紅椎苗木繁殖技術研究

黃燕麗

摘要：為滿足我省各市縣新一輪綠化廣東大行動的任務需求，紅椎作為珍貴闊葉用材，擁有高效、多用途、速生等特性是南方地區造林的重要鄉土樹種之一。由于紅椎的繁殖方法較難滿足造林之需求，紅椎大量繁殖主要通過組織培養技術。本文對紅椎組織培養與快速繁殖技術進行了研究。

關鍵詞：紅椎；苗木；繁殖技術

引言

紅椎，別名赤黎、黎木、紅椽拷，學名：Castanopsis hystrixA·DC，殼斗科，常綠喬木亞熱帶樹種，其材質優良，木材堅硬耐腐，少變形，心材大，褐紅色，邊材淡紅色，色澤和紋理美觀，是高級家具、造船、車輛、工藝雕刻、建筑裝修等優質用材。它具有生長快、萌芽力強、混生性能好等優良特性，是與松、杉等針葉樹種混交造林的最理想的伴生樹種之一。目前紅椎的繁殖方式無法滿足造林之需求。因此，對其進行組織培養與快速繁殖技術研究，對紅椎的合理開發利用具有重要的作用。

1材料與方法

1.1材料

紅椎萌芽條

1.2方法

1.2.1外植體消毒

剪取紅椎萌芽條帶腋芽莖段作為外植體，去葉，剪切成1-2cm長帶1-2個腋芽或莖節小段。用75%乙醇浸泡20s，蒸餾水清洗后置于超凈臺上，在無菌操作下用0.1%升汞消毒8min，再用20%次氯酸鈉消毒5min，消毒處理后用無菌水漂洗5-6次。

1.2.2始芽的誘導

細胞分裂素對始芽的誘導起著十分重要的作用，要使嫩芽獲得較高的誘導率，適宜的細胞分裂素濃度甚為關鍵。離體培養常用的生長素為NAA，細胞分裂素為6-BA，以生長素NAA0.25mg/L為基礎，在含0.1～0.5mg/L不同濃度的細胞分裂素6-BA的BMT培養基上，另加CH500mg/L，VB21mg/L，pH為5.8。每試驗處理接種20段，光照培養，定期進行誘導率的統計。

1.2.3芽增殖和生長

將初代培養所得的芽接種在增殖培養基上進行繼代培養，調節6-BA、KT、NAA的濃度，共設計9個試驗處理，每處理接種芽20顆，不定期觀察芽的分化、增殖和生長狀況，并統計芽的增殖系數。

1.2.4生根培養

當紅椎芽繼代培養擴大繁殖到一定數量并生長到3-4cm高時，選取生長健壯的單芽切割進行生根培養試驗。試驗采用L9（34）～交試驗設計，試驗設計考慮的因素為生長素IBA和NAA以及基本培養基BMT，因素水平安排見表1。

生根率（%）=生根株數/接入的無根苗數×100%

2結果與分析

2.1始芽的誘導試驗

細胞分裂素6-BA對始芽誘導分化的影響效果見表1。

表2顯示，當6-BA的濃度為0.1mg/L時，始芽的誘導率很低，僅為25%，又多為生長纖細的單芽，而且部分頂芽變黃。在一定范圍內，隨著細胞分裂素6-BA濃度增加，外植體始芽的誘導率也呈相應提高趨勢，當細胞分裂素6-BA為較高濃度0.4mg/L時，初始芽的誘導率出現下降的趨勢，而當濃度提高到0.5mg/L時，始芽呈短粗密集，接種操作時極難切割剝離，且芽呈透明水腫玻璃化，不利于繼代擴繁培養。因此，以細胞分裂素6-BA濃度為0.3mg/L時，有利于外植體初始始芽的誘導，不僅有85%較高的誘導率，而且每叢芽有2-3個單芽，芽生長健壯。

2.2外源激素組合對芽增殖培養的影響

在植物組織培養過程中，始芽的分化不僅要有較高的增殖系數，同時始芽還必須是生長健壯，才能達到組培快繁的要求。以細胞分裂素6-BA、KT和生長素NAA為外源激素，將紅椎芽轉接在9種不同濃度梯度組合進行繼代培養，觀察統計平均在一個培養繼代周期內始芽的分化增殖系數和及其生長情況，結果見表2。

激素不同種類，不同濃度對芽的增殖和生長有不用的效果，經試驗表明，6-BA濃度對芽增殖培養影響最大，NAA濃度次之，KT濃度影響最小。增殖率的變化規律是：從細胞分裂素6-BA來看，當細胞分裂素6-BA的濃度為較低0.2mg/L時，芽在繼代培養30d時，平均增殖率為2.41%，芽長勢較弱，表現出葉尖卷曲，部分頂芽變黃，而當濃度增加到0.3mg/L時，芽的增殖系數也相應提高，達到最高的3.58，而且芽生長健壯，葉色綠，但當濃度增加較高為0.4mg/L時，芽的增殖率有所下降，芽的生長質量也呈下降趨勢，表現出葉卷曲，芽粗短呈玻璃化；從生長素NAA來看，在3種與細胞分裂素6-BA不同組合中，濃度為0.5mg/L時，平均增殖率最高，濃度過高或過低都不利于增殖率的提高；從細胞分裂素KT來看，在培養基中加入KT后，芽的增殖率反而出現下降，說明KT的加入不利于紅椎芽增殖培養。因此，紅椎在繼代培養時適宜芽增殖和生長的最佳外源激素組合為BMT+6-BA0.3mg/L+NAA0.5mg/L。

2.3單芽生根誘導培養

在植物離體培養過程中，單芽生根率的高低是影響無性快繁速度的主要因子之一，生長素類物質的合理應用對生根起著至關重要的促進作用。將生長健壯、葉片舒展的芽叢分割并切成單芽呈直插式接種，以BMT基本培養基、IAA和IBA二種不同生長素共9個處理，進行正交生根誘導試驗。

2.4植株的移栽

將組培生根瓶苗搬出培養室移至大棚于自然環境下練苗5-7d，移栽前對移栽基質進行消毒處理，提前一天用0.2%～0.3%高錳酸鉀溶液消毒基質，移栽當天用自來水澆透基質，除去基質中殘留的高錳酸鉀，用清水漂洗干凈根部粘附的培養基。移栽試驗結果表明：紅心土的移栽效果最好。移栽后要淋水保濕，保持移栽苗水分的平衡，防止移栽苗萎蔫而死。用遮光度為75%的黑網擋陽以避免太陽直射，注意苗床的通風透氣，移栽后可適當噴施一定濃度的葉面肥，使用這種方法移栽成活率在90%以上。

3小結與討論

3.1培養基的選擇

選擇適宜的培養基對組織培養成功與否至關重要。紅椎適宜的基本培養基為BMT。分析認為，BMT培養基內含有較高的Ca2+離子，Ca2+濃度能促進植物體內糖分的運輸，說明高濃度的鈣元素更加有利于紅椎芽的器官分化和生長。這一點與王以紅等對殼斗科植物大葉櫟組織培養選用的培養基的研究結果相一致。

3.2芽增殖和生長

以BMT為基本培養基，添加細胞分裂素6-BA0.3mg/L和生長素NAA0.5mg/L，可作為紅椎芽擴繁培養的最佳培養基。將紅椎的芽以水平向接種于培養基上，培養前期在較弱的光照下，光照強度控制在10001x左右，后期移置于3000N較強的光照強度下生長，繼代培養周期保持在30d左右，進行芽的分化、增殖和生長等擴繁培養，繼代芽可以3.58/30d的增殖系數達到擴大繁殖目的。在紅椎芽增殖和生長的過程中，隨著繼代次數的增加，培養材料會出現褐化現象，在轉接的時候將芽基部老化材料剪切后再接到新鮮的培養基上，能在一定程度上克服褐化現象的發現，但是褐化問題的根源有待進一步研究。

3.3單芽生根培養

可以1/2BMT+IBAl.5mg/L+IAA0.3mg/L作為紅椎單芽生根培養的最佳培養基，在繼代芽中選擇生長健壯的單芽切割后接種，進行根系誘導培養。培養6d時單芽基部開始長出根點，培養15d時根系生長至1～1.5cm長，形成完整的再生植株，生根率達到82%。本研究發現，單芽生根誘導與繼代芽的質量有很強的相關性，生長健壯、葉片舒展、葉色濃綠的繼代芽則生根率高，且根系發達，因此在進行單芽生根誘導前，必須使繼代芽得到充分的光照，以增強光合作用促進始芽的健壯生長。

4結語

研究結果表明，用來自于紅椎優株的萌芽條的莖段作為外植體比較容易誘導成苗，試驗中，最適誘導培養基為BMT+6-BA0.3mg/L+NAA0.25mg/L，誘導率達到了85%；最適增殖培養基為BMT+6-BA0.3mg/L+NAA0.5mg/L，芽增殖系數3.58，且生長健壯；單芽在1/2BMT+IBAl.5mg/L+IAA0.3mg/L培養基上生根效果好，生根率82%；煉苗成功后移栽成活率達90%以上。此研究所建立的紅椎組織培養再生繁殖體系，為紅椎優良苗木的培育提供了一定的科學依據。