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澤瀉提取物對綠殼蛋雞生產性能及膽固醇代謝的影響

2017-05-17 06:13:15門文卉李先永林連兵鄧先余
食品與生物技術學報 2017年4期

門文卉, 陳 晗, 李先永, 林連兵, 鄧先余

(昆明理工大學 生命科學與技術學院,云南 昆明 650500)

澤瀉提取物對綠殼蛋雞生產性能及膽固醇代謝的影響

門文卉, 陳 晗, 李先永, 林連兵, 鄧先余*

(昆明理工大學 生命科學與技術學院,云南 昆明 650500)

研究了不同水平澤瀉提取物對綠殼蛋雞生產性能、蛋品質、血清生化指標和蛋黃膽固醇含量的影響。實驗選用190日齡體況良好、產蛋率接近的綠殼蛋雞225羽,隨機分成5組,每組3個重復,每個重復15羽雞。空白對照組不含澤瀉添加物,陽性對照組添加0.58 mg/kg洛伐他汀,給藥組分別添加0.1%、0.3%、0.5%的澤瀉提取物,實驗期42 d。結果表明,與空白對照組相比,質量分數0.5%澤瀉提取物提高產蛋率12.28%;質量分數0.3%澤瀉提取物能顯著降低蛋黃膽固醇質量分數24.2%和甘油三酯質量分數35.5%;質量分數0.3%澤瀉提取物能顯著降低血清膽固醇質量分數51.97%;質量分數0.1%澤瀉添加物組的能顯著提高免疫水平。由此可見,一定劑量的澤瀉提取物能降低雞蛋和血清中膽固醇含量、提高雞蛋品質和雞群免疫水平,最佳添加量為質量分數0.3%。

綠殼蛋雞;澤瀉提取物;生產性能;蛋品質;膽固醇

澤瀉(Alisma orientalis(Sam.)Juzep.)為多年沼生澤瀉科植物澤瀉的干燥塊莖,是中醫臨床常用中藥之一。大量藥理學研究表明,澤瀉具有治療脂肪肝、降血糖、降血壓以及減肥等多種作用[1]。

雞蛋中含有豐富優質的蛋白質和磷脂,也是傳統性食品中膽固醇含量較高的一種食品,專家建議中老年人每日攝入食物類膽固醇少于300mg,膽固醇的過量攝取會誘發高血脂癥、動脈粥樣硬化,進而誘發高血壓、冠心病等一系列心腦血管疾病,而且雞蛋膽固醇與其他食品的膽固醇相比更易導致人體血清膽固醇水平的提高[2],隨著人們對健康生活的追求,低膽固醇雞蛋的開發勢在必行。

近年來,使用化學合成藥物[3]、抗生素和激素來降低動物體內脂類物質的研究較多,但其殘留性及毒副作用逐漸引起人類關注。歐盟等國家已經立法限制抗生素類添加劑的使用。中草藥具有藥物殘留少、毒副作用小等優良特性[4],沒有合成藥物的弊端,作為飼料添加劑已日益廣泛。作者采用有降脂作用的中草藥澤瀉進行蛋雞實驗,以了解澤瀉對蛋雞膽固醇代謝的影響,為生產更優質的雞蛋和雞肉提供技術支持和理論依據。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

洛伐他汀片:山東魯抗醫藥股份有限公司產品;澤瀉提取物:由四川同泰植物化工有限公司提供產品;總膽固醇(CHO酶法)測試盒、甘油三酯試劑盒(酶法)、高密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒:南京建成生物工程研究所產品。

1.2 實驗動物與設計

作者選用190日齡健康、體重和產蛋率相近的綠殼蛋雞225羽。采用隨機分組原則,將其分為5組,具體分組情況見表1。每組3個重復,每個重復15羽。預飼期14 d,各組統一飼喂基礎日糧,預飼期結束時統計各組生產性能,經分析無顯著差異開始進行正式實驗。正式實驗為4周。

表1 實驗分組設計Table 1 Experimetal design

1.3 飼養管理及基礎日糧組成

綠殼蛋雞養殖實驗在昆明理工大學綠色循環農業實驗基地進行。采用3層立體籠飼養,每日喂干粉料2次,每次每羽雞飼喂50 g,自由采食和飲水。保持良好的通風,適宜的溫度和濕度。按照常規免疫程序進行防疫和雞舍消毒。基礎日糧參照《中華人民共和國專業標準》NY/T 33-2004,結合綠殼蛋雞生長情況,自行設計日糧配方,如表2所示。

表2 雞日糧組成及營養水平Table 2 Dietary com position and nutrient levels of greenshell chickens

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生產性能指標檢測 實驗期間每日以組為單位記錄產蛋數和蛋質量,每7 d末統計一周余料質量,統計日均產蛋率、日均采食量和料蛋比等指標進行。

1.4.2 蛋品質檢測 為研究澤瀉提取物對雞蛋品質影響的動態變化規律,實驗期間以組為單位每7天重復取樣一次,所抽樣的雞蛋用分析天平測定蛋質量、蛋黃質量、蛋殼質量,用游標卡尺測定蛋形指數、哈氏單位、蛋殼厚度,用羅氏比色扇測定蛋黃顏色,分析天平測定蛋黃重、蛋殼重等蛋品質指標。

1.4.3 蛋黃膽固醇、甘油三酯濃度的檢測 實驗結束后每個重復隨機抽樣5枚雞蛋,分離蛋黃后攪勻,稱取1.00 g蛋黃液,質量分數0.9%生理鹽水溶解,20mL容量瓶定容待測。采用膽固醇氧化酶法測定膽固醇濃度、酶法測定甘油三酯濃度、高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇濃度。

1.4.4 血清生化指標檢測 實驗結束后禁水禁食24 h,每重復抽樣5羽雞,進行翅靜脈采血3~5 mL,4℃靜置12 h,離心10min(4 000 r/min),抽取上清液待測。利用試劑盒采用膽固醇氧化酶法測定血清中膽固醇濃度、酶法測定甘油三酯濃度、直接法測定高密度脂蛋白膽固醇濃度、低密度脂蛋白膽固醇濃度,根據Friedewald公式,極低密度脂蛋白濃度=甘油三脂含量/F,其中甘油三酯濃度單位為mmol/ L,F=2.2,計算出極低密度脂蛋白的濃度。

1.4.5 免疫指數的測定 實驗結束后禁水禁食24 h每重復隨機抽取3羽雞進行屠宰實驗,摘取雞胸腺、脾臟和法氏囊,濾紙吸取表面血液,并剝離表面脂肪和結締組織,然后稱質量。

1.5 數據統計與處理

實驗數據采用 spss19.0軟件 ONE-WAY ANOVA進行方差分析,采用Duncan’s法進行性均值的多重比較,結果以“平均值±標準差”表示,以P<0.05作為顯著性差異判斷標準。

2 結果

2.1 生產性能

不同濃度澤瀉提取物對日均產蛋率影響見圖1,高濃度組日均產蛋率為65.71%,空白對照組日均產蛋率為53.43%,上升了12.28%,兩組有顯著性差異(P<0.05),而中濃度、低濃度組的日均產蛋率分別為52.86%、51.43%,與空白對照組相比,略有下降,無顯著性差異(P>0.05),這說明高劑量的澤瀉飼料添加物可顯著提高綠殼蛋雞的產蛋量。不同濃度澤瀉提取物對日均采食量影響見圖2,空白對照組日均采食量為89.45%,高濃度、中濃度、低濃度日均采食量分別為76.57%、81.61%、77.69%,與空白對照組相比有降低蛋雞日均采食量的趨勢,組間差異不明顯(P>0.05)。不同質量分數澤瀉提取物對料蛋比影響見圖3,各給藥濃度組料蛋比分別為2.15%、2.16%、2.15%,空白對照組為2.14%組間差異不明顯(P>0.05)。

圖1 澤瀉提取物對日均產蛋率影響Fig.1 Effects of Alisma extracts on daily egg-laying rate

圖2 澤瀉提取物對日均采食量影響Fig.2 Effects of A lisma extracts on feed intake

圖3 澤瀉提取物對料蛋質量比的影響Fig.3 Effects of Alisma extracts on feed-egg ratio

2.2 蛋品質檢測

由表3所知,日糧中添加澤瀉提取物對雞蛋蛋質量、蛋形指數、蛋殼厚度、蛋殼相對重沒有顯著性影響 (P>0.05)。各給藥組哈夫單位分別為88.72、88.48、88.56,與空白對照組和陽性對照組相比有顯著性差異(P<0.05),但組間差異不顯著(P>0.05);蛋黃相對重組間差異顯著(P<0.05),中濃度組比空白對照組增加17%。蛋黃顏色組間差異顯著(P<0.05),高濃度組比空白對照組顏色上升2個色度。

2.3 蛋黃膽固醇、甘油三酯濃度的檢測

分別測定實驗前與實驗后各組蛋黃的膽固醇和甘油三酯濃度。由表4可知實驗結束后中濃度組和空白對照組蛋黃膽固醇分別為2.19mmol/L、2.89 mmol/L,降低了24.2%,具有顯著性差異(P<0.05);中濃度組和空白對照組蛋黃甘油三酯濃度分別為9.22 mmol/L、14.29 mmol/L,降低了35.5%,具有顯著性差異(P<0.05)。圖4和圖5為實驗前后組內膽固醇、甘油三酯濃度對比。由圖4可知高中低濃度3組蛋黃膽固醇分別下降21.2%,24.48%,23.47%,中濃度澤瀉添加物對降低蛋黃膽固醇效果最佳。與空白對照組相比,陽性對照組膽固醇濃度下降25.44%,效果優于澤瀉給藥組。由圖5可知,高中低濃度組蛋黃甘油三酯濃度分別下降了 16.38%、34.05%、15.63%,陽性對照組下降了35.33%,中濃度組效果最好。

表3 澤瀉提取物對蛋品質的影響Table 3 Effects of Alisma extracts on egg quality

圖4 澤瀉提取物對蛋黃膽固醇濃度的影響Fig.4 Effects of A lisma extracts on egg yolk cholesterol concentration

圖5 澤瀉提取物對蛋黃甘油三酯濃度的影響Fig.5 Effects of Alisma extracts on the concentration of egg yolk triglyceride

2.4 血清生化指標檢測

由表4可知,中濃度組及陽性對照組分別與空白對照組相比血清膽固醇分別降低 51.97%和68.4%,具有顯著性差異(P<0.05);中濃度組及陽性對照組分別與空白對照組相比甘油三酯濃度分別下降12.98 mmol/L、10.73 mmol/L具有顯著性差異(P<0.05);低密度脂蛋白是一種運載膽固醇進入外周組織細胞的脂蛋白顆粒,給藥組與空白對照組和陽性對照組相比,低密度脂蛋白膽固醇濃度具有顯著性差異(P<0.05),隨著給藥濃度增大,含量隨之下降,高濃度組和陽性對照組分別與空白對照組相比低密度脂蛋白膽固醇濃度分別升高了 50.0%和58.82%;高密度脂蛋白將各組織的膽固醇送回肝臟代謝,促進膽固醇代謝,給藥組與空白對照組相比,高密度脂蛋白膽固醇含量均有所升高,高濃度組與空白對照組相比含量升高了72.2%,具有顯著性差異(P<0.05);給藥組與空白組相比載脂蛋白A和載脂蛋白B均有升高趨勢,不同濃度給藥組組間差異不顯著(P>0.05)。

2.5 免疫指數的檢測

免疫器官指數是從免疫器官質量方面反應生物制劑在仔雞上的應用效果。由表5可知,澤瀉提取物的添加使仔雞的各種免疫器官指數均有增加。胸腺指數和脾臟指數情況相同,只有低濃度組和空白組有顯著差異(P<0.05),除低濃度組之外其余各組之間均無顯著差異(P>0.05)。分析法氏囊指數,給藥組分別為2.43、2.61、2.79和陽性對照組(2.55)均與空白對照組(2.12)相比有顯著差異(P<0.05)。

表4 實驗后澤瀉提取物對蛋黃脂質濃度的影響Table 4 Effect of Alisma extracts on egg yolk lipid content after experiment

表5 澤瀉提取物對血清生化指標的影響Table 5 Effects of Alisma extracts on serum biochem ical indexes

表6 澤瀉提取物對免疫器官指數的影響Table 6 Effects of A lisma extracts on immune organ indexes in chickens

3 討論

3.1 澤瀉提取物對綠殼蛋雞生長性能的影響

澤瀉提取物對綠殼蛋雞生產性能尚無相關報道,但是有大量研究表明中草藥添加劑能優化蛋雞的生產性能。朱寧等[5]報道以黃芪、山楂、麥芽、黨參等12味中藥組成的質量分數1%復方添加劑能提高仔雞的平均體濃度、平均日增濃度提高6.3%。Ma. DY等[6]報道日糧中添加質量分數1%女貞子和五味子提取物可以提高熱應激期間產蛋率,免疫功能,和母雞的抗氧化狀態。質量分數0.5%的添加劑量能顯著提高綠殼蛋雞的產蛋率,料蛋比,降低日均采食量。其原因一方面可能是在澤瀉作用下雞腸道內有害微生物得到抑制,改善了腸腔環境,有利于日糧的消化吸收。另一方面澤瀉可以提高雞的免疫能力,雞處于健康的生理狀態,營養物質利用率高,采食量下降,料蛋質量比上升。

3.2 澤瀉提取物對綠殼蛋雞蛋品質的影響

實驗各組平均蛋重51 g,平均蛋形指數1.204,大小形狀適宜。蛋重過重造成胚胎感溫較差過輕則營養不良,均會導致孵化率下降。適當的蛋形指數有利于減少雞蛋的破碎和開裂,利于雞蛋的運輸和包裝。同時蛋形指數與孵化率也有關系,標準的蛋形指數為1.3~1.5,通過不同的飼料添加劑能在一定程度上改善蛋品質。Yilmaz[7]等報道320只64周齡羅曼蛋雞,分別飼喂礦物氨基酸螯合物12周。實驗結束時,不同濃度組與空白對照組相比,飼料攝入量、飼料轉化率之間沒有統計學差異,破損蛋比、死亡率、蛋質量、蛋白質量、殼質量、蛋黃指數、蛋黃比、蛋白率、與外殼比有顯著性格差異。各實驗組蛋形指數略低于正常雞蛋,與正常雞蛋相比近似球形。但雞蛋蛋殼較厚,相對于其他雞蛋,依然有利于貯藏和運輸。雞蛋的維生素及礦物質基本集中在蛋黃中,蛋黃所占比重越大,雞蛋營養越豐富,口感越好。中濃度組澤瀉能顯著提高蛋黃比重,提高蛋品質。蛋黃顏色來源于類胡蘿卜素等物質,此類物質雞體內無法自行合成,受飼料影響較大,Cayan[8]報道22周齡母雞飼喂橄欖葉粉,蛋黃的膽固醇含量呈下降趨勢約10%(P>0.05),蛋黃顏色加深,可作為蛋黃著色劑。實驗證明高濃度的澤瀉提取物能明顯提高蛋黃顏色,此類雞蛋有著更好的市場前景。哈氏單位反應雞蛋的新鮮度和蛋清粘稠度,農業部NY/T 1758-2009《鮮蛋等級規格》指出哈氏單位的檢測按照NY/T823執行,并且對鮮雞蛋進行哈氏單位分級,實驗雞蛋均屬于特級蛋品。

3.3 澤瀉提取物對綠殼蛋雞蛋黃膽固醇和甘油三酯含量的影響

雞蛋中的膽固醇大部分來自于母雞肝臟合成的蛋黃前體。肝臟快速合成膽固醇后將膽固醇以脂蛋白形式轉運到血液,血液膽固醇大部分隨脂蛋白轉入蛋黃,少部分隨糞便排出[9]。澤瀉中的三萜類成分具有降低血液中膽固醇和甘油三酯的作用,進而可以降低蛋黃膽固醇和甘油三酯濃度。Hansen.Hannah等[10]報道生育三烯酚本身具有降低膽固醇的作用,飼喂7周可以改善飼料營養轉移到蛋黃中的效率,同時降低蛋黃膽固醇。實驗證明質量分數0.3%的澤瀉提取物添加在日糧中即有明顯降低蛋黃膽固醇和甘油三酯的功效。

3.4 澤瀉提取物對綠殼蛋雞血清生化指標的影響

陽性對照組藥物采用洛伐他汀,其結構與羥甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMG-COA還原酶)相似,而肝細胞內TC也是由HMG-COA還原酶催化完成,他汀類藥物與HMG-COA還原酶產生競爭性抑制,從而顯著降低動物體內的膽固醇及甘油三酯濃度,升高高密度脂蛋白膽固醇濃度,但是對載脂蛋白A和載脂蛋白B含量無顯著性影響。其藥效要優于澤瀉添加劑組,但化學藥物的殘留性不符合綠色食品的生產與開發,不利于現實生產,可作為藥效對照指標。

高密度脂蛋白為血清蛋白之一,可輸出膽固醇促進膽固醇的代謝,所以現在作為動脈硬化預防因子而受到重視,而低密度脂蛋白被稱為“壞的膽固醇”。李淑子等研究[11]報道澤瀉多糖、澤瀉水提物及醇提物三種提取物均能顯著降低高脂血癥模型小鼠血清中膽固醇和甘油三酯,升高高密度脂蛋白膽固醇,并能改善小鼠的動脈硬化指數值。胡雪峰等人[12]研究表明:澤瀉湯對高脂血癥大鼠可以顯著性降低總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇,顯著升高高密度脂蛋白,澤瀉湯具有降血脂的作用。實驗結果表明澤瀉提取物添加劑的使用能降低低密度脂蛋白膽固醇含量、升高血清中高密度脂蛋白膽固醇含量,有利于雞體內膽固醇代謝。

澤瀉降膽固醇的主要活性成分為澤瀉醇和三萜類化合物,Fu Minzhe等人[13]報道應用中草藥添加劑“蛋必增”能激活肝臟羥化酶活力,降低產蛋雞血清中膽固醇含量。實驗結果表明澤瀉提取物添加劑的使用能降低雞血清膽固醇、甘油三酯濃度,與文獻報道一致。這是由于澤瀉提取物的有效成分抑制外源性膽固醇的吸收和干擾內源性膽固醇代謝有關,而非抑制膽固醇的合成[14]。

3.5 澤瀉提取物對免疫器官和免疫水平的影響

胸腺為細胞免疫器官,脾臟為外周免疫器官,法氏囊是體液免疫器官。免疫器官指數能直觀反映綠殼蛋雞的免疫水平。有大量研究表明中草藥能在一定程度上提高機體免疫水平。Jiang.Wu等[15]報道貫葉連翹提取物可以提高小雞體內抗體而調節免疫水平,達到治療禽流感的目的。實驗結果表明:和空白對照組相比低濃度組能夠顯著提高胸腺指數和脾臟指數,澤瀉添加物即可顯著增加胸腺和脾臟的重量。蛋雞約2月齡時法氏囊最發達,以后隨著性器官發育日漸成熟而逐步萎縮,大量試驗顯示,雞體內的免疫細胞B細胞主要來源于法氏囊。各試驗組的法氏囊指數均顯著高于空白對照組,這表明澤瀉提取物能提高法氏囊指數。其原因可能是澤瀉提取物能促進免疫器官的良好生長發育,并且延緩了免疫器官的萎縮,可以直接加強機體的體液免疫功能和器官免疫功能。

4 結語

取物可以起到提高蛋雞的生產性能,提高雞蛋品質、降低雞蛋膽固醇和甘油三酯濃度、降低血清中膽固醇水平以及提高雞群免疫水平的作用,是良好的飼料添加劑。

我國家禽市場規模大,范圍廣,中藥澤瀉易得價低,作為飼料添加劑可以顯著提高雞群養殖效益。低膽固醇保健雞蛋的研發能顯著增加雞蛋的附加值,符合人們對綠色健康食品的追求

在綠殼蛋雞日糧中添加質量分數0.3%澤瀉提

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Effect of Alisma Extract on Production Performance and Cholesterol M etabolism of Green-Eggshell Chickens

MENWenhui, CHEN Han, LIXianyong, LIN Lianbing, DENG Xianyu*
(College of Life Science and Technology,Kunming University of Science and Technology,Kunming 650500,
China)

The effects of Alisma orientalis extracts w ith different concentration on the production performance,egg quality,serum lipid indexes and yolk cholesterol content of green-eggshell chickens.Five groups of 190-day-old green-shell chickensw ith a similar laying ratewere random ly assigned from 225 chickens.In each group,there were 3 replicates w ith 15 laying chickens per replicate.The blank control group was fed w ithout the extracts of Alisma orientalis,while the positive control was fed w ith 0.58 mg/kg Lovastatin.The experimental group had 0.1%,0.3%and 0.5%extracts of Alisma orientalis,respectively,for 42 days.The egg production ratewas increased by 12.28%w ith 0.5%extractsof Alisma orientalis compared w ith the blank controlgroup.The egg yolk cholesterolwas significantly reduced by 24.2%using 0.3%extracts,while 35.5%decrease fortriglyceride levels and 51.97%decrease for serum cholesterol.The immune index was greatly improved by 0.1%extracts.A certain dose of Alisma orientalis extracts could thus reduce the cholesterol level of egg and serums,to improve the quality of eggs and chickens immunity.The optimaldosagewas recommended as0.3%.

green-eggshell chickens,extracts of Alisma orientalis,production performance,egg quality,cholesterol

S 831.5

A

1673—1689(2017)04—0376—07

2015-05-21

國家自然科學基金項目(20110024);國家自然科學基金項目應急管理項目(31640079);云南省科技創新強省計劃資助項目(2014AB015)。

*通信作者:鄧先余(1972—),男,湖南懷化人,理學博士,副教授,主要從事綠色循環農業研究。E-mail:dengxy1008@126.com

門文卉,陳晗,李先永,等.澤瀉提取物對綠殼蛋雞生產性能及膽固醇代謝的影響[J].食品與生物技術學報,2017,36(04):376-382.

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