地加瑞克三個(gè)原料中間體的合成工藝研究

韓健，谷守娜

（天津紅日藥業(yè)股份有限公司，天津301700）

地加瑞克三個(gè)原料中間體的合成工藝研究

韓健，谷守娜

（天津紅日藥業(yè)股份有限公司，天津301700）

Degarelix（地加瑞克）是一種新型前列腺癌治療藥物。設(shè)計(jì)并合成了地加瑞克的三個(gè)中間體氨基酸Fmoc-Lys（iPr，Boc）-OH，F(xiàn)moc-D-4Aph（Cbm）-OH，F(xiàn)moc-L-4Aph（Trt）-OH，可為地加瑞克和其它多肽的合成提供重要的中間體原料。

地加瑞克；中間體；合成

0 前言

Degarelix（地加瑞克）是由Ferring（輝凌）公司研制開發(fā)的一種新的治療晚期前列腺癌的藥物，該藥于2008年12月24日被美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市，商品名為Firmagon。其化學(xué)名為D-丙氨酰胺，N-乙酰基-3-（2-萘）-D-內(nèi)氨酰-4-氯-D-苯丙氨酰基-3-（3-吡啶）-D-內(nèi)氨酰-L-絲氨酰-4-[[[（4S）-六氫-2，6-雙氧-4-嘧啶]羰基]氨基]-L-苯丙氨酰基-4-[（氨基羰基）氨基]-D-苯丙氨酰基-L-亮氨酰基-N6-（1-甲基乙基）-L-賴氨酰-L-脯氨酰（基），分子式：C82H103N18O16Cl，相對(duì)分子質(zhì)量：1632.3[1-2]，結(jié)構(gòu)式見圖1：

圖1 Degarelix的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Chemicalstructure ofDegarelix

Degarelix（地加瑞克）通過抑制睪丸激素來延緩前列腺癌病程發(fā)展，屬于促性腺激素釋放激素GnRH受體抑制劑類藥物。前列腺癌近年的發(fā)病率日益增加，已成為病死率位居前列的男性腫瘤，因此，Degarelix（地加瑞克）有廣闊的市場(chǎng)前景[3-4]。

Degarelix（地加瑞克）是一種含有7個(gè)非天然氨基酸的線性十肽，肽序列為：Ac-D-2Nal-D-Phe（4-Cl）-D-3Pal-Ser-4Aph（L-Hor）-D-4Aph（Cbm）-Leu-Ilys-Pro-DAla-NH2。目前能夠提供這些非天然氨基酸的公司很少，且價(jià)格昂貴，文獻(xiàn)中也沒有相關(guān)的合成工藝的報(bào)道。因此，課題組設(shè)計(jì)了地加瑞克三個(gè)中間體氨基酸Fmoc-Lys（iPr，Boc）-OH，F(xiàn)moc-D-4Aph（Cbm）-OH，F(xiàn)moc-L-4Aph（Trt）-OH的合成方法，選擇相對(duì)廉價(jià)的原料和安全的合成路線，使其能夠?qū)崿F(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，可為地加瑞克和其他多肽合成提供重要的中間體原料。

1 原料與試劑

芴甲氧羰基-L-賴氨酸鹽酸鹽（Fmoc-Lys-OH·HCl）、N-芴甲氧羰基-4-氨基-D-苯丙氨酸（Fmoc-D-Phe（4-NH2）-OH）、N-芴甲氧羰基-4-氨基-L-苯丙氨酸（Fmoc-Phe（4-NH2）-OH）、三甲基硅基異氰酸酯，均購(gòu)自上海凌凱醫(yī)藥科技有限公司；三乙酰氧基硼氫化鈉、二叔丁基二碳酸酯、三苯甲基氯甲烷，均購(gòu)自上海廣贊化工科技有限公司；其它試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

2 合成

2.1 Fmoc-Lys（iPr，Boc）-OH的合成

向5 L反應(yīng)釜中加入Fmoc-Lys-OH·HCl（1.00 kg，2.47 mol，1.0 eq）、丙酮（1 L）、甲醇（1.5 L），攪拌溶解；反應(yīng)液溫度降至0℃～5℃。向反應(yīng)釜中分批次緩慢加三乙酰氧基硼氫化鈉（1.10 kg，5.19 mol，2.1 eq），保持反應(yīng)液溫度0℃～5℃。滴加完畢升至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2 h。反應(yīng)完畢，40℃減壓濃縮至干，得到黃色油狀物中間體Fmoc-Lys（iPr）-OH。

向10 L反應(yīng)釜中加入中間體Fmoc-Lys（iPr）-OH和飽和Na2CO3水溶液約（5 L），降溫至0℃～5℃，滴加二叔丁基二碳酸酯（0.81 kg，3.7 mol，1.5 eq）和四氫呋喃（3 L）溶液，滴加完畢后，反應(yīng)液升至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)12 h，保持pH值8～9。反應(yīng)完全后，水層再分別用乙酸乙酯（1 L）提取3次，合并有機(jī)相，有機(jī)層分別用10%檸檬酸（4 L）洗2次、10%NaHCO3（4 L）洗2次、飽和NaCl（4 L）洗2次，有機(jī)層再用無水硫酸鈉干燥1 h。過濾，濾液減壓濃縮至干，得黃色油狀物粗品Fmoc-Lys（iPr，Boc）-OH。

粗品加入乙酸乙酯（500 mL）溶解，攪拌下滴加到-10℃石油醚（5 L）中，得凝固狀產(chǎn)物，滴完后將上層石油醚除去；固體再加入乙酸乙酯（500 mL）溶解，攪拌下滴加到-10℃石油醚（5 L）中，得凝固狀產(chǎn)物，滴完后將上層石油醚除去。固體在真空下減壓抽干，得到類白色粉末產(chǎn)物1.01 kg，兩步收率80.1%。反應(yīng)式見圖2。

圖2 Fmoc-Lys（iPr，Boc）-OH的反應(yīng)式Fig.2 reaction equation ofFmoc-Lys（iPr，Boc）-OH

2.2 Fmoc-D-4Aph（Cbm）-OH的合成

向5 L反應(yīng)釜中加入Fmoc-D-Phe（4-NH2）-OH（1.00 kg，2.485 mol，1.0 eq）、DMF（3 L），攪拌溶解，反應(yīng)液溫度降至0℃～5℃，緩慢滴加冰醋酸（500 mL）。再向反應(yīng)釜中滴加三甲基硅基異氰酸酯（572 mL，4.227 mol，1.7 eq），保持反應(yīng)液溫度0℃～5℃，滴加完畢升至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)5 h。反應(yīng)完畢，反應(yīng)液緩慢滴加入裝有純化水（100 L）的反應(yīng)釜中，過濾，并用純化水（10 L）淋洗3次，濾餅在40℃下減壓干燥至恒重。將干燥的固體研成粉末后用乙酸乙酯（50 L）打漿8 h，過濾，并用乙酸乙酯（3 L）淋洗3次，濾餅在40℃下鼓風(fēng)干燥至恒重，得到類白色固體產(chǎn)物0.95 kg，收率85.8%。反應(yīng)式見圖3：

圖3 Fmoc-D-4Aph（Cbm）-OH的反應(yīng)式Fig.3 reaction equation of Fmoc-D-4Aph（Cbm）-OH

2.3 Fmoc-L-4Aph（Trt）-OH的合成

向10 L反應(yīng)釜中加入Fmoc-Phe（4-NH2）-OH（1.00 kg，2.485 mol，1.0 eq）、三苯甲基氯甲烷（0.762 kg，2.730 mol，1.1 eq）、DMF（3 L）攪拌溶解，反應(yīng)液溫度降至0℃～5℃，向反應(yīng)釜中滴加吡啶（400 mL，4.960 mol，2.0 eq），保持反應(yīng)液溫度0℃～5℃，滴加完畢升至室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2 h。反應(yīng)完畢，將反應(yīng)液緩慢滴加入裝有純化水（50 L）的反應(yīng)釜中，過濾，并用純化水（10 L）淋洗3次，濾餅在40℃下減壓干燥至恒重。將干燥的粉末用乙酸乙酯（4 L）溶解，并用G4漏斗過濾，緩慢滴加到石油醚（80 L）中打漿，過濾，濾餅用石油醚（5 L）淋洗一次，濾餅在40℃下鼓風(fēng)干燥至恒重。再用乙酸乙酯（4 L）溶解，并用G4漏斗過濾，緩慢滴加到石油醚（80 L）中打漿，過濾，濾餅用石油醚淋（5 L）洗一次，濾餅在40℃鼓風(fēng)干燥至恒重，得到淡黃色固體產(chǎn)物1.30 kg，收率81.1%。反應(yīng)式見圖4。

圖4 Fmoc-L-4Aph（Trt）-OH的反應(yīng)式Fig.4 reaction equation of Fmoc-L-4Aph（Trt）-OH

3 展望

前列腺癌是男性生殖系常見的惡性腫瘤，發(fā)病率在全球一直居高不下，在歐美前列腺癌是男性癌死亡的主要原因之一。Degarelix作為新型的GnRH受體拮抗劑，不易形成凝膠，高濃度時(shí)可像多肽緩釋制劑那樣擴(kuò)散；可迅速而可逆地與腦垂體中GnRH受體結(jié)合，快速減少促性腺激素的釋放，從而導(dǎo)致睪酮水平的下降；具有長(zhǎng)效和弱的組胺釋放特性。其在理化性質(zhì)、起效速度、克服作用機(jī)制缺陷、降低嚴(yán)重不良反應(yīng)等方面，顯示出自身的優(yōu)越性[5-7]。因此，其在未來有可能發(fā)展成前列腺癌的治療的一線藥物。

[1]劉一方，范鳴.前列腺癌內(nèi)分泌治療藥Degarelix[J].藥學(xué)進(jìn)展，2009，33（10）：473-475.

[2]孫元曦，趙仁永，郭春紅.前列腺癌治療藥—Degarelix[J].齊魯藥事，2009，28（8）：510.

[3]徐佳駿，黃賽杰.治療前列腺癌的新藥Degarelix[J].中國(guó)男科學(xué)雜志，2010，24（7）：71-72.

[4]姚遠(yuǎn)兵，王玲，夏悅，等.治療前列腺癌的新型GnRH拮抗劑地加瑞克[J].中國(guó)新藥雜志，2010，19（3）：179-183.

[5]Francois G，Nicolas I，Sylvain L.Degarelix as a new antiangiogenic agent for metastaticcolon cancer[J].World J Gastroenterol，2013，19（5）:769-772.

[6]王志宏.前列腺癌新藥地蓋瑞利的藥理及臨床評(píng)價(jià)[J].中國(guó)新藥雜志，2010，19（7）：555-558.

[7]許紅霞，楊少輝，董華軍.抗前列腺癌藥—Degarelix研究進(jìn)展[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志，2010，10（19）：4557-4558.

Synthesis of Three Intermediates of Degarelix

HAN Jian，GU Shou-na
（Tianjin Chasesun Pharmaceutical Co.，Ltd.，Tianjin 301700，China）

Degarelix was a new drug of prostate cancer treatment.This article designed and synthesizedthree intermediates of Degarelix，like Fmoc-Lys（iPr，Boc）-OH，F(xiàn)moc-D-4Aph（Cbm）-OH and Fmoc-L-4Aph（Trt）-OH.They could provide important intermediates for synthesis of Degarelix and other polypeptides.

Degarelix;intermediate;synthesis

1006-4184（2017）4-0013-03

2016-12-21

韓健（1982-），男，碩士，工程師，從事有機(jī)合成研究工作。E-mail：hanjian119_2001@163.com。