頂空氣相色譜法同時測定布南色林原料藥中9種有機溶劑的殘留量

裴麗娟，田 晨，齊然然，張 卓，王 業（河北醫科大學第一醫院藥劑科，石家莊 050031）

頂空氣相色譜法同時測定布南色林原料藥中9種有機溶劑的殘留量

裴麗娟＊，田 晨，齊然然，張 卓，王 業#（河北醫科大學第一醫院藥劑科，石家莊 050031）

目的：建立同時測定布南色林原料藥中甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯9種有機溶劑殘留量的方法。方法：采用頂空氣相色譜法。色譜柱為DB-624毛細管柱，程序升溫，進樣口溫度為150 ，檢測器為氫火焰離子化檢測器，溫度為250 ，載氣為高純氮氣，載氣流速為2.8 mL/min，分流比為1∶1，頂空進樣量為1 mL，頂空加熱溫度為90 ，平衡時間為35 min。結果：甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯檢測質量濃度線性范圍分別為6～1 500μg/mL（r＝0.999 8）、10～2 500μg/mL（r＝0.999 9）、10～2 500μg/mL（r＝0.999 8）、0.82～205μg/mL（r＝0.999 4）、1.2～300μg/mL（r＝0.999 5）、0.58～145μg/mL（r＝0.999 4）、10～2 500μg/mL（r＝0.999 9）、1.44～360μg/mL（r＝0.999 6）、1.78～445μg/mL（r＝0.999 5）；定量限分別為17.71、6.02、3.17、7.45、1.53、0.69、0.93、1.01、0.22 μg/mL，檢測限分別為5.89、1.90、1.05、2.48、0.51、0.23、0.31、0.33、0.07 μg/mL；精密度、穩定性試驗的RSD＜3.0%，重復性試驗中只檢出異丙醇，RSD＝2.1%；加樣回收率分別為96.67%～102.66%（RSD＝1.9%，n＝9）、96.00%～101.83%（RSD＝1.9%，n＝9）、97.17%～101.50%（RSD＝1.4%，n＝9）、96.97%～102.44%（RSD＝2.2%，n＝9）、95.83%～103.33%（RSD＝2.5%，n＝9）、95.83%～100.28%（RSD＝1.9%，n＝9）、98.17%～101.25%（RSD＝1.0%，n＝9）、96.55%～102.30%（RSD＝1.9%，n＝9）、96.30%～102.22%（RSD＝1.8%，n＝9）。結論：該方法操作簡單、快速，結果準確，可用于布南色林原料藥中甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯9種有機溶劑殘留量的同時測定。

布南色林；頂空氣相色譜法；殘留量；甲醇；乙醇；異丙醇；乙腈；二氯甲烷；正己烷；乙酸乙酯；四氫呋喃；甲苯

布南色林（Blonanserin）通用名為2-（4-乙基-1-哌嗪基）-4-（4-氟苯基）-5，6，7，8，9，10-六氫環辛烷并吡啶，是高選擇性5-羥色胺2受體與多巴胺2受體拮抗藥，臨床常用于非典型抗精神病的治療，對于改善精神分裂癥的療效良好，且尚未發現抗精神病藥常見的椎體外系反應，有望成為治療精神分裂癥的一線藥物[1-3]。布南色林原料藥在合成過程中，使用了甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯等有機溶劑，這些有機溶劑對人體健康可產生一定危害。鑒于目前尚未有同時測定布南色林原料藥中上述9種有機溶劑殘留量的報道，筆者采用頂空氣相色譜法建立了同時測定布南色林原料藥中甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯殘留量的方法，以期為該制劑的質量控制提供參考。

1 材料

1.1 儀器

6890型氣相色譜儀，包括氫火焰離子化檢測器、7694E頂空進樣器（美國Agilent公司）；BP 211D型十萬分之一電子天平（德國Sartorius公司）；Milli-Q AdvantageA10型超純水儀（美國Millipore公司）。

1.2 藥品與試劑

布南色林原料藥（石家莊巖峰醫藥科技有限公司，批號：110111、110112、110113）；甲醇對照品（批號：20140202）、乙醇對照品（批號：20130920）、異丙醇對照品（批號：20140125）、乙腈對照品（批號：20140116）、二氯甲烷對照品（批號：20131126）、正己烷對照品（批號：20121221）、乙酸乙酯對照品（批號：20140105）、四氫呋喃對照品（批號：20140108）、甲苯對照品（批號：20131022）均購自國藥化學試劑集團有限公司，純度均＞98%；N，N-二甲基甲酰胺（DMF）為色譜純，其余試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：DB-624毛細管柱（30 m×0.32 μm，1.80 μm）；程序升溫：初始溫度72 ，保持11 min，25 /min升溫至150 ，保持5 min；進樣口溫度：150 ；檢測器：氫火焰離子化檢測器；溫度：250 ；載氣：高純氮氣；載氣流速：2.8 mL/min；分流比：1∶1；頂空進樣量：1 mL；頂空加熱溫度：90 ；平衡時間：35 min。

2.2 溶液的制備

2.2.1 混合對照品溶液 精密稱取甲醇對照品300 mg、乙醇對照品500 mg、正己烷對照品29 mg、異丙醇對照品500 mg、乙腈對照品41 mg、二氯甲烷對照品60 mg、乙酸乙酯對照品500 mg、四氫呋喃對照品72 mg、甲苯對照品89 mg，置于同一100 mL量瓶中，加50%DMF溶液50 mL溶解，再加水定容，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液 精密稱取樣品約0.5 g，置于20 mL頂空瓶中，精密加入50%DMF溶液5 mL，密封，振搖溶解，即得。

2.2.3 空白對照溶液 取50%DMF溶液50 mL，置于100 mL量瓶中，加水定容，搖勻，即得。

2.3 系統適用性試驗

精密量取“2.2”項下混合對照品溶液、供試品溶液和空白對照溶液各適量，按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄色譜，詳見圖1。由圖1可知，在該色譜條件下，各成分均能達到基線分離，分離度＞1.5；理論板數以甲醇峰計為5 000，保留時間為7.58 min。結果表明，其他成分對測定無干擾。

圖1 氣相色譜圖Fig 1 Gas chromatograms

2.4 線性關系考察

分別精密量取“2.2.1”項下混合對照品溶液5 mL，各置于5、10、25、35、50 mL量瓶中，加50%DMF溶液溶解并定容，作為系列混合對照品溶液。取上述系列混合對照品溶液各適量，按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。以待測有機溶劑質量濃度（x，μg/mL）為橫坐標、峰面積（y）為縱坐標進行線性回歸，得甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯回歸方程分別為y＝1.012x－0.29（r＝0.999 8）、y＝2.069x+0.06（r＝0.999 9）、y＝3.671x+2.19（r＝0.999 8）、y＝2.507x－0.24（r＝0.999 4）、y＝12.13x－1.46（r＝0.999 5）、y＝2.182x－0.17（r＝0.999 4）、y＝12.892x+3.33 （r＝0.999 9）、y＝12.493x+0.98（r＝0.999 6）、y＝9.174x+ 0.07（r＝0.999 5）。結果表明，各待測有機溶劑檢測質量濃度線性范圍分別為6～1 500、10～2 500、10～2 500、0.82～205、1.2～300、0.58～145、10～2 500、1.44～360、1.78～445 μg/mL。

2.5 定量限與檢測限考察

取“2.2.1”項下混合對照品溶液適量，倍比稀釋，按“2.1”項下色譜條件連續進樣測定6次，記錄峰面積。當信噪比為10∶1時，得定量限（LOQ）；當信噪比為3∶1時，得檢測限（LOD）。結果，甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯的LOQ分別為17.71、6.02、3.17、7.45、1.53、0.69、0.93、1.01、0.22 μg/mL；LOD分別為5.89、1.90、1.05、2.48、0.51、0.23、0.31、0.33、0.07 μg/mL。2.6 精密度試驗

精密量取“2.2.1”項下混合對照品溶液5 mL，按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。結果，甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯峰面積的RSD分別為1.6%、1.8%、2.1%、1.9%、1.8%、1.9%、1.5%、1.7%、2.0%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.7 穩定性試驗

取“2.2.1”項下混合對照品溶液適量，分別于室溫下放置0、2、4、6、12 h時按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。結果，甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯峰面積的RSD分別為1.8%、1.5%、1.1%、1.7%、2.4%、1.1%、2.3%、2.5%、2.0%（n＝5），表明混合對照品溶液在室溫放置12 h內穩定性良好。

2.8 重復性試驗

精密稱取樣品（批號：110111）0.5 g，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積。結果，異丙醇峰面積的RSD＝2.1% （n＝6），其他成分未檢出，表明本方法重復性良好。

2.9 加樣回收率試驗

精密稱取樣品（批號：110111）0.5 g，分別置于20 mL頂空瓶中，共9份，分別加入一定質量的9種待測有機溶劑對照品，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算加樣回收率，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果（n＝9）Tab 1 Results of recovery tests（n＝9）

續表1Continued tab 1

2.10 樣品有機溶劑殘留量測定

取3批樣品（批號：110111、110112、110113）各適量，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算各有機溶劑殘留量。結果，3批樣品中均只檢出異丙醇，殘留量均為0.01% （n＝3）。

3 討論

3.1 色譜柱的選擇

筆者先后考察了HP-1、HP-5、HP-FFAP、DB-624等不同極性的色譜柱[3-5]。由于DB-624毛細管柱是中等極性毛細管柱，適用于碳氫化合物、多核芳烴、酯、酚及醇等的測定。前期預試驗結果顯示，各待測有機溶劑在DB-624毛細管柱上的分離度最好，故最終選擇DB-624毛細管柱為本試驗的色譜柱。

3.2 進樣方法的選擇

由于本研究中需測定的各有機溶劑皆為揮發性，采用頂空進樣法可以通過控制頂空瓶的溫度使各待測有機溶劑充分氣化，省去了樣品萃取、濃集等步驟，且可有效避免樣品和水對進樣口及色譜柱的污染，同時也減小了樣品主成分對分離測定的干擾。

3.3 測定結果

人用藥物注冊技術要求國際協調會（ICH）[6]和2015年版《中國藥典》（三部）[7]都規定，乙醇、異丙醇和乙酸乙酯均屬第三類殘留溶劑，限度均為0.5%；甲醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、四氫呋喃和甲苯均屬于第二類殘留溶解，限度分別為0.3%、0.041%、0.06%、0.029%、0.072%、0.089%。本試驗測得3批樣品中異丙醇的殘留量均為0.01%，其他有機溶劑均未檢出，符合ICH和《中國藥典》的規定。

綜上所述，本方法操作簡單、快速，結果準確，可用于布南色林原料藥中甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃和甲苯9種有機溶劑殘留量的同時測定。

[1] 邱暢，胡晉卿，溫預關，等.進食對健康受試者口服布南色林片藥動學特征的影響[J].中國臨床藥學雜志，2013，22 （4）：212-215.

[2] 宋文華，孫婷，高敏苓，等.毛細管氣相色譜法測定新藥UP0044中有機溶劑的殘留量[J].天津師范大學學報（自然科學版），2008，28（1）：28-32.

[3] 劉彩霞，王長斌，楊海霞，等.頂空氣相色譜法測定布南色林殘留溶劑的含量[J].食品與藥品，2013，15（4）：262-264.

[4] 謝燕萍，吳杏梅.布南色林分散片的處方研究[J].中國藥房，2011，22（13）：1193-1196.

[5] 宋更申，曹鳳習，閆凱，等.頂空毛細管氣相色譜法測定鹽酸地芬尼多原料藥中有機溶劑的殘留量[J].中國藥房，2010，21（41）：3914-3915.

[6] 美國ICH指導委員會.藥品注冊的國際技術要求：質量部分[M].周海鈞，譯.北京：人民衛生出版社，2001：343.

[7] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：三部[S].2015年版.北京：中國醫藥科技出版社，2015：463-467.

（編輯：劉 柳）

Determination of 9 Residual Organic Solvents in Blonanserin by Headspace Gas Chromatography

PEI Lijuan，TIAN Chen，QI Ranran，ZHANG Zhuo，WANG Ye（Dept.of Pharmacy，The First Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuang 050031，China）

OBJECTIVE：To establish a method for the determination of 9 residual organic solvents in blonanserin as methanol，alcohol，isopropyl alcohol，acetonitrile，dichloromethane，hexane，ethyl acetate，tetrahydrofuran and methylbenzene.METHODS：Headspace gas chromatography was adopted.The determination was performed on DB-624 capillary column using temperature programming.The inlet temperature was 150 ，and flame ionization detector was used with temperature of 250 .High purity nitrogen was used as carrier gas with flow rate of 2.8 mL/min.The split ratio was 1∶1，and headspace sample size was 1 mL.Headspace heating temperature was 90 ，and equilibration time was 35 min.RESULTS：The linear ranges of methanol，alcohol，isopropyl alcohol，acetonitrile，dichloromethane，hexane，ethyl acetate，tetrahydrofuran and methylbenzene were 6-1 500μg/mL（r＝0.999 8），10-2 500μg/mL（r＝0.999 9），10-2 500μg/mL（r＝0.999 8），0.82-205μg/mL（r＝0.999 4），1.2-300μg/mL（r＝0.999 5），0.58-145μg/mL（r＝0.999 4），10-2 500μg/mL（r＝0.999 9），1.44-360μg/mL（r＝0.999 6），1.78-445μg/mL（r＝0.999 5），respectively.The limits of quantitation were 17.71，6.02，3.17，7.45，1.53，0.69，0.93，1.01，0.22 μg/mL；the limits of detection were 5.89，1.90，1.05，2.48，0.51，0.23，0.31，0.33，0.07 μg/mL，respectively.RSDs of precision and stability tests were all lower than 3.0%，and isopropanol was found in repeatability test（RSD＝2.1%）.The average recoveries ranged 96.67%-102.66% （RSD＝1.9%，n＝9），96.00%-101.83%（RSD＝1.9%，n＝9），97.17%-101.50%（RSD＝1.4%，n＝9），96.97%-102.44%（RSD＝2.2%，n＝9），95.83%-103.33%（RSD＝2.5%，n＝9），95.83%-100.28%（RSD＝1.9%，n＝9），98.17%-101.25%（RSD＝1.0%，n＝9），96.55%-102.30%（RSD＝1.9%，n＝9），96.30%-102.22%（RSD＝1.8%，n＝9），respectively.CONCLUSIONS：The method is simple，rapid，accurate and suitable for simultaneous determination of 9 residual organic solvents in blonanserin as methanol，alcohol，isopropyl alcohol，acetonitrile，dichloromethane，hexane，ethyl acetate，tetrahydrofuran and methylbenzene.

Blonanserin；Headspace gas chromatography；Residual organic；Methanol；Alcohol；Isopropyl alcohol；Acetonitrile；Dichloromethane；Hexane；Ethyl acetate；Tetrahydrofuran；Methylbenzene

R927.2

A

1001-0408（2017）12-1699-04

2016-05-03

2017-01-11）

＊主管藥師，碩士。研究方向：藥物分析。電話：0311-85917356。E-mail：peilijuan2015@163.com

#通信作者：主管藥師。研究方向：藥物制劑與分析。電話：0311-85917355。E-mail：14790500@qq.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.12.32