阿司匹林預處理對多囊卵巢綜合征行IVF—ET的療效及其機制研究

熊永嶗　楊桂艷　楊嫦玉　吳重聰　周雯雯

【摘要】 目的：探討阿司匹林預處理對多囊卵巢綜合征行試管嬰兒（invitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）的療效及其機制。方法：選取2015年1月-2016年6月在珠海市婦幼保健院生殖中心因多囊卵巢綜合征行試管嬰兒治療的患者119例，采用隨機數字表法將患者分為研究組（62例）和對照組（57例）。研究組在IVF-ET治療前給予阿司匹林預處理，對照組給予安慰劑治療。觀察比較兩組患者的促性腺激素（Gn）使用時間、Gn使用劑量、獲卵數、2PN受精率、優質胚胎數、啟動日T淋巴細胞、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）及IVF-ET結局。結果：研究組患者的Gn使用時間短于對照組，Gn使用劑量低于對照組，獲卵數和優質胚胎數均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。研究組患者的啟動日T淋巴細胞、TNF-α和IL-6水平均低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。研究組患者的臨床妊娠率和胚胎種植率均高于對照組，流產率低于對照組，但差異均無統計學意義（P>0.05）。結論：阿司匹林預處理對多囊卵巢綜合征行IVF-ET有積極的臨床意義。

【關鍵詞】 阿司匹林； 多囊卵巢綜合征； IVF-ET； T淋巴細胞； 腫瘤壞死因子-α； 白介素-6

Study on the Effect and Mechanism of Aspirin Pretreatment on IVF-ET in Patients with Polycystic Ovary Syndrome/XIONG Yong-lao，YANG Gui-yan，YANG Chang-yu，et al.//Medical Innovation of China，2017，14（15）：016-019

【Abstract】 Objective：To investigate the effect and mechanism of Aspirin pretreatment on invitro fertilization-embryo transfer （IVF-ET） in polycystic ovary syndrome（PCOS）.Method：From January 2015 to June 2016，in the reproductive center of Maternal and Child Health Care Hospital of Zhuhai，119 patients with polycystic ovary syndrome were treated with IVF-ET and selected，they were divided into research group （62 cases）and control group（57 cases） according to the random number table method.The research group was given Aspirin before IVF-ET treatment，the control group was given placebo.The Gonadotropin（Gn） using time，Gn using dosage，amount of acquired oocytes，high-quality embryos，level of the serum T lymphocytes，TNF-α and IL-6 at the initiation day and clinical results of the two groups were observed and compared.Result：The Gn using time of the research group was shorter than that of the control group，and the dosage of Gn was lower than that of the control group， the amount of the acquired oocytes and high-quality embryos of the research group were all more than those of the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.The levels of T lymphocytes，TNF-α and IL-6 at the initiation day of the research group were lower than those of the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.The pregnancy rate and implantation rate of research group were higher than those in control group，the abortion rate was lower than that in control group，but the differences were not statistically significant（P>0.05）.Conclusion：Aspirin pretreatment has positive clinical significance in the treatment of polycystic ovary syndrome with IVF-ET.

【Key words】 Aspirin； Polycystic ovary syndrome； Invitro fertilization-embryo transfer； T lymphocytes； TNF-α； IL-6

First-authors address：Maternal and Children Health Care Hospital of Zhuhai，Zhuhai 519000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.15.005

多囊卵巢綜合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）是青春期和育齡期婦女的一種常見病，發病率為5%～10%，無排卵婦女中占75%，多毛婦女可高達85%以上。臨床表現為月經稀發、閉經、肥胖、不孕、痤瘡，生化檢查表現為高黃體生成素（luteinizing hormone，LH）、高雄激素和胰島素抵抗。多囊卵巢綜合征發病機制不明，由于卵泡發育異常，長期無排卵，自然妊娠困難需行試管嬰兒（invitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）治療。在IVF-ET治療過程中，多囊卵巢綜合征促排卵過程中常存在卵泡募集障礙和成熟障礙，卵泡易閉鎖，卵子質量低，流產率高，是臨床治療過程中的一個疑難問題。

多囊卵巢綜合征病因及發病機制不明，筆者前期的研究表明多囊卵巢綜合征患者體內存在慢性炎癥反應，多囊卵巢綜合征婦女外周血中炎癥細胞和炎癥因子明顯升高[1]。多囊卵巢綜合征是由于高胰島素和高LH導致體內雄激素過高，導致體內和卵泡內炎癥因子濃度升高[2]，阻礙卵泡發育，降低卵子質量[3]。目前對多囊卵巢慢性炎癥治療的報道較少[4]，且效果不明顯，存在爭議，阿司匹林的抗感染作用可能降低體多囊卵巢綜合征患者體內血液和卵泡液中炎癥反應，改善多囊卵巢綜合征體內激素的平衡，本文主要研究其預處理對多囊卵巢綜合征行IVF-ET臨床結局的影響，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月-2016年6月在珠海市婦幼保健院生殖中心因多囊卵巢綜合征行試管嬰兒治療的患者119例，所有患者年齡20～40歲，診斷參照鹿特丹標準：（1）月經紊亂，臨床表現為閉經、月經稀發、月經頻發；（2）高雄激素的臨床表現和高雄激素血癥，臨床表現有痤瘡、多毛，血清總睪酮、游離睪酮均高于正常值；（3）卵巢多囊性改變，B超檢查見一側或雙側卵巢直徑2～9 mm的卵泡≥12個。符合上述3項中任何2項者，即可診斷為多囊卵巢綜合征。此外還需排除胃十二指腸潰瘍、凝血功能障礙及盆腔炎性疾病或者輸卵管炎性疾病的患者。采用隨機數字表法將所有患者分為研究組和對照組，其中研究組62例，平均年齡（31.30±3.33）歲；對照組57例，平均年齡（30.86±3.29）歲。兩組患者的一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經過本院倫理委員會批準，所有患者均知情同意。

1.2 干預方法 試管嬰兒（invitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）治療采用常規長方案促排卵治療，在多囊卵巢綜合征患者知情同意的情況下，研究組在降調節前15 d開始給予阿司匹林口服，200 mg/次，2次/d，預防性使用洛賽克（質子泵拮抗劑）20 mg，降調節15 d后促排卵啟動日即停用阿司匹林，前后服用阿司匹林30 d。對照組給予安慰劑。取卵后第3天移植胚胎，移植后第14天化驗血hCG，若hCG陽性則移植后30 d B超檢查妊娠情況。

1.3 評估與記錄 收集研究組和對照組患者的促性腺激素（Gn）使用時間、Gn使用總量、內膜厚度以及啟動日血液中T淋巴細胞、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）水平和IVF-ET獲卵數、受精率、優質胚胎數、臨床妊娠率、種植率、流產率。

1.4 檢測方法 T淋巴細胞采用CD3（Dako 公司）標記后流式細胞儀檢測，TNF-α、IL-6采用ELISA試劑盒（美國BioSource）檢測。

1.5 統計學處理 采用SPSS 11.0軟件進行統計學分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗；計數資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者的促排卵情況比較 研究組的Gn使用時間短于對照組，Gn使用劑量低于對照組，獲卵數和優質胚胎數均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）；兩組患者的內膜厚度、2PN受精率、周期取消率比較，差異均無統計學意義（P>0.05），見表1。

2.2 兩組患者的啟動日T淋巴細胞、TNF-α和IL-6比較 研究組患者的啟動日T淋巴細胞、TNF-α和IL-6水平均低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）

2.3 兩組患者的IVF-ET結局比較 兩組患者的IVF-ET獲卵數、平均移植胚胎數比較，差異均無統計學意義（P>0.05）；研究組患者的臨床妊娠率和胚胎種植率均高于對照組，流產率低于對照組，但差異均無統計學意義（P>0.05）

3 討論

本研究中阿司匹林預處理可明顯降低血液中T淋巴細胞的數目、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）及白介素-6（IL-6）的濃度。多囊卵巢綜合征卵泡發育存在募集和成熟障礙，卵泡易閉鎖，卵子質量低，影響試管嬰兒（invitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）的成功率。在多囊卵巢綜合征卵泡的發育過程中，多種細胞和細胞因子通過旁分泌調節卵泡的發育[5-6]。T淋巴細胞是一種主要的慢性炎癥細胞，可以分泌產生淋巴因子，包括TNF-α和IL-6。顆粒細胞包繞卵子，自分泌和旁分泌大量細胞因子作用于卵子，其中TNF-α和IL-6是卵泡生長的主要抑制因子。在卵泡生長過程中，TNF-α和IL-6抑制顆粒細胞的分化，抑制雌二醇和孕激素的分泌[7-8]，促進顆粒細胞的調亡[9]，導致卵泡閉鎖。進一步研究發現TNF-α刺激雄激素合成[10]，促進胰島素抵抗[11]，最終造成卵細胞質量的下降，降低IVF-ET的妊娠率，增加流產率。已有研究報道卵泡液中TNF-α與多囊卵巢綜合征IVF-ET妊娠率呈負相關[12]。為了提高多囊卵巢綜合征行IVF-ET的妊娠率，臨床上有必要采用阿司匹林預處理的干預手段，降低T淋巴細胞的數目和顆粒細胞TNF-α、IL-6的表達。

本研究結果顯示，研究組的Gn使用時間短于對照組，Gn使用劑量低于對照組，獲卵數和優質胚胎數均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。因此阿司匹林預處理有利于多囊卵巢綜合征促排卵過程中卵泡的發育，可減少患者促排卵藥物的使用時間，減少促排卵藥物的使用，從而減少患者的痛苦和經濟負擔，同時增加獲卵數和可移植胚胎數。

本研究結果顯示，研究組患者的臨床妊娠率和胚胎種植率均高于對照組，流產率低于對照組，但差異均無統計學意義（P>0.05），可能與病例數過少有關，再者研究組可移植胚胎數增多，累計妊娠率理論上應該高于對照組。阿司匹林通過降低血液中T淋巴細胞數目[13]，從而降低細胞內TNF-α、IL-6的表達[14-16]。在IVF-ET的治療中，阿司匹林預處理對正常婦女的妊娠率無明顯影響[17]，但對于患有自身免疫性疾病的患者行IVF-ET治療，阿司匹林可明顯提高妊娠率，降低流產率[18-20]。自身免疫性疾病的患者本身存在慢性炎癥，體內淋巴細胞和炎癥因子如TNF-α、IL-6明顯升高，因此阿司匹林預處理通過降低體內淋巴細胞、TNF-α、IL-6，降低血液和卵泡液中的炎癥反應，抑制顆粒細胞的凋亡，促進卵泡發育，提高卵子質量，從而提高自身免疫性疾病的患者IVF-ET的妊娠率。多囊卵巢綜合征患者存在慢性炎癥，因此臨床上可以使用阿司匹林預處理改善多囊卵巢綜合征行IVF-ET治療妊娠結局。

綜上所述，多囊卵巢綜合征存在慢性炎癥，這些炎癥細胞和炎癥因子阻礙卵泡發育，降低卵子質量，繼而降低IVF-ET的妊娠率，增加流產率。阿司匹林預處理通過降低多囊卵巢綜合征患者體內的炎癥反應，可減少多囊卵巢綜合征患者行IVF-ET促排卵的時間，減少促排卵使用的總藥物量，增加獲卵數、可移植胚胎數，從而有利于患者的最終妊娠結局，值得在臨床中推廣應用。

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（收稿日期：2017-04-17） （本文編輯：張爽）