中樞神經系統感染腦脊液細胞形態學檢測的價值

王瑞鋒

平煤神馬醫療集團總醫院檢驗科 平頂山 467000

中樞神經系統感染腦脊液細胞形態學檢測的價值

王瑞鋒

平煤神馬醫療集團總醫院檢驗科 平頂山 467000

目的 探討腦脊液細胞形態學檢測在中樞神經系統感染性疾病中的價值。方法 對2013-08—2016-08我院收治的280例符合中樞神經系統感染疾病診斷標準的送檢標本進行回顧性分析。實施腦脊液細胞學檢查，測量不同疾病腦脊液各類有核細胞的細胞直徑、面積等，并對細胞大小特征變化等進行分析。結果 本組280份標本中，根據形態特征分類，63份為化膿性腦膜炎，主要表現為均勻一致的中性粒細胞反應；186份為病毒性腦膜炎，主要表現為淋巴細胞反應，也可見中性粒細胞；31份為結核性腦膜炎，主要表現為淋巴樣細胞、單核吞噬細胞，偶爾有中性粒細胞。3組腦病白細胞數、未激活單核細胞、未激活淋巴細胞、激活單核細胞、激活淋巴細胞、漿細胞、嗜中性粒細胞差異有統計學意義(均P<0.05)，但3組腦病嗜酸性粒細胞差異無統計學意義(P>0.05)；結核性腦膜炎組中性粒細胞面積大于病毒性腦膜炎組、化膿性腦膜炎組(P<0.05)，且病毒性腦膜炎組大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)；結核性腦膜炎組淋巴細胞面積大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)；化膿性腦膜炎組、結核性腦膜炎組淋巴細胞直徑大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)，且結核性腦膜炎組大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)；在單核細胞面積與直徑方面，結核性腦膜炎組、病毒性腦膜炎組均大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)。結論 腦脊液細胞形態學特征改變可作為診斷中樞神經系統感染性疾病的重要指標。

中樞神經系統感染；腦脊液細胞形態學；細胞測量

作為臨床上一種常見的綜合征，中樞神經系統感染患病率較高，會給患者大腦及脊髓造成不良影響[1]，主要包括化膿性腦膜炎、結核性腦膜炎、病毒性腦膜炎、隱球菌性腦膜炎[2]。因不同疾病類型的臨床表現及體征相似，影像學檢查特異性較低，增加了臨床診斷難度。臨床上改善中樞神經系統感染患者治療效果的關鍵是采取積極措施進行早期診斷、早期治療。所以，臨床采取積極措施，尋找有效的檢查方法，提升中樞神經系統感染性疾病的早期診斷效果，從而盡早實施對癥治療至關重要。腦脊液細胞學檢查操作簡單，能提高腦脊液細胞學分類的準確性，在早期診斷中樞神經系統感染性疾病中效果顯著[3]。本研究以280例符合中樞神經系統感染疾病診斷標準的臨床送檢標本為研究對象，探討腦脊液細胞學檢查的價值，現報道如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 對2013-08—2016-08我院收治的280例符合中樞神經系統感染疾病診斷標準[4]的臨床送檢標本進行回顧性分析，包括63份化膿性腦膜炎，186份病毒性腦膜炎，31份結核性腦膜炎。

1．2 方法

1．2．1 儀器與試劑：所用儀器及試劑包括奧林巴斯公司生產的OLYMPUSBX51光學生物顯微鏡；購自北京國聯在線技術有限公司的腦脊液細胞圖像分析系統；購自Thermo Fisher公司的雙圓孔離心濾紙、玻片架支撐板等Cytospin-4型細胞玻片離心涂片機隨機配套；購自珠海貝索生物技術有限公司的瑞氏-吉姆薩染色液。

1．2．2 腦脊液白細胞計數：將適量腦脊液混勻，細胞計數采用牛鮑計數板進行測量，計算1 mL白細胞數。

1．2．3 Cytospin-4型細胞玻片離心儀制片法：按照計算出的白細胞計數，在離心機標本室內注入0.1～0.5 mL腦脊液標本，500～1 000 r/min離心，持續5～10 min，形成細胞玻片，實施邁格吉染色。

1．2．4 腦脊液細胞分類：在顯微圖像分析鏡下放置完成邁格吉染色的細胞玻片，按照細胞核、細胞胞漿的形態及特征計數100或200個細胞進行分類。在油鏡下選擇恰當視野，細胞圖像以688像素×512像素進行攝取，采集圖片庫，獲得細胞形態反映類型特征圖像。

1．2．5 測量細胞大小：測量攝取細胞的長徑、短徑、面積，在載物臺上放置鏡臺測微計，經計算機電子成像系統顯示。

2 結果

2．1 腦脊液白細胞計數與分類 3組標本腦病白細胞數、未激活單核細胞、未激活淋巴細胞、激活單核細胞、激活淋巴細胞、漿細胞、嗜中性粒細胞差異有統計學意義(均P<0.05)，但腦病嗜酸性粒細胞差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 腦脊液白細胞計數與分類對比±s)

注：與病毒性腦膜炎組對比，t=9.507、33.530、25.854、63.534、19.950、31.430，*P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000；與結核性腦膜炎組對比，t=9.402、46.299、44.130、53.500、14.001、11.975，#P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000；與病毒性腦膜炎組、結核性腦膜炎組對比，t=1.633、0.000，aP=0.141、0.000

2．2 腦脊液細胞面積、直徑比較 結核性腦膜炎組中性粒細胞面積大于病毒性腦膜炎組、化膿性腦膜炎組(P<0.05)，且病毒性腦膜炎組大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)；結核性腦膜炎組淋巴細胞面積大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)；化膿性腦膜炎組、結核性腦膜炎組淋巴細胞直徑大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)，且結核性腦膜炎組大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)；在單核細胞面積與直徑方面，結核性腦膜炎組、病毒性腦膜炎組均大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)。見表2。

表2 3組腦脊液細胞面積、直徑比較±s)

注：與化膿性腦膜炎組對比，t=7.003、19.210、20.207、9.783、10.288、16.402，*P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000、0.000；與化膿性腦膜炎組對比，t=15.923、26.495、21.525、8.031、6.833，**P=0.000、0.000、0.000、0.000、0.000；與病毒性腦膜炎組對比，t=14.383、14.879、14.784，#P=0.000、0.000、0.000

3 討論

本研究結果顯示，不同腦病的腦脊液細胞學特征存在差異。本組280份標本中，63份為化膿性腦膜炎，在細菌感染期主要表現為均勻一致的中性粒細胞反應，多見桿狀核細胞，且伴先令指數左移現象。一般來說，隨著炎癥的發展，在病原菌影響下，會出現中性粒細胞體積減少、染色變灰等現象，核染色質呈現塊狀，且顆粒消失，輪廓較為模糊，且會逐漸演變為膿細胞[5]。186份為病毒性腦膜炎，腦脊液細胞學主要表現為淋巴細胞反應，也可見中性粒細胞。淋巴細胞為免疫細胞，在抗原刺激下，會逐漸發展成免疫活性細胞[6]。而激活淋巴細胞即是形成病毒性腦膜炎的典型細胞學改變[7]。腦樣淋巴細胞是激活淋巴細胞的另一種特殊形式，在病毒性腦膜炎中較為常見[8]。這些異形淋巴細胞有較大的胞體，且具有不規則的細胞形態，胞漿顏色為藍色，有較為疏松的核染色質。31份為結核性腦膜炎，主要表現為淋巴樣細胞、單核吞噬細胞，偶爾伴中性粒細胞。該腦病細胞學滲出期有著較高的中性粒細胞比例，增殖期存在淋巴細胞、嗜中性粒細胞、單核細胞、激活的淋巴細胞、激活的單核細胞等，且差別不大[9]。一旦臨床采取積極治療方法，控制住病情后，會表現出免疫活性細胞含量提升，且有較長的持續時間。實施腦脊液檢查結果顯示，漿細胞存在抗原抗體反應。

作為腦脊液細胞學檢查的關鍵，腦脊液細胞的形態劃分發揮重要的作用。在描述細胞形態學時，首先需要描述的一個參數是細胞大小，能對某些異常細胞的來源進行判斷，便于進行實驗室及臨床診斷[10]。值得注意的是，隨著實驗條件及生理病理條件的變化，同一種細胞的形態特征也可能存在差異，會改變細胞的大小、形態、直徑、面積等。膿性腦膜炎有著較小的中性粒細胞體積，且相較于病毒性腦膜炎與結核性腦膜炎，其面積、直徑均較小，而中性粒細胞體積大小能對患者病情感染嚴重程度進行準確反映。筆者認為，這可能是因入侵的病原菌產生內毒素，從而對骨髓腔壁的基質細胞產生刺激，促使其生成刺激因子，導致中性粒細胞含量不斷提升。結核性腦膜炎的臨床癥狀較為復雜，為細菌性非化膿性腦膜炎。腦脊液細胞學檢查結果呈現出混合細胞反應，且患者普遍存在較長的病史。本研究中，結核性腦膜炎組淋巴細胞面積大于病毒性腦膜炎組(P<0.05)，淋巴細胞直徑大于化膿性腦膜炎組(P<0.05)。筆者認為，這可能是與患者病程較長炎癥難以控制、易形成腦膜粘連、交通性腦積水等因素有關。結核性腦膜炎的胞內寄生菌為結核桿菌，寄生場所包括單核吞噬細胞、中性粒細胞。而腦脊液中的結核桿菌會很快被單核巨噬細胞吞噬，可能與不同疾病細菌慢性期與急性期感染等因素有關，今后需進行深入研究。

綜上所述，腦脊液細胞形態學特征改變可作為診斷中樞神經系統感染性疾病的重要指標。

[1] 杜本麗．中樞神經系統感染腦脊液細胞形態學特征性檢查及臨床應用[J]．檢驗醫學與臨床，2012，9(7)：872-873．

[2] 康濤．449例中樞神經系統感染性疾病患者臨床特點及腦脊液細胞因子的變化[D]．西安：第四軍醫大學，2013．

[3] 吳若芬，王妍柏，何學仙，等．中樞神經系統感染疾病腦脊液細胞形態特征分析[J]．寧夏醫科大學學報，2015，37(11)：1 313-1 315；1 373．

[4] 路愛麗．腦脊液細胞學檢測在中樞神經系統感染性疾病中的意義[J]．中國實用醫藥，2016，11(12)：32-33．

[5] 張慶，何紅彥，馬愛蕊，等．中樞神經系統感染性疾病的腦脊液細胞學分析[J]．河北醫科大學學報，2016， 37(6)：644-646；651．

[6] 賀德安，張育才．87例中樞神經系統感染患兒腦脊液細胞學分析[J]．中國醫藥導報，2010，12(22)：121．

[7] 程春，楊友林，梁曉航，等．兒童視網膜母細胞瘤伴腦脊液種植轉移的MRI表現(附6例分析)[J]．放射學實踐，2012，27(7)：796-798．

[8] 姜濤，張愛武，方燕南，等．MRI及腦脊液分析在中樞神經系統感染鑒別中的作用[J]．中華神經醫學雜志，2014，13(1)：76-79．

[9] 鄭律．MRI及腦脊液分析在中樞神經系統感染鑒別中的作用[J]．實用中西醫結合臨床，2015，15(1)：76-79．

[10] 戰玉喜，李建新．顱內感染者腦脊液細胞學檢查的臨床意義[J]．山東醫學高等專科學校學報，2013，35(5)：364-366．

(收稿2016-11-20)

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1673-5110(2017)11-0086-03