廣西大容山野生毛木耳分離及栽培試驗

秦延春 陳國龍 盧玉文韋錦福 吳章榮 陳德榮 丘獻娟 曹本雄 廖芳賢 李永明 高為民

（玉林市微生物研究所/廣西食用菌創新團隊玉林綜合試驗站，廣西玉林537000）

圖1 分離培養出毛木耳（容耳1號）

毛木耳柔滑可口，清香脆嫩，味鮮香濃，尤其是其風味獨特，品質上乘，為眾多菌類品種所不及。毛木耳食用、藥用價值高，不但可鮮銷，還可烘干作為干品銷售，近年來市場價格穩中有升。由于毛木耳栽培受地域氣候影響較大，且品種繁多，但真正適合廣西氣候的品種較少，而在廣西氣候條件下生長的大容山野生毛木耳香甜脆嫩。為此，筆者進行了大容山野生毛木耳的分離與栽培試驗，現將試驗結果總結如下。

1 材料與方法

1.1 母種分離2013年3月在大容山周邊鄉鎮小平山、北市、新圩、民樂等進行野生毛木耳生長環境調查，并采集了野生毛木耳。將采集的毛木耳子實體帶回實驗室分離培養。方法是先將子實體的泥土清理干凈，采用組織分離的方法在無菌條件下進行操作，分離時選擇朵型正常，無病蟲生長健壯的毛木耳子實體。分離取材按基部、距基部1 cm處、邊緣三個部位。培養基采用PDA加富培養基，在適宜條件下進行培養，獲得毛木耳菌種（暫命名為：容耳1號）用作試驗菌種。

1.2 馴化試驗

1.2.1 菌絲生長溫度范圍測定 2013年4月進行了菌絲生長溫度范圍的測定。將擴大培養的毛木耳菌絲接到PDA加富培養基斜面試管上，置于5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃培養條件下培養，每個溫度處理培養5支試管。接種10 d后測量菌絲生長速度（mm/d）（方法：菌絲生長前端距試管底部的距離除以菌絲生長天數，再取平均數）。同時觀察菌絲形態特征。

1.2.2 不同母種培養基配方篩選 試驗設計了5種母種培養基配方（1000 mL）：①馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g。②馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，硫酸鎂2 g，磷酸二氫鉀2 g。③馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，硫酸鎂2 g，磷酸二氫鉀2 g，蛋白胨2 g。④馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，硫酸鎂2 g，磷酸二氫鉀2 g，蛋白胨4 g。⑤馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，硫酸鎂2 g，磷酸二氫鉀2 g，麩皮20 g。2013年5月，將分離純化好的毛木耳母種擴大培養，取菌齡相同0.5 cm大小的接種塊分別接入試管斜面中，每個配方設3個重復，共接15支斜面試管。接好后放置25℃恒溫箱內培養，接種10 d后測量菌絲生長速度（mm/d），并觀察菌絲形態特征。

1.2.3 母種培養基pH篩選 對PDA加富培養基設置了6個pH梯度：4、5、6、7、8和9。將純化好的毛木耳母種擴大培養，取菌齡相同0.5 cm大小的接種塊分別接入上述試管斜面中，每個pH處理設3個重復共接18支斜面。接好后放置25℃恒溫箱內培養，接種10 d后測量菌絲生長速度（mm/d），并觀察菌絲形態特征。

1.2.4 原種及栽培種培養試驗 原種和栽培種用相同的培養基，試驗設5種培養基配方：①木屑68%、棉子殼15%、麩皮15%、石膏1%、磷酸鈣1%；②木屑78%、棉子殼19%、石灰2%、磷酸鈣1%；③木屑97%、石膏1%、磷酸鈣2%；以上各配方培養料按照常規制作，高壓蒸汽滅菌→冷卻→無菌室接種，每個配方設5個重復，共接15袋。接好后放置25℃恒溫箱內培養，觀察菌絲形態特征。

1.2.5 栽培試驗 出耳溫度試驗：試驗設計了低溫（15℃±3℃）出耳，常溫（25℃±3℃）出耳，35℃±3℃以上出耳，共3個處理。

袋栽試驗：當菌棒袋壁上的菌絲扭結凸起時，即原基形成時，在袋壁用刀劃“V”形口，噴霧保濕，保持空氣相對濕度在85%～90%，促進子實體迅速生長。

段木栽培試驗：當耳木含水量為40%～45%時，將耳木放入稀石灰水中浸泡1 h左右，取出晾干，打孔，接種，噴水保濕發菌，觀察出耳情況。

2 結果與分析

2.1 大容山毛木耳不同部位組織分離培養結果從表1看出，毛木耳子實體不同部位組織分離成功率存在較大差異：基部組織分離成功率較低，只有60%；邊緣的組織分離成功率稍高，為80%；距基部1 cm處的組織分離成功率最高，達90%。毛木耳子實體不同部位組織分離菌絲在同一培養基內的生長速度及長勢存在一定的差異：基部和距基部1 cm處組織分離的菌絲不但生長速度快，而且表現出較好的生長勢，即生長旺盛、菌絲前端整齊、潔白濃密、粗壯有力；而邊緣組織分離的菌絲生長速度慢，長勢表現一般，前端不夠整齊、菌絲較為稀疏、顏色偏淡。

表1 大容山野生毛木耳不同部位分離菌絲生長情況（培養溫度25～28℃）

2.2 菌絲培養溫度試驗結果由表2可見，不同溫度對野生毛木耳菌絲生長的影響不同。菌絲生長溫度范圍為15～25℃，適宜的溫度是20～25℃，最佳溫度25℃，菌絲長勢旺盛，菌絲濃密，整齊，菌絲生長速度達5.8 mm/d。當溫度在高于35℃低于5℃時，菌絲不生長；溫度低于15℃以下菌絲生長緩慢、微弱。

表2 不同溫度對大容山野生毛木耳菌絲生長的影響

2.3 母種培養基試驗結果由表3可見，在配方④和⑤培養基上，毛木耳菌絲濃密，生長旺盛，菌絲邊緣整齊度好，生長速度快，分別為6.01 mm/d，6.18 mm/d。由此可見蛋白胨和麩皮可以提供豐富的營養元素適宜毛木耳菌絲的生長。

表3 5種培養基中大容山毛木耳菌絲生長情況

2.4 母種培養基pH試驗結果由表4可見，大容山野生毛木耳在不同pH條件下菌絲前端整齊度、菌絲濃密、菌絲長勢、菌絲生長速度有所不同。pH為6時，菌絲前端整齊、濃密、長勢好，生長速度最快，為6.11 mm/d；pH為9時，菌絲微弱，菌絲稀疏，不整齊，生長速度僅為3.08 mm/d，在其他pH下的菌絲生長速度為：pH7＞pH5＞pH4＞pH8。

表4 不同p H大容山野生毛木耳菌絲生長情況

2.5 不同原種培養基培養結果配方①毛木耳菌絲生長旺盛，菌絲濃密，菌絲前端整齊，菌絲滿袋需25～28 d；配方②毛木耳菌絲密，長勢一般，整齊度一般，菌絲滿袋需30～35 d；配方③毛木耳菌絲稀疏，長勢弱，前端不整齊，菌絲滿袋需32～38 d。毛木耳在供試三種培養基上均能生長，其中配方①培養基菌絲長勢優于另兩個培養基，菌絲滿袋時間也早于另兩個培養基。

表6 毛木耳不同栽培方式出耳情況

2.6 栽培試驗結果由表6可見，毛木耳在15℃低溫出耳的一組、25℃處理的一組和35℃以上處理一組都可以出耳，出耳最適溫度為25℃處理的一組；毛木耳栽培方式上適宜袋栽，段木栽培在25℃處理的一組子實體長勢一般。

3 小 結

試驗表明：大容山野生毛木耳菌絲最適宜生長溫度為20～25℃；最適宜生長pH 6～7；最適宜出耳溫度25～30℃，溫度太低或太高對毛木耳菌絲體的生長均不利；出耳不需要溫差，屬于中溫恒溫型菇類；菌絲在添加4 g蛋白胨的PDA加富母種培養基和添加20 g麩皮的PDA加富母種培養基生長較好，說明毛木耳菌絲生長要求的氮素營養較高，為此在生產中要添加適量的餅粉、麩皮、玉米粉等含氮物質。