腫瘤患者細胞免疫特征分析

腫瘤患者細胞免疫特征分析

遲艷新

目的分析腫瘤患者細胞免疫的特征。方法用流式細胞儀檢測腫瘤患者的細胞免疫狀態(tài)，并與正常體檢者比較。結(jié)果兩組腫瘤患者組與對照組比較，CD3+CD4+、CD4+CD45RA細胞以及CD4+/CD8+比值降低，CD3+CD8+、CD4+CD45RO以及CD8+CD28-細胞升高（P＜0．05）。結(jié)論腫瘤患者T淋巴細胞的變化情況的檢測，有助于臨床醫(yī)生了解患者腫瘤發(fā)展程度和手術(shù)療效。

腫瘤患者；細胞免疫；T淋巴細胞

腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與機體的免疫系統(tǒng)具有密不可分的關(guān)系，免疫系統(tǒng)的紊亂、免疫功能的低下可能是導(dǎo)致腫瘤產(chǎn)生的因素。人體發(fā)揮免疫功能的淋巴細胞，主要包括T細胞、B細胞以及NK細胞等免疫細胞，通過釋放免疫因子發(fā)揮免疫效應(yīng)。本文通過分析腫瘤患者與正常對照人群的細胞免疫狀態(tài)的差異，旨在為腫瘤患者的診斷和治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象與分組

選擇2013年5月—2016年5月本院收治的腫瘤患者80例，其中包括直腸癌患者40例，男22例，女18例，年齡38～76歲，平均（62.7±10.9）歲。乳腺癌患者40例，均為女性患者，年齡39～83歲，平均（65.8±12.6）歲。同時選擇同期健康門診患者40例作為對照組，男19例，女21例。采集靜脈血，采集量至少1 ml，樣本的采集應(yīng)在6小時內(nèi)處理，冷凍的標(biāo)本不能用。溶血樣本不能用。

1.2 實驗方法

首先，取采集的血液作為檢驗樣品，應(yīng)用流式細胞儀進行檢測。打開流式細胞儀，預(yù)熱系統(tǒng)，給待檢測樣品管中加入去離子水，隨后使用去離子水沖洗流式細胞儀液流的噴嘴系統(tǒng)；用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品對儀器進行調(diào)整，調(diào)定激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益等，調(diào)節(jié)熒光強度至最強，變異系數(shù)最小。把樣品信息登記至實驗記錄本。

隨后，向試管中分別加入5 μl 抗人CD4抗體、抗人CD8抗體、抗人CD3抗體，并加入抗凝血40 μl ，振蕩混勻后避光靜置保存20 min，用震蕩器邊震蕩邊加入緩沖液600 μl，7秒后，加入上樣液260 μl待測。抗人CD4抗體、抗人CD45RO抗體需在此基礎(chǔ)上混勻，1 000 rpm條件下離心5 min，倒上清液體，留殘液，加適量PBS待測。

選擇預(yù)先存儲的檢測軟件，同時將樣品和陰性對照放入檢測臺，自動檢測樣品管并進行數(shù)據(jù)采集，得出檢測結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 10.0軟件統(tǒng)計分析，計量資料用（）表示，使用t檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 T細胞亞群、NK細胞比較

腫瘤患者組與對照組比較，T細胞亞群中，患者組CD3+CD4+細胞降低（P＜0.01），CD3+CD8+細胞升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）（見表1）。

2.2 CD4+、CD4+CD45RO及CD4+CD45RA比較

腫瘤組患者與對照組比較，CD4+CD45RO升高，CD4+CD45RA降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。三組CD4+比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）（見表2）。

2.3 CD4+/CD8+、CD8+CD28+、CD8+CD28-比較

腫瘤組患者T細胞亞群中CD4+/CD8+比值降低（P＜0.05）；CD8+CD28-升高（P＜0.05）（見表3）。

3 討論

CD3+CD4+T細胞是輔助性的細胞，主要起輔助作用。腫瘤患者一般CD3+CD4+T細胞明顯減少，CD3+CD8+T細胞明顯升高，正常對照組則無此現(xiàn)象。

CD3+CD4+T細胞亞群有輔助和誘導(dǎo)其它細胞的功能。CD3+CD4+T細胞亞群的減少必導(dǎo)致免疫應(yīng)答減弱，CD3+CD4+T細胞亞群增多可引起免疫應(yīng)答增強，在CD3+CD4+T細胞亞群的控制和引導(dǎo)下，機體免疫系統(tǒng)得以正常運行，CD3+CD4+細胞被稱為人體免疫系統(tǒng)的大腦和中樞[1-3]。對CD3+CD4+的監(jiān)測也是監(jiān)測T淋巴細胞亞群的關(guān)鍵。

CD4+T按功能不同可分為CD4+CD45RO+T、CD4+CD45RA+T兩類。CD4+CD45RO+T屬于典型的記憶性的細胞，能接受抗原的刺激，粘附能力較強，并能再次分化。CD4+CD45RA+T不能接受抗原刺激，粘附能力也較低下，不能再次分化。有研究表明，腫瘤患者CD4+T細胞比例不變，腫瘤患者的CD4+CD45RO+T細胞在術(shù)后有所下降，CD4+CD45RA+T在術(shù)后有所上升[4]。CD4+CD45RO+T細胞和CD4+CD45RA+T細胞在腫瘤免疫中作用很大。單獨看CD45RO T細胞亞群及CD45RA T細胞亞群作用不大。但綜合各因素影響，綜合考慮CD4+CD45RO+T細胞和在CD4+CD45RA+T的作用在腫瘤免疫中至關(guān)重要。CD4+CD45RA T細胞亞群和CD4+CD45RO T細胞亞群加在一起為CD4+T細胞亞群。一旦CD4+CD45RA T細胞亞群增加，CD4+CD45RO T細胞亞群則應(yīng)相應(yīng)的減少。一旦CD4+CD45RO T細胞亞群增加，CD4+CD45RA T細胞亞群則應(yīng)相應(yīng)的減少，以維持CD4+T細胞亞群的相對穩(wěn)定。一旦這種平衡被打破，說明機體免疫狀況被破壞，所以應(yīng)及時監(jiān)測CD4+CD45RO T細胞亞群，CD4+CD45RA T細胞亞群。

T細胞活化有兩個不同的信號介導(dǎo)。CD3+CD8+細胞由CD28可以區(qū)分成T抑制細胞亞群CD8+CD28-和細胞毒T細胞亞群CD8+CD28+[5]。CD8+CD28-T細胞亞群具有免疫調(diào)節(jié)作用，還能殺傷效應(yīng)細胞。本實驗?zāi)[瘤患者CD8+CD28-細胞亞群高于對照組。腫瘤患者一般CD8+CD28-細胞亞群升高明顯，導(dǎo)致總T淋巴細胞升高，引起CD4+/CD8+比例降低[6-7]。CD8+CD28-T細胞亞群對抗體的產(chǎn)生有抑制作用。

CD3+T細胞亞群、CD4+T細胞亞群、CD8+T細胞亞群在腫瘤免疫中相互影響，只有在CD3+CD4+T細胞亞群、CD3+CD8+T細胞亞群正常時，抗腫瘤作用才有效[4]。晚期惡性腫瘤患者普遍免疫功能低下，CD3+T細胞亞群、CD4+T細胞亞群降低，CD8+升高T細胞亞群、CD4+/CD8+比值降低或倒置來衡量機體免疫狀態(tài)，CD4+CD45RO T細胞亞群升高、CD4+CD45RA T細胞亞群下降，表明機體免疫功能嚴重受損[8]。

表1 T細胞亞群、NK細胞比較

表2 CD4+、CD4+CD45RO及CD4+CD45RA比較

表3 CD4+/CD8+、CD8+CD28+、CD8+CD28-比較

綜上所述，本研究顯示通過對腫瘤患者T細胞亞群進行分析，可以對腫瘤有更全面的分析，對判斷預(yù)后有一定好處。

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Analysis of Cellular Immune Characteristics in Cancer Patients

CHI Yanxin Clinical Laboratory Department, People's Hospital of Jilin, Jilin Jilin 132001, China

ObjectiveTo analyze the cellular immune characteristics in cancer patients.MethodsThe cellular immune status of the tumor patients were analyzed by flow cytometry, and the results were compared with the normal subjects.ResultsThe CD3+CD4+, CD4+CD45RA cells and the ratio of CD4+/ CD8+in the tumor groups were significantly lower than that in the control group, and CD3+CD8+, CD4+CD45RO and CD8+CD28-cells were significantly increased (P＜ 0.05).ConclusionThe detection of T lymphocyte changes in cancer patients help clinicians to understand the degree of tumor development and surgical efficacy.

cancer patients; cellular immunity; T lymphocytes

R730．51

A

1674-9316（2017）11-0110-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．11．066

吉林市人民醫(yī)院檢驗科，吉林 吉林 132001