仔豬鏈球菌的分離鑒定

謝冰

摘要：某養豬場，45日齡的斷奶仔豬1200頭，其中，20多頭45日齡的斷奶仔豬，出現精神沉郁，食欲廢覺，發燒41～42℃，發病后的2～3d，出現了嚴重的食欲廢覺，個別的45日齡的斷奶仔豬出現了神經癥狀，典型的癥狀后肢關節對稱性腫脹，有的45日齡的斷奶仔豬不表現任何的癥狀出現突然死亡。為了確定引起45日齡的斷奶仔豬發病及突然死亡的病原菌，首先對突然死亡的45日齡的斷奶仔豬進行剖檢，從無菌采集肝臟、肺臟、腎臟、心血、淋巴結等病料組織中分離1株病原菌，對分離1株病原菌通過培養特性鑒定、細菌形態學觀察、生化特性等鑒定等方法，從45日齡斷奶仔豬的體內分離到的1株病原菌被鑒定為鏈球菌。將從45日齡仔豬體內分離的鏈球菌肌肉注射攻毒給小白鼠結果顯示，從45日齡仔豬體內分離的鏈球菌具有很強的致病性。因此，用K-B藥敏紙片法對從45日齡仔豬體內分離的鏈球菌進行藥敏試驗分析其耐藥性，結果顯示，分離菌株對頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢他定、青霉素6種藥物高度敏感。

關鍵詞：仔豬；鏈球菌；分離鑒定；

中圖分類號：S858.28 文獻標識碼：B 文章編號：2096-3637（2017）09-0071-01

一般的豬的相關的傳染性疾病主要包括病毒性、細菌性疾病。其中，鏈球菌病是斷奶仔豬急性死亡和關節腫脹的主要病原菌，仔豬感染了鏈球菌后，死亡率均較高能達到50%以上，仔豬的鏈球菌病，嚴重危害著養豬業的發展。因此，斷奶仔豬的鏈球菌病成為臨床上常見的細菌性傳染性疾病之一，仔豬鏈球菌病是由鏈球菌引起不同階段豬的一種急性、熱性、敗血性傳染病，可以感染不同階段的豬，感染率和死亡率均較高。尤其對仔豬的致病性最強，危害最嚴重。鏈球菌病發病無明顯的季節性，常年均有引發仔豬發病，臨床上主要表現為急性敗血癥，關節腫脹等，表現神經癥狀，渾身抽搐，麻痹死亡。

1發病情況

某一養豬場，45日齡的斷奶仔豬1200頭，其中，20多頭45日齡的斷奶仔豬，出現精神沉郁，食欲廢覺，發燒41～42℃，發病后的2～3d，出現了嚴重的食欲廢覺，個別的45日齡的斷奶仔豬出現了神經癥狀，典型的癥狀后肢關節對稱性腫脹，有的45日齡的斷奶仔豬不表現任何的癥狀出現突然死亡。

2.臨床證狀

45日齡的斷奶仔豬1200頭，其中，20多頭45日齡的斷奶仔豬出現了精神沉郁，發熱41～42℃，食欲開始減少，到后期出現了食欲廢絕，出現神經癥癥狀，四肢呈現了游泳樣運動，抽搐麻痹而死，關節腫大。

3.病理剖檢變化

對45日齡斷奶死亡的仔豬進行病理組織學剖檢，觀察其病理組織學變化。剖檢變化可見，肝臟腫大、出血，形成出血斑，呈藍紫色；頜下淋巴結、腹股溝管淋巴結、腸系膜淋巴結腫大、出血；腹腔均有淡黃色滲出液，氣管、喉頭有不同程度的腫脹、出血；45日齡斷奶出現了肺臟腫脹、出血；胃底部區及腸道有出血點，腸壁變薄，腸黏膜脫落；關節炎腫脹，切開后，有炎性滲出物滲出，關節面腫脹。

3細菌分離培養與形態學觀察

無菌采集45日齡斷奶死亡的仔豬的肝臟、腎臟、心血、關節滲出液等病料組織接種于7%綿羊脫纖血液營養培養基上， 37℃培養12～16h后，在7%綿羊脫纖血液營養培養基生長出菌落，生長出來的菌落呈淡灰色、大小一致透明、圓形小菌落，呈現典型的β溶血現象，挑起7%綿羊脫纖血液營養培養基上，呈現典型的β溶血現象的菌落，革蘭氏染色觀察，分離菌株呈單個的或者雙排列的陽性球菌。

4分離菌株的生化鑒定

挑取7%綿羊脫纖血液營養培養基上單個菌落接種于含5% 血清的TSB 培養基里， 37℃震蕩培養12～16h后，按照說明加入鑒定鏈球菌Raid ID 32 STREP試紙條中， 37℃培養24h后，進行生化試驗鑒定，鏈球菌Raid ID 32 STREP試紙條結果顯示，分離菌株為鏈球菌。

5細菌的的致病性試驗

挑取7%綿羊脫纖血液營養培養基上單個菌落接種于含5% 血清的TSB 培養基里， 37℃震蕩培養12～16h后，調整菌液濃度（105cfu /mL），將10只小白鼠分為2組，1組每只小白鼠肌肉注射分離菌株0.5 mL，2組，肌肉注射口服等量的生理鹽水，攻毒12h，觀察7d，記錄每組小鼠的死亡數和發病情況，結果顯示，在攻毒后的48h，1組小鼠出現全部死亡，2組健康存活，因而，證實了從45日齡斷奶死亡的仔豬體內分離鏈球菌具有很強的致病性。

6藥敏試驗

用K-B藥敏紙片法對仔豬源鏈球菌進行藥敏試驗，結果顯示，分離菌株對頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢他定、青霉素6種藥物高度敏感。

7結論

從病死的45日齡的斷奶仔豬體內分離到的病原菌為致病性鏈球菌，致病性鏈球菌，藥敏試驗結果顯示，致病性鏈球菌對頭孢曲松、氨芐西林、阿莫西林、頭孢他定、青霉素6種藥物高度敏感，當發生該病時，應選擇敏感的藥物進行治療。

參考文獻

[1]張廣斌，李舫，袁東芳，等.豬鏈球菌2型的分離鑒定及豬場帶菌情況調查[J].中國動物疫，2017，（09）：92-95.

[2]惠艷華，丁寧，沈莉萍，等.一例豬鏈球菌2型感染的病原分離鑒定及藥敏試驗[J].中國動物檢疫，2017，34（08）：97-99.