P16、PTEN、CyclinD1在皮膚基底細胞癌附屬器分化中的表達及價值研究

戎錫云

[摘要]目的 綜合分析P16、PTEN、CyclinD1在皮膚基底細胞癌附屬器分化中的表達及價值。方法 選取在我院2015年3月～2016年5月收治的33例皮膚基底細胞癌患者的臨床資料作為研究組，再選取31例正常皮膚組織作為對照組。兩組研究對象均采取免疫組織化學技術方法，利用光學顯微鏡檢測視野，與此同時采用平均光密度值作為陽性染色評價指標，將平均值作為細胞切片的平均光密度。比較P16、PTEN、CyclinD1在皮膚基底細胞癌和正常皮膚組織中的平均光密度。結果 P16、PTEN在皮膚基底細胞癌中的平均光密度低于正常皮膚組織（P<0.05）；CyclinD1在皮膚基底細胞癌中的平均光密度顯著高于正常皮膚組織（P<0.05）。結論 P16、PTEN、CyclinD1可能與皮膚基底細胞癌的發生、發展有關。

[關鍵詞]P16；CyclinD1；PTEN；皮膚基底細胞癌；附屬器分化

[中圖分類號] R730.261 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）04（c）-0150-03

[Abstract]Objective To comprehensive ly analyze the expression and value of P16，PTEN and CyclinD1 in adnexal differentiation of basal cell carcinoma.Methods The clinical data of 33 skin basal cell carcinoma patients from March 2015 to May 2016 treated in our hospital were selected as study group，and other 31 normal skin tissues were selected as control group.Immunohistochemical technique was used in two groups.Optical microscopy was used for visual field detection.At the same time，the average optical density was used as the evaluation index，and the average value as average optical density of cell sections.Results The average optical density of P16 and PTEN in basal cell carcinoma was lower than that in normal skin tissue （P<0.05）.The average optical density of CyclinD1 in basal cell carcinoma was significantly higher than that in normal skin tissue （P<0.05）.Conclusion P16，PTEN and CyclinD1 may be related to the occurrence and development of basal cell carcinoma of the skin.

[Key words]P16；CyclinD1；PTEN；Skin basal cell carcinoma；Adnexal differentiation

皮膚基底細胞癌是人類較為常見的惡性皮膚腫瘤，皮膚基底細胞癌主要由多功能性基底依賴間質細胞組成，能分化成附屬器低度惡性腫瘤與表皮低度惡性腫瘤[1]。相關研究資料表明，皮膚基底細胞癌附屬器腫瘤的形成與發展是內外因多種作用下的效果[2]。癌細胞的凋亡和抑癌基因的失活是發生腫瘤的重要因素，筆者將根據相關工作經驗，綜合研究免疫組化方法來觀察P16、PTEN、CyclinD1在基底細胞癌附屬器分化中的表達及價值，以期能夠分析出皮膚基底細胞癌的發病機制與病發原因等，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取在我院2015年3月～2016年5月收治的33例皮膚基底細胞癌患者的臨床資料作為研究組，再選取31例正常皮膚組織作為對照組。研究組中男22例，女11例；平均年齡為（56.22±10.36）歲；皮膚破損部位：24例面部、5例頸部、3例耳部、1例背部。對照組中男20例、女11例；平均年齡為（57.01±10.43）歲。兩組患者的一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

采取免疫組織化學技術方法，利用光學顯微鏡檢測視野，與此同時采用平均光密度值最為陽性染色評價指標，將平均值作為細胞切片的平均光密度。

所有切片均由主治醫師進行閱片，陽性指標：P16、PTEN、CyclinD1細胞質內出現黃色或者棕黃色反應物顆粒。

1.3統計學方法

采用SPSS 20.0統計學軟件進行分析，計量資料用x±s表示，采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

P16、PTEN在皮膚基底細胞癌中的平均光密度低于正常皮膚組織（P<0.05）；CyclinD1在皮膚基底細胞癌中的平均光密度顯著高于正常皮膚組織（P<0.05）（表1）。

3討論

3.1 P16與皮膚基底細胞癌的關系

劉梅等[3-4]在黑色素瘤細胞中觀察到一種蛋白質，此種蛋白質與細胞的周期素依賴性蛋白互為結合，學者們利用定向測序技術產生的圖像不難發現，在300多種腫瘤細胞系染色體中（8p23區域內）有1個等位基因突變，將此克隆的基因稱為P16基因。P16基因在人體中的染色體中，主要是由124、307、12bp等內含子組成，當真核細胞分裂到G1中晚期的時候，CyclinD1與CDK4/6形成相關復合物，此種復合物會使得pbp發生磷酸化[5]。P16蛋白結構基礎中分為4個回鉤狀重疊序列，此種結構序列遠離了CyclinD1周期蛋白依賴胰酶上的氨基酸序列，與CyclinD相比，在一定程度上抑制了復合物的產生，有效阻止了基因的復制[6]。當P16基因失活不能夠進行有效表達時，細胞周期素與CDK4互為結合，過度刺激細胞分裂，從而形成腫瘤[7]。在皮膚惡性腫瘤組織中存在明顯的P16蛋白缺失情況，王偉等[8]認為腫瘤分期的Ⅲ/Ⅳ期P16蛋白陽性表達率顯著低于腫瘤分期的Ⅰ/Ⅱ期，從上述研究數據不難看出，P16基因失活與腫瘤進展有密切關系。

3.2 CyclinD1與皮膚基底細胞癌的關系

細胞周期中，真核生物的正常細胞分裂按照G1-S-G2-M順序方式進行分裂，真核生物在各個時相的轉變過程中，其中最為關鍵的調控關卡是：G1-S、G2-M[9]。細胞一旦從G1期進入到S期后不會受到外在刺激的影響，因此G1點關系著細胞的命運是往前還是推后[10]。相關資料研究表明顯示，諸多腫瘤的發生情況與G1/S期檢測點的缺陷密切相關，細胞周期的分裂受到細胞因子的調控，其中最重要的細胞周期蛋白是Cyclin[11]。簡而言之，CyclinD1在細胞周期的調控和腫瘤的發生發展過程中起著重要作用[12-13]。有學者在研究甲狀旁腺腺瘤時發現CyclinD1 基因，在甲狀旁腺腺瘤中CyclinD1蛋白過度表達，因此CyclinD1又被稱為PRAS1（甲狀旁腺腺瘤基因）[14-15]。此類基因全長15 kb，包含5個外顯子。CyclinD1蛋白中的氨基酸序列為保守序列，在結構的主要部分中，其主要功能與CDK（細胞周期素依賴激酶）互為結合，控制好細胞周期素依賴激酶對蛋白磷酸化作用的能力能夠有效調整好細胞周期的進展速度，因此也可以認為CyclinD1是腫瘤發生的重要內在原因之一[16-18]。

3.3 PTEN與皮膚基底細胞癌的關系

諸多蛋白酪氨酸激酶是由原癌基因編碼的，蛋白的編碼基因很有可能是一種抑癌基因。相關研究資料結果表明，腫瘤的發生與染色體的片段缺失，提示此種染色體與腫瘤的基因密切相關[19-20]。此類基因在染色體上，其編碼蛋白與細胞質蛋白同宗同源，在諸多腫瘤中被染色體同源性丟失，因此被稱為基因PTEN。PTEN基因中含有9個外顯子和8個內含子，其主要功能區在ND端。PTEN可有效調節細胞的生長，主要通過脂質磷酸酶的作用解除，從而控制好激酶活性喪失；另外，PTEN可有效加快細胞凋亡，主要是通過PKB的水平調節作用。PTEN缺失導致PIP3水平較高，激活后能夠抑制白血病細胞的凋亡，誘導新血管生成。

綜上所述，P16、PTEN、CyclinD1可能與皮膚基底細胞癌的發生、發展有關。

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（收稿日期：2017-01-18 本文編輯：許俊琴）