豬微生物學(xué)診斷材料的采集方法及其注意事項(xiàng)

邵明奇

（內(nèi)蒙古通遼市扎魯特旗農(nóng)牧業(yè)局聯(lián)合屯獸醫(yī)站，內(nèi)蒙古通遼 029100）

豬微生物學(xué)診斷材料的采集方法及其注意事項(xiàng)

邵明奇

（內(nèi)蒙古通遼市扎魯特旗農(nóng)牧業(yè)局聯(lián)合屯獸醫(yī)站，內(nèi)蒙古通遼 029100）

近年來(lái)豬只發(fā)生疫病時(shí)，單純感染的病例逐漸減少，而混合感染和繼發(fā)感染的病例愈來(lái)愈多。不同疫病的癥狀和病理變化交織在一起，給疫病的診斷帶來(lái)許多困難，即使經(jīng)驗(yàn)豐富的獸醫(yī)，也常需要靠微生物學(xué)診斷和血清學(xué)檢查來(lái)進(jìn)行判斷。微生物學(xué)診斷和血清學(xué)檢查能否獲得明確結(jié)果，關(guān)鍵在于是否能夠正確地采集病料。因此，動(dòng)物科技工作者必須親自采集供檢查用的各種材料。

1 采集病料時(shí)的注意事項(xiàng)

有價(jià)值的試驗(yàn)結(jié)果在很大程度上取決于材料的采集和處理方法是否適當(dāng)合理。因此正確地采集材料，及時(shí)運(yùn)送和處理，是極其重要的。選擇典型病例，當(dāng)發(fā)現(xiàn)在一個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)多頭豬同時(shí)發(fā)病時(shí)，應(yīng)選擇臨床癥狀典型有代表性，尚未進(jìn)行過(guò)治療的病例。因?yàn)槭褂眠^(guò)抗菌藥物治療過(guò)的病豬，在血液和組織中常難以查出病原體，應(yīng)給予注意。及時(shí)取材，病料的取材應(yīng)在病豬死前或死后隨即完成。死后時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，則組織細(xì)胞變性、腐敗，影響檢查結(jié)果。因此，在病豬死后取材，炎熱季節(jié)最遲不得遲于死后2 h；寒冷季節(jié)也應(yīng)在死后5 h內(nèi)完成。正確取材，采取病料時(shí)應(yīng)根據(jù)臨床診斷、流行病學(xué)材料分析所示疾病的種類和病原體的嗜組織性，來(lái)決定采取哪些組織和器官。若懷疑豬瘟?xí)r，應(yīng)采取淋巴結(jié)和脾臟；若懷疑偽狂犬病時(shí)，可取腦和脊髓。總之，采取病料應(yīng)采集病原體含量高，且病變明顯的組織和器官。這樣不但可以省去許多不必要的檢查手續(xù)，而且可以為疾病防治贏得寶貴時(shí)間。

應(yīng)排除炭疽可疑，對(duì)突然死亡的病豬，如見(jiàn)有皮下水腫、天然孔出血、尸僵不全者，應(yīng)首先從頸靜脈或耳靜脈采血，涂制血液涂片數(shù)張，立即進(jìn)行固定、染色、顯微鏡檢查，排除炭疽后方可進(jìn)行剖檢和取材。

防止雜菌污染，解剖病豬尸體的所用器械，如刀、剪、玻璃器皿等均應(yīng)消毒。采取組織、器官時(shí)，應(yīng)以棉簽浸上95%酒精在臟器表面進(jìn)行燒灼消毒，迅速以手術(shù)刀切一小口，用白金耳伸入切口深處取材接種于培養(yǎng)基上；如要進(jìn)行病毒分離，燒灼消毒后，可用手術(shù)刀切取一塊組織（重約5～10 g），在酒精燈上燒灼一下，立即放入消毒過(guò)的平皿內(nèi)，送入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒分離。

2 病料的采集方法

2.1 血液、腹、胸水的采集

病豬生前可從耳靜脈采血，剖開(kāi)后可以心臟采血。用5 mL或10 mL注射器，吸取抗凝劑（3.8%檸檬酸鈉或1% EDTA二鈉）1.0 mL，從耳靜脈或心臟采血4.0 mL，混合均勻后送實(shí)驗(yàn)室檢查。如要送往外地實(shí)驗(yàn)室檢查，可向血液中加入10%福爾馬林液2.0 mL以起到防腐的效果。病豬尸體剖開(kāi)后，應(yīng)立即用注射器分別抽取腹水或胸水，抽得的腹水或胸水應(yīng)立即送實(shí)驗(yàn)室檢查。

2.2 乳汁、膿汁等的采集

用消毒液清洗和消毒泌乳母豬乳房，將最初擠出乳汁棄去，然后采集乳汁10～20 mL于試管中，加塞送實(shí)驗(yàn)室檢查。膿汁、水泡液、水腫液、滲出液等都應(yīng)以注射器抽取，抽取后立即送實(shí)驗(yàn)室檢查。

2.3 鼻液、糞便的采集

采集鼻液時(shí)，可用滅菌棉拭取，放入試管中，加蓋后立即送實(shí)驗(yàn)室檢查。在以上材料送達(dá)實(shí)驗(yàn)室后，應(yīng)立即制作各種液體材料的涂片，進(jìn)行固定、染色、顯微鏡檢查。病豬生前，可用消毒棉拭子從直腸中掏取；剖開(kāi)病豬尸體后，可選取適宜的腸段5～10 cm，兩端結(jié)扎后，剪斷取出放入平皿中送實(shí)驗(yàn)室檢查。

2.4 膽汁、內(nèi)臟器官的采集

可將豬膽囊整個(gè)取出，放入平皿中送實(shí)驗(yàn)室檢查。淋巴結(jié)可連同周圍的脂肪整個(gè)采取；肝、脾、肺、腎臟、腦和脊髓，可選取病變明顯部位切取（l cm×1 cm）一塊，分別放入盛有PBS生理鹽水的平皿內(nèi)，立即送實(shí)驗(yàn)室檢查。

3 病料的采取部位

不同的病原微生物具有不同的嗜組織性。侵入機(jī)體后大多集中分布于所嗜組織內(nèi)。因此，采取病料時(shí)根據(jù)臨床診斷、流行病學(xué)材料分析所示疾病的種類和病原體的嗜組織性，來(lái)決定采取哪些組織和器官。現(xiàn)將不同傳染病應(yīng)采集的病料歸納如下：對(duì)于惡性水腫，生前取患部水腫液，死后取肝臟及患部水腫液；對(duì)于巴氏桿菌病，生前取血液，死后取心血、肝、脾、肺、淋巴結(jié)；對(duì)于大腸桿菌病，死后取前段小腸內(nèi)容物及腸粘膜；對(duì)于仔豬副傷寒，生前急性采集血液、糞便，慢性取關(guān)節(jié)液、膿汁；流產(chǎn)母豬采胎衣、胎兒，死后取血液、肝、脾、腎、淋巴結(jié)、膽汁；對(duì)于慢性萎縮性鼻炎，生前取深部鼻黏液，死后取豬頭上頜、深部鼻粘膜。

懷疑有以下病癥時(shí)，在采取病料時(shí)應(yīng)注意防護(hù)和防止細(xì)菌散布。對(duì)于炭疽，生前取末梢血和炭疽癰的分泌物或滲出液，死后取血液、脾、炭疽癰組織、耳朵；對(duì)于結(jié)核病，生前取乳汁、糞便、尿、精液、陰道分泌物、膿汁，死后取有病變的肺臟和其他器官組織；對(duì)于豬丹毒，生前急性采血液，亞急性采皮疹滲出液，慢性采關(guān)節(jié)液，死后取血液、肝、脾、腎、淋巴結(jié)、膽汁，尸體腐敗取長(zhǎng)骨。

S828

B

1001-0084（2017）03-0063-01

2017-02-17

邵明奇（1973-），男，內(nèi)蒙古扎魯特旗人，獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物檢疫，疫情監(jiān)測(cè)工作。