果顯示：(1)烏司他丁治療組試驗犬精神狀態、活動性等較對照組好，嘔吐、腹瀉較輕，而且臨床癥狀隨著用藥劑量增加而減輕；(2)烏司他丁治療組試驗犬血常規、生化指標顯著低于對照組，而且隨用藥劑量的增加而降低。結果證明，烏司他丁能有效改善犬重癥急性壞死性胰腺炎的臨床癥狀，降低重癥急性胰腺炎并發癥的發生率，2萬 IU/kg體重烏司他丁的治療效果比1萬 IU/kg體重烏司他丁的治療效果更好。

犬 ； 急性壞死性胰腺炎 ； 烏司他丁 ； 療效

急性胰腺炎(AP)是犬消化科的常見危急重癥，發病急、并發癥多、病死率高。臨床以急性腹痛、嘔吐、發熱、血與尿淀粉酶增高為特點。烏司他丁能有效抑制水解酶活性、抗炎和改善循環體質。本試驗通過造急性胰腺炎模型，探討用不同劑量烏司他丁治療的臨床效果，驗證了不同劑量烏司他丁對試驗犬急性胰腺炎治療效果的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 購自北京市沙河利通試驗動物養殖中心的雜種健康犬18只，體重9±3 kg，年齡1～3歲，雌雄各半。試驗犬隨機平均分為3組，用5%牛磺膽酸鈉(0.1 mL/kg體重)和胰蛋白酶(3 500 U/kg)的混合溶液，通過改良胰管逆行注射法，造出胰腺炎模型。造模后7 d試驗犬禁食禁水。各治療組在模型構建完成后0.5 h開始靜脈滴注，各組動物按照規定治療每天8:00和20:00給試驗犬輸液。對照組A組每天兩次靜脈輸注5%葡萄糖氯化鈉溶液，B組用1萬 IU/kg體重烏司他丁溶于5%葡萄糖氯化鈉溶液每天兩次靜脈輸注，C組用2萬 IU/kg體重烏司他丁溶于5%葡萄糖氯化鈉溶液每天兩次靜脈輸注。每組每天按照0.1 mL/kg體重的劑量皮下注射拜有利。

1.2 樣品的采集及處理 3組動物在麻醉前，造模后0.5 h，造模后12 h，24 h，第3天及第7天時，分別在每天第1次輸液前采集靜脈血，做血常規及生化檢驗；在造模前以及在試驗后48 h及第7天運用B超檢測胰腺在形態結構上的變化。

1.3 統計學分析 所用數據均采用GraphPad Prism 4 Project統計分析軟件進行分析處理，試驗結果用均數±標準差(X±SD)表示。

2 結果與分析

2.1 急性壞死性胰腺炎造模 向主胰管內注入牛磺膽酸鈉和胰蛋白酶復合液15 min后可以看到胰腺充血、出血明顯；造模后1 d，患犬體溫升高，嘔吐，拉血紅色稀便，腹痛，呈“祈禱”式；在模型構建完成第1天，各模型組與造模前相比，血漿淀粉酶含量差異極顯著，達到術前5倍以上，血清脂肪酶含量也達到術前8倍左右，差異極顯著；在模型構建完成48 h，各模型組與造模前相比，B超影像顯示胰腺邊緣不規則增大，回聲增強且不均質，包膜不可見；圍繞胰腺的腸系膜回聲增強，水腫導致低回聲的，均一的網狀結構中有產回聲的小葉組織結構出現；有些犬出現少量腹水。以上結果表明，采用胰管逆行注射法構建急性胰腺炎模型成功，各模型組均構建成功說明了胰管逆行注射法構建的急性胰腺炎模型穩定。

2.2 各組試驗犬白細胞變化情況 見表1。

b：A對B差異顯著； c：A對C差異顯著； d：A對C差異極顯著

從表1可以看出，(1)A組白細胞總數在術后 1 d 高于B組(P<0.05)，明顯高于C組(P<0.01)，在第3天后達到正常值說明烏司他丁在控制白細胞數目上是有療效的；(2)兩個烏司他丁治療組之間白細胞總數差異不顯著(P>0.05)，說明在控制白細胞數目上1萬 IU/kg體重烏司他丁與2萬 IU/kg體重烏司他丁的治療作用相當。

2.3 各組試驗犬淀粉酶變化情況 見表2。

表2 各試驗組犬只血清淀粉酶含量變化情況 (U/L)

b：A對B差異顯著； c：A對C差異顯著； a：A對B差異極顯著，下表同

血清淀粉酶的含量是檢測急性胰腺炎的一個重要生化指標，當血清淀粉酶升高到參考值的3倍以上時，通常提示胰腺炎發生。從表2可以看出，(1)對照組與兩組烏司他丁治療組在術后的24 h到第3天的淀粉酶含量變化差異顯著(P<0.05)，表明所有模型組的胰腺炎病理模型構建成功；(2)從各模型組的淀粉酶變化可以看出，急性胰腺炎發生之后，其血清淀粉酶含量是一個先升高后下降的變化過程，在第1天就可以達到峰值，其數值變化升高8倍左右，在第3天到第4天之間緩慢下降，于第7天下降到接近正常值水平；(3)2個治療組和急性胰腺炎組之間的血清淀粉酶含量差異顯著(P<0.05)，說明治療組所用的烏司他丁對急性胰腺炎發展有抑制作用，但2個治療組所用藥物對急性胰腺炎發展的抑制作用差異不顯著(P>0.05)。

2.4 各組試驗犬脂肪酶變化情況 見表3。

表3 各試驗組犬只血清脂肪酶含量變化情況 (U/L)

血清脂肪酶的含量是檢測急性胰腺炎的又一個重要生化指標，脂肪酶一般只有升高到正常的3～5 倍以上，才提示為胰腺炎。從表3可以看出，(1)對照組與兩組烏司他丁治療組在術后的第1天到第3天的脂肪酶含量變化差異顯著(P<0.05)，表明所有模型組的胰腺炎病理模型構建成功；(2)從各模型組的脂肪酶變化可以看出，急性胰腺炎發生之后，其血清脂肪酶含量是一個先升高后下降的變化過程，在第1天就可以達到峰值，其數值變化升高10倍左右，在第2天到第4天之間緩慢下降，于第7天下降到接近正常值水平；(3)2個治療組和急性胰腺炎組之間的血清脂肪酶含量差異顯著(P<0.05)，說明各個治療組所用藥物對急性胰腺炎發展有抑制作用，但兩個治療組所用藥物對急性胰腺炎發展的抑制作用差異不顯著(P>0.05)。

2.5 B超影像學觀察 造模前，使用高頻探頭進行十二指腸段縱向定位掃查，可見正常胰腺右葉質地均勻，邊緣清晰的胰腺，胰腺呈細粒狀低回聲，回聲均勻。造模后2 d，對照組胰腺右葉包膜不可見，邊緣不規則增大，胰腺邊緣分界不清、水腫；7 d后，胰腺實質回聲不均勻，有低回聲甚至無回聲區，也有強回聲區并伴有后方聲影(如圖1)。B組術后2 d，胰腺體積增大，實質回聲不均勻；7 d后， 胰腺邊緣分界不清、水腫，實質回聲不均勻(如圖2)。C組2 d后，在十二指腸橫切面左側可探及腫大的胰腺，在十二指腸前曲處可探及右葉胰腺水腫，實質胰腺邊緣回聲偏高，實質內呈均勻低回聲；7 d后，回聲較均勻，血流信號較強。

3 討論

3.1 烏司他丁對急性胰腺炎犬臨床癥狀的影響 在臨床癥狀上，犬的連續嘔吐以及腹部疼痛對診斷胰腺炎有很大的幫助。在一篇針對犬的研究中指出，臨床癥狀的嚴重程度與存在的胰腺炎癥狀嚴重程度成正比[1]。造模前，3組犬體溫正常、活潑、無嘔吐腹瀉等癥狀。造模后，A組有3只試驗犬在術后前兩天體溫高于正常值。3組試驗犬術后精神沉郁，主要表現為拱背腹痛，不讓碰觸腹部，走路緩慢。隨著病情的發展，B、C兩組試驗犬在術后恢復比A組快。3組犬均出現嘔吐，A組犬嘔吐次數比B組及C組多。A組試驗犬在前3 d有4只犬出現腹瀉，且其中1只犬出現血樣腹瀉，B組有2只試驗犬造模后第1天出現一過性腹瀉，為黏稠狀黃色便，C組試驗犬造模后無腹瀉癥狀。這說明烏司他丁能有效改善犬化膿性急性胰腺炎(SAP)并發的腹痛、惡心、嘔吐、腹瀉等臨床癥狀。

圖1 A組7 d后B超影像觀察

圖2 B組7 d后B超影像觀察

3.2 烏司他丁對急性胰腺炎犬白細胞的影響 胰腺炎經常伴隨炎性白細胞浸潤。常多見嗜中性粒細胞增多，伴隨桿狀核細胞(核左移)和單核細胞增多，尤其在急性嚴重胰腺炎或者壞死性胰腺炎導致腹膜炎時更常見。核左移伴隨白細胞總數升高，表示骨髓造血機能加強，機體處于積極抵抗狀態[2]。但白細胞的過度釋放，會引起全身炎癥反應，再加上胰酶的釋放，會進一步加重胰腺炎。通過試驗可以看出，3組試驗犬在造模后白細胞都高于正常范圍，但與烏司他丁治療組相比，對照組白細胞數量顯著升高，表明烏司他丁能有效抑制白細胞過度的表達，減少各種細胞因子和炎性介質的過度釋放，阻斷血液中炎癥的級聯反應，避免炎癥反應的進一步擴大。

3.3 烏司他丁對急性胰腺炎犬血清淀粉酶、脂肪酶的影響 隨著急性胰腺炎的發展，胰腺腺泡細胞不斷損傷，胰酶進入間質組織并且吸收入淋巴和血液，引起血清淀粉酶和脂肪酶升高。淀粉酶主要來源于胰腺，幾乎所有的血清脂肪酶都來源于胰腺。除了胰腺炎外，還有很多原因都會引起血清淀粉酶的升高，比如腸炎、腸梗阻或腸穿孔。正常情況下，過量的脂肪酶經腎臟濾過。因此，在胰腺疾病的早期階段，脂肪酶仍處于正常水平。一般情況下，血清淀粉酶升高的同時脂肪酶水平也升高，一般要考慮到胰腺疾病。對于胰腺炎的檢測，脂肪酶比淀粉酶更敏感。淀粉酶和脂肪酶活性與胰腺炎的嚴重程度無直接關系，通常同時檢測血液淀粉酶和脂肪酶活性來評估胰腺功能。淀粉酶或脂肪酶一般只有升高到正常的3～5倍(或者更高)才被定義為胰腺炎[1]。

急性胰腺炎發病的特點是胰腺多種酶被激活，導致胰腺組織的自身消化和破壞。烏司他丁作為一種酶抑制劑，具有抑制多種蛋白酶、胰淀粉酶和脂水解酶等的活性，減輕自身消化降低內毒素的吸收，改善微循環及減輕組織的損傷的同時，還能穩定溶酶體膜，防止溶酶體內的水解酶外溢，并能抑制心肌抑制因子的產生，延緩SAP病程發展[3-4]，故烏司他丁具有抑制炎癥介質的釋放等功能，從多個環節抑制細胞的損傷，保護臟器，治療全身炎癥反應綜合征(SIRS)、多器官功能障礙綜合征(MODS)。烏司他丁治療急性胰腺炎的發病機制，除與抑制各種消化酶有關外，還可能具有糾正機體細胞代謝障礙和血液動力學紊亂的作用，從而達到阻止各種胰酶啟動的SIRS[5-6]。

本試驗中，3組試驗犬淀粉酶和脂肪酶都明顯升高。在模型構建完成第l天，各模型組與造模前相比，血漿淀粉酶達到術前5倍以上，血清脂肪酶含量也達到術前8倍左右，這提示胰腺炎造模成立。造模后，烏司他丁治療組淀粉酶升高的幅度明顯比對照組升高的小，說明治療組所用的烏司他丁對急性胰腺炎淀粉酶和脂肪酶的釋放有抑制作用。

3.4 烏司他丁對急性胰腺炎B超影像學的影響 在診斷犬急性胰腺炎時，腹部超聲是一種非常重要的診斷方法。通過B超圖像可以反映出發生胰腺炎時胰腺腫大，實質回聲不均，局部回聲增強，液體無回聲暗區等[7]，根據B超圖像推斷出胰腺是否發生水腫、壞死、出血等。相比較X線而言，利用B超診斷胰腺炎的準確性更強，達到68%[8]。

本次試驗中，通過B超探查發現，三組試驗犬在造模后第2天胰腺B超圖像均表現為胰腺體積增大，實質回聲不均勻，提示犬急性胰腺炎造模成功。而A組輸液7天后，胰腺影像圖像顯示實質有低回聲甚至無回聲區，也有強回聲區并伴有后方聲影，提示有局部壞死灶。這可能是由于胰腺壞死，胰腺組織纖維化出現的強回聲甚至伴有后方聲影；或是因為胰腺實質內出現膿腫而出現無回聲區域。這表明了A組正由急性胰腺炎逐漸向慢性胰腺炎轉變。7 d后，烏司他丁治療組的B超影像顯示，B組胰腺水腫，實質回聲不均勻；C組觀察到胰腺體積偏大，實質回聲比較均勻。這說明烏司他丁能有效減輕胰腺的壞死程度，緩解急性胰腺炎的癥狀，且高劑量比低劑量治療效果好。

烏司他丁作為SAP臨床用藥，來源于人體，安全性高，能有效改善犬重癥急性胰腺炎的腹痛、惡心、嘔吐、腹瀉等臨床癥狀，降低急性胰腺炎并發癥的發生率，2萬 IU/kg體重烏司他丁的治療效果比1萬 IU/kg體重烏司他丁的治療效果更好，在治療過程中未出現明顯毒副反應。

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2016-11-15

魯夢婷(1983-)，女，獸醫師，碩士，從事動物疫病檢疫工作,E-mail:10381152@qq.com

林德貴，E-mail:csma@sina.com

S858.292

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0529-6005(2017)05-0087-03