矯麗曼,紀純陽,楊成超
(遼寧省楊樹研究所,遼寧蓋州115213)
中荷64楊組織培養快繁技術研究
矯麗曼,紀純陽,楊成超
(遼寧省楊樹研究所,遼寧蓋州115213)
以中荷64楊葉柄為外植體,通過對比試驗確定中荷64楊組織快繁體系。結果表明:愈傷組織誘導與繼代培養基為MS+6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 0.5 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+瓊脂5 g·L-1;不定芽分化與繼代培養基為MS+6-BA 0.1 mg·L-1+NAA 0.02 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+瓊脂5 g·L-1;生根培養基為1/2MS+IBA 0.2 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+瓊脂5 g·L-1,將組培苗進行了移栽,成活率90%以上,為中荷64楊的推廣和應用提供了保障。
中荷64楊;外植體;快繁
中荷64楊Populus×canadensis‘N3016’又名荷蘭3016楊,是由荷蘭森林及城市研究所選育出來的雌株,其母本為美洲黑楊,父本是歐洲黑楊。1982年由中國林業科學研究院林業研究所引進我國[1]。樹干通直飽滿,樹形美觀,速生性、抗寒性較強,在內蒙古、新疆部分地區生長良好,在遼寧中南部廣泛栽培[2]。但其抗鹽堿能力稍差,從而限制了該品種的推廣應用。本文建立了中荷64楊組織培養快速繁殖體系,為該楊樹品種的廣泛推廣、分子及抗性的研究提供了前期試驗基礎,為獲得楊樹優良新品種提供保障。
1.1 試驗材料
中荷64楊枝條采自遼寧省楊樹研究所錦州市金城苗圃。
1.2 試驗方法
1.2.1 無菌材料的獲得[3-4]
剪取1年生中荷64楊健壯枝條,長100 cm左右,放入裝有水的壇子中,于室內進行水培,2~3 d換1次水,保持水的清潔。待芽開放展葉后,剪取1 cm幼嫩葉柄,用流水沖洗干凈后,在超凈工作臺內用70%酒精浸泡30 s進行表面滅菌,期間輕輕搖晃三角瓶,無菌水沖洗3次,每次3 min,再用0.1%升汞滅菌5 min,期間輕輕搖晃三角瓶,最后用無菌水沖洗5次,每次3 min,瀝干水分后獲得無菌外植體。……