Netrin-1對大鼠實驗性腦梗死后同側丘腦血腦屏障保護作用☆

李晨光闕嘉麗劉可嘉王浩月余劍

·論 著·

Netrin-1對大鼠實驗性腦梗死后同側丘腦血腦屏障保護作用☆

李晨光*闕嘉麗*劉可嘉*王浩月*余劍*

目的 觀察腦梗死后同側丘腦是否出現血腦屏障破壞，Netrin-1對血腦屏障破壞是否具有保護作用及其能否促進神經功能恢復。方法 Sprague-Dawley大鼠36只，建立右側大腦中動脈閉塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型，假手術（sham）組僅暴露右側大腦中動脈，分為sham組、MCAO+PBS組及MCAO+ netrin-1組，每組6只。通過改良大鼠神經功能缺損評分（modified neurological severity scores，mNSS）評價神經功能，造模后第8天及第14天取材，HE染色觀察梗死灶，免疫熒光檢測occludin及albumin表達與分布，Western blot檢測occludin及ZO-1表達水平。結果 mNSS評分見予以Netrin-1后于梗死后第8天及第14天評分降低（P<0.05）。HE染色見右側皮層梗死灶。Western blot見梗死后第8天開始出現occludin減少（P<0.05），第14天occludin及ZO-1均明顯減少（P<0.05），免疫熒光見梗死后第8天及第14天occludin減少伴albumin血管外滲出；予以Netrin-1后，western blot及免疫熒光見梗死后第14天occludin增多（P<0.05），伴albumin滲出增多，ZO-1無明顯變化。結論 Netrin-1對大鼠實驗性腦梗死后同側丘腦血腦屏障破壞具有保護作用，并可促進梗死后神經功能恢復。

腦梗死 Netrin-1血腦屏障 丘腦

腦梗死后，除原發梗死灶外，同側丘腦亦會發生血腦屏障的破壞[1]，其與腦梗死后遠隔部位繼發性損傷密切相關，后者又影響腦梗死后神經功能恢復，并與持續性癡呆相關[2]。

Netrin-1是層粘連蛋白相關超家族Netrins家族中研究最廣泛的一種，最早作為軸突導向因子被人們所發現，其在神經系統發育過程中起著關鍵性作用[3-4]。其受體主要有DCC家族（含再生蛋白）、UNC5家族（UNC5H1、UNC5H2、UNC5H3/ RCM及UNC5H4）及整合素家族[3]。近來，有研究發現Netrin-1對原發梗死灶的血腦屏障破壞具有保護作用[5]。本課題組通過體外實驗也發現，Netrin-1對大鼠腦微血管內皮細胞在氧糖剝奪下的細胞活性具有保護性作用[6]。故我們擬采用動物實驗，通過建立大鼠實驗性腦梗死模型，探究Netrin-1是否對梗死后同側丘腦血腦屏障的破壞具有保護作用。

1 材料與方法

1.1 動物模……