電鏡在腎小球疾病病理診斷中的應(yīng)用價值研究

何映琴

電鏡在腎小球疾病病理診斷中的應(yīng)用價值研究

何映琴

目的探討電鏡在腎小球疾病病理診斷中的應(yīng)用價值。方法320例腎小球疾病患者均行B超引導(dǎo)下腎組織活檢, 分別應(yīng)用光鏡+免疫熒光法和電鏡檢查, 比較兩種檢查方法對腎小球疾病的診斷結(jié)果。結(jié)果最終病理診斷顯示IgA腎病所占比例最高, 為26.88%, 其次為腎小球微小病變, 占16.56%。電鏡對最終病例診斷結(jié)果起完全修正作用的有83例, 占25.94%, 起補充修正作用的有65例,占20.31%。光鏡+免疫熒光檢驗有172例對腎活檢最終病理診斷結(jié)果產(chǎn)生影響, 占53.75%；電鏡檢驗有148例對腎活檢最終病理診斷結(jié)果產(chǎn)生影響, 占46.25%, 兩種檢查方法比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論在腎小球疾病病理診斷中, 電鏡具有顯示電子致密物、超微結(jié)構(gòu)改變的作用, 可為病理診斷提供相關(guān)佐證, 進一步降低腎小球疾病誤診率, 值得推廣應(yīng)用。

腎小球疾病；腎活檢；電子顯微鏡；光學(xué)顯微鏡

在腎活檢病理診斷中, 電鏡、免疫熒光/免疫組化、光鏡是不可或缺的三大組成部分［1］。近年來, 隨著電鏡技術(shù)的發(fā)展與普及, 其在腎活檢病理診斷中的應(yīng)用優(yōu)勢也越來越明顯, 其能反映腎小球超微結(jié)構(gòu)改變, 對腎小球疾病的免疫熒光和光鏡病理診斷進行驗證和修正［2］。為進一步明確電鏡在腎小球疾病病理診斷中的應(yīng)用價值, 本文選取320例腎小球疾病患者腎組織活檢并行光鏡+免疫熒光、電鏡檢查, 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院腎內(nèi)科2012年1月~2015年1月住院的320例腎小球疾病患者作為研究對象, 本組患者均接受腎組織活檢, 其臨床檢查及實驗室檢查資料均完整。其中男146例, 女174例, 年齡14~75歲, 平均年齡(36.5±18.8)歲。臨床表現(xiàn)：腎病綜合征60例, 血尿10例, 腎炎綜合征210例,腎功能衰竭40例。

1.2 方法 所有患者均在B超引導(dǎo)下行腎穿刺活檢術(shù), 取腎活檢標本, 并將其分為3份, 分別用于免疫熒光、光鏡、電鏡檢查。①第一份腎活檢標本進行石蠟包埋, 切片(厚度2 μm), 常規(guī)進行馬森(Masson)、嗜銀(PASM)、糖原(PAS)、蘇木精-尹紅(HE)染色, 然后進行光鏡檢查；②第二份腎活檢標本冰凍后切片, 用以免疫熒光檢測。采用直接法檢測纖維蛋白原相關(guān)抗原(FRA)、C1q、C3、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG), 采用間接法進行乙肝病毒抗原檢測, 檢測項目包括乙型肝炎 e 抗原( HBeAg )、乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)；③第三份腎活檢標本進行電鏡檢查。分別使用戊二醛(2.5%)、鋨酸(1%)對活檢標本進行前固定、后固定, 再使用丙酮脫水,使用Epon812環(huán)氧樹脂對腎組織進行常規(guī)包埋處理, 使用甲苯胺藍染色定位后切片, 鈾、鉛雙重電子染色后, 在H-600型電子顯微鏡下觀察腎小球的基本情況。部分疑難病例,還需進行Ⅳ型膠原α3α5染色和κ λ輕鏈染色/剛果紅染色［3］。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 最終病理診斷 320例患者中, IgA腎病所占比例最高,為26.88%, 其次為腎小球微小病變, 占16.56%, 膜性腎病、狼瘡性腎炎所占比例也較高。見表1。

表1 320例患者的最終病理診斷結(jié)果(n, %)

2.2 電鏡的完全修正、補充修正結(jié)果 電鏡對最終病例診斷結(jié)果起完全修正作用的有83例, 占25.94%, 完全修正的疾病類型包括腎小球微小病變、膜性腎病、糖尿病性腎病、腎淀粉樣變；起補充修正作用的有65例, 占20.31%, 補充修正的疾病類型包括IgA腎病、膜性腎病、狼瘡性腎病、糖尿病性腎病、局灶節(jié)段腎小球硬化、乙型肝炎病毒性腎病、膜增生性腎小球腎炎。

2.3 光鏡+免疫熒光檢驗與電鏡的病理診斷影響程度 光鏡+免疫熒光檢驗有172例對腎活檢最終病理診斷結(jié)果產(chǎn)生影響, 占53.75%；電鏡檢驗有148例對腎活檢最終病理診斷結(jié)果產(chǎn)生影響, 占46.25%, 兩種檢查方法比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

研究結(jié)果顯示, 所有腎臟疾病中腎小球疾病所占比例最高, 提示電鏡檢查對腎小球疾病診斷的敏感性較高, 這可能與電鏡能顯示腎小球基底膜超微結(jié)構(gòu)、電子致密物分布情況,從而能更好地進行腎小球病理診斷有關(guān)［3-7］。本次研究顯示,在最終病理診斷結(jié)果中, 25.94%是由電鏡檢查起決定性作用, 疾病類型包括腎小球微小病變、膜性腎病、糖尿病性腎病、腎淀粉樣變。這一結(jié)果與國內(nèi)相關(guān)文獻報道相符［4］。這也提示光鏡診斷為腎小球輕微病變和免疫熒光結(jié)果呈陰性的病例, 還應(yīng)做電鏡檢查, 以免發(fā)生漏診［8,9］。最終病理診斷結(jié)果中電鏡檢查起修正診斷作用的占20.31%, 疾病類型以免疫復(fù)合物性腎炎居多, 這可能與電鏡能夠精確定位電子致密物沉積部位, 顯示沉積物特點、結(jié)構(gòu)等有關(guān)［10-12］。

雖然電鏡檢查的應(yīng)用優(yōu)勢顯著, 但其觀察范圍較為局限,對彌漫性腎炎、局灶節(jié)段性腎小球病變的診斷較為有限［5］,其對最終病理診斷結(jié)果無影響, 免疫熒光+光鏡檢查即可獨立診。由于電鏡具有顯示電子致密物、超微結(jié)構(gòu)改變的作用,故可為病理診斷提供相關(guān)佐證, 用以驗證免疫熒光+光鏡診斷結(jié)果。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.10.032

2017-03-21］

528403 中山市人民醫(yī)院腎內(nèi)科