頭孢替坦異構體研究

黃貴蓮??黃滔

[摘要] 目的 研究頭孢替坦的兩個差向異構體d-頭孢替坦和l-頭孢替坦的轉換規(guī)律，明確異構體間的轉化條件。方法 采用酸、堿、熱、氧化、強光條件對頭孢替坦進行破壞試驗。結果 在酸、堿、熱條件下d-頭孢替坦會向l-頭孢替坦轉化。結論 本研究為頭孢替坦及頭孢替坦二鈉合成過程中的反應條件提供依據(jù)，也給生產(chǎn)過程控制提供支持。

[關鍵詞] 頭孢替坦；異構體；轉換條件

[中圖分類號] R917 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2017）05-34-03

[Abstract] Objective To study the conversion rule of two epimers of cefotetan， d-cefotetan and l-cefotetan， and determine the transformation conditions between two epimers. Methods We had done the destruction tests （including acid， alkali， heat， oxidation and light） to cefotetan. Results Test results shew that d-cefotetan could convert to l-cefotetan in acid， alkali and heat. Conclusion The study provides the basis for the reaction conditions in the synthesis of cefotetan and cefotetan disodium， and it also provides support for the production process control.

[Key words] Cefotetan； Epimers； Conversion condition

頭孢替坦（cefotetan，圖1）對革蘭陽性菌和陰性菌均有抑制作用，臨床用于治療腹腔內(nèi)感染、術后傷口感染及復雜性尿路感染等[1-10]。本品收載于美國藥典36版（USP 36）[11]和日本藥局方16版（JP 16）[12]，中國藥典2015年版（ChP 2015）尚未收載本品。有關物質(zhì)相關文獻[13-14]未有提及頭孢替坦異構體，只有JP 16頭孢替坦質(zhì)量標準項下收載了l-異構體，限度規(guī)定l-異構體應為35%≤l-異構體≤45%。有文獻[15]指出，頭孢替坦兩個差向異構體（d-頭孢替坦、l-頭孢替坦）與互變異構體的轉化（圖2）。文獻進一步指出，兩個差向異構體（d-頭孢替坦、l-頭孢替坦）具有相同的抗菌活性，但具有不同的血清半衰期，可能不會引起不同的臨床效果。為了進一步明確兩個異構體間的轉化條件，我們采用JP 16質(zhì)量標準項下的l-異構體檢測方法，在破壞條件（包括酸、堿、熱、氧化、強光）下進行試驗。

1 儀器與試藥

U3000高效液相色譜儀（Thermo儀器公司），變色龍色譜工作站；BP211D型萬分之一電子分析天平，德國賽多利斯科學儀器（北京）有限公司。

頭孢替坦（本研究所自制，含量 99.2%，批號 P131001）；乙腈為色譜純；十二水合磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、四丁基硫酸氫氨均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

儀器：戴安四元 U3000。

色譜柱：Inertsi ODS-3 4.0mm×150mm，5μm。

流動相：流動相A∶pH 7.0磷酸鹽緩沖液（0.1mol/L的十二水合磷酸氫二鈉水溶液，0.1mol/L的磷酸二氫鉀水溶液，混合調(diào)節(jié) pH 7.0）∶流動相B（水）∶流動相C（每150mL乙腈含1.0g四丁基硫酸氫氨）=45∶45∶10。

流速：1.2mL/min。

檢測波長：254nm。

柱溫：40℃。

進樣量：5μL。

2.2 試驗

2.2.1 未破壞樣品 空白：精密量取空白溶液5μL，照異構體檢測方法，進樣，記錄色譜圖；未破壞：取本品約5mg，置10mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，色譜圖見圖3。

2.2.2 酸破壞試驗 酸破壞：取本品約5mg，置10mL量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液1mL，室溫下放置1min，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH至中性，加水稀釋至刻度，搖勻；酸破壞空白：加0.1mol/L鹽酸溶液1mL置10mL量瓶中，室溫下放置1min，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)pH至中性，加水稀釋至刻度，搖勻，色譜圖見圖4。

2.2.3 堿破壞試驗 堿破壞：取本品約5mg，置10mL量瓶中，加0.01mol/L氫氧化鈉溶液1mL，室溫下放置5min，用0.01mol/L 鹽酸溶液調(diào)pH至中性，加水稀釋至刻度，搖勻；堿破壞空白：加0.01mol/L氫氧化鈉溶液1mL置10mL量瓶中，室溫下放置5min，用0.01mol/L 鹽酸溶液調(diào)pH至中性，加水稀釋至刻度，搖勻，色譜圖見圖5。

2.2.4 氧化破壞試驗 氧化破壞：取本品約10mg，置10mL量瓶中，加10%的雙氧水1mL，放置5min，40℃超聲5min，加水稀釋至刻度，搖勻；氧化破壞空白：加10%的雙氧水1mL置10mL量瓶中，放置5min，40℃超聲5min，加水稀釋至刻度，搖勻，色譜圖見圖6。

2.2.5 熱破壞試驗 熱破壞：精密稱取本品10mg，置10mL量瓶中，加入1mL水溶解，置95℃水浴中加熱10min，加水稀釋至10mL，搖勻；熱破壞空白：加入1mL水，置95℃水浴中加熱10min，加水稀釋至10mL，搖勻，色譜圖見圖7。

2.2.6 光破壞試驗 光破壞：精密稱取本品10mg置10mL量瓶中，加入1mL水溶解，置（4500±500）lx照度下照射24h，加水稀釋至10mL，搖勻。光破壞空白：加入1mL水，置（4500±500）lx照度下照射24h，加水稀釋至10mL，搖勻，色譜圖見圖8。

2.2.7 破壞試驗結果 按上述條件，照異構體檢查方法試驗，試驗結果見表1。結果表明，空白溶劑無干擾，酸、堿、熱條件下，l-頭孢替坦都會增大，即在酸、堿、熱條件下d-頭孢替坦會向l-頭孢替坦轉換。

3 討論

從上述結果可以得到，在酸、堿、熱條件下d-頭孢替坦會向l-頭孢替坦轉換。由于頭孢替坦二鈉為頭孢替坦的常用上市產(chǎn)品形式，在生產(chǎn)過程中，頭孢替坦需加入碳酸氫鈉反應生成頭孢替坦二鈉。為了使保證產(chǎn)品質(zhì)量，嚴格按照JP 16版頭孢替坦的質(zhì)量標準異構體項下的要求，對自制產(chǎn)品進行異構體的控制并列入生產(chǎn)的內(nèi)控標準中。通過研究異構體的轉化條件，給頭孢替坦合成過程中的反應條件、頭孢替坦轉化為頭孢替坦二鈉的反應過程提供了強有力地技術支持和依據(jù)，也給產(chǎn)品生產(chǎn)的過程控制提供支持，有效地保證了產(chǎn)品的安全有效性。

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（收稿日期：2016-11-04）