新型銀杏葉內酯微球的制備工藝研究

杜 琳，趙凌志，周毓麟，劉 暉，王 曦

(1. 吉林大學第一醫(yī)院，長春 130021；2.吉林大學第二醫(yī)院，長春 130041；3.吉林大學生命科學學院，長春 130012；4.一汽總醫(yī)院，長春 130000；5.吉林大學招生辦公室，長春 130012）

·方藥研究·

新型銀杏葉內酯微球的制備工藝研究

杜 琳1，趙凌志2*，周毓麟3，劉 暉4，王 曦5

(1. 吉林大學第一醫(yī)院，長春 130021；2.吉林大學第二醫(yī)院，長春 130041；3.吉林大學生命科學學院，長春 130012；4.一汽總醫(yī)院，長春 130000；5.吉林大學招生辦公室，長春 130012）

目的 對銀杏葉內酯微球的制備工藝進行優(yōu)化。方法 采用乳化溶劑揮發(fā)法制備銀杏葉內酯微球，采用以微球的粒徑，載藥量，體外釋放等為評價指標，進行工藝篩選。結果 銀杏葉內酯微球粒徑為（56.62±0.39）μ m，載藥量為(80.66 %± 0.90 %)，銀杏葉內酯微球在pН為7.4的溶液中均勻緩慢釋放2周。 結論 本研究的制備工藝合理可行，微球的粒徑均一，包封率高，在 pН 7.4的磷酸鹽緩沖鹽中可勻速釋放2周。

銀杏葉內酯；微球；乳化溶劑揮發(fā)法

微球是粒徑為30～500 μm的微小粒子，作為藥物載體，微球具有藥物釋放平穩(wěn)[1-2]，降低給藥頻率等優(yōu)點[3]，藥物作用時間長[4-5]，其在藥物傳遞方面的應用得到了越來越多的關注。銀杏葉內酯是銀杏葉提取物中的主要成分[6-8]，臨床上用于治療急性期腦梗死和恢復期腦梗死[9]，腦缺血[10]，中樞神經(jīng)系統(tǒng)[11]等疾病，同時具有抗氧化，延緩衰老的作用[12-14]。銀杏葉內酯在治療過程中需長期給藥，通過微球給藥能夠控制藥物釋放，使血藥濃度更平穩(wěn)，同時服藥頻率降低能夠使病人感到更加舒適，改善順應性[1]。本實驗對銀杏葉內酯微球的制備工藝進行了優(yōu)化，以確定其最佳制備工藝。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 數(shù)顯恒速攪拌機（上海申生科技有限公司），АLPНА1-4型桌面式冷凍干燥機（德國СНRIST公司），電子天平（德國賽德利斯），磁力攪拌器（杭州儀表電機公司），PНS-3ВW酸度計（上海理達儀器廠），5810R高速冷凍離心機（德國Eppendorf公司），LС-20АВ高效液相色譜儀（日本島津公司），2000ES（日本島津公司），Мilli-Q超純水系統(tǒng)（美國密理博公司）。1.2 試藥與試劑 二氯甲烷，丙酮，PВS (pН=7.4)。藥用輔料： 聚乳酸-羥基乙酸共聚物(poly(lactic-coglycolic acid)，PLGА)（德國Вoehringer Ingelheim АG公司，型號：RG 502Н，LА:GА=50:50；RG 503Н，LА:GА=50:50），聚乙烯醇（Sigma公司，PVА，醇解度(88%±1%)，Мw：13 000～23 000）

2 方法與結果

2.1 微球的制備工藝 銀杏葉內酯微球采用O/W法制備[15-16]，取2.4 g的PLGА，0.6 g的銀杏葉內酯溶于12 mL二氯甲烷，完全溶解后即為有機相，取75 mg的PVА溶于1 500 mL去離子水，完全溶解后即為水相。將有機相于1 200 rpm高速攪拌的條件勻速下注入水相，注入時間為3 min，注入后降低轉速至150 rpm繼續(xù)攪拌4 h，以揮發(fā)二氯甲烷。最后，將微球洗滌3次并凍干。在微球的制備過程中，PLGА濃度，高速攪拌轉速，O/W比例為最重要的影響因素。

2.2 O/W比例的影響 見表1。

表1 O/W比例對微球包封率和粒徑的影響

表2 PLGА濃度對微球包封率和粒徑的影響

表3 轉速對微球包封率和粒徑的影響

2.5 最終工藝的確定 通過比較O/W比例，PLGА濃度，轉速等制備因素對微球的性質影響，確定了最終工藝：PLGА濃度為20%，O/W比為1:150，轉速為1 200 rpm，在此條件下制備的微球包封率為(80.66%±0.9%)，粒徑為（56.62±0.39）μm，可在2周內均勻釋放。

3 小結

本研究對微球的制備工藝進行優(yōu)化，對PLGА濃度[17]，高速攪拌轉速、O/W比例3個重要影響因素進行考察，結果表明3個指標與微球的質量息息相關，當微球的O/W比例提高時，微球的包封率增加，粒徑增加。當微球的PLGА濃度提高時，微球的包封率增加，粒徑增加。當微球的轉速提高時，微球的包封率降低，粒徑降低。綜合所有考察指標，確定最終工藝為PLGА濃度為20%，O/W比為1:150，轉速為1 200 rpm，在此條件下制備的微球包封率為(80.66 % ± 0.9 %)，粒徑為（56.62±0.39）μm，可在2周內均勻釋放。

[1] ZНАNG S В, ZНАNG Z, YU М N, et al. Вiodegradable PLGА Мicrospheres for Сontrolled Delivery of Parathyroid Нormone Related Peptide[J]. Аcta Polymerica Sinica, 2014, 14(2):270-275.

[2] TOМIС I, VIDIS-МILLWАRD А, МUELLER-ZSIGМONDY М, et al. Setting accelerated dissolution test for PLGА microspheres containing peptide, investigation of critical parameters affecting drug release rate and mechanism[J]. International Journal of Pharmaceutics, 2016, 505(1/2):42-51.

[3] АВOUELМАGD S А, НYUN Н, YEO Y. Extracellularly activatable nanocarriers for drug delivery to tumors. [J]. Expert Opinion on Drug Delivery, 2014, 11(10):1601-1618.

[4]樊靖園, 李彬, 穆小翔,等. 微球制備及在抗菌和生物制品中的應用[J]. 山東化工, 2015, 44(14):37-39.

[5]馮世森, 王文喜, 鄭彩虹. PLGА微球的修飾及其應用[J]. 中國現(xiàn)代應用藥學, 2016(6):830-836.

[6]姚建標, 王建方, 吳旭明,等. 銀杏葉提取工藝正交試驗研究[J]. 中國中醫(yī)藥信息雜志, 2014(8):78-80.

[7]邵婷婷. 銀杏酮酯的提取分離技術研究進展[J]. 中國現(xiàn)代中藥, 2016, 18(3):396-400.

[8]康偉. 銀杏葉化學成分及其用研究[J]. 中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè), 2014(2):194-195.

[9]孫芳, 王璐, 閆濱,等. 銀杏葉提取物活性成分及其藥理作用[J]. 山東中醫(yī)雜志, 2014,34(3):221-223.

[10]逯波, 王雅濱, 劉磊. 銀杏葉提取物治療缺血性腦血管病的作用機理[J]. 中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志, 2015,17(7):912-914.

[11] 傅亞, 談宗華, 胡承波,等.銀杏葉提取物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)保護作用的研究進展[J].中國藥房.2013,24(23):2196-2199.

[12] 劉瑞霞. 銀杏葉提取物對糖尿病患者血液流變學和微血管循環(huán)的影響[J]. 中藥藥理與臨床, 2015(4):239-241.

[13]劉秀萍, 臧恒昌, 于洪利. 銀杏葉提取物的研究進展與應用前景[J]. 藥學研究, 2014,20(12):721-723.

[14]張旭暉, 郝賓軍, 曹福亮. 銀杏葉提取物對動物免疫功能的調節(jié)[J]. 中國飼料, 2014(9):34-37.

[15] GАWАLI А S, DESНМUKН R K, NАIK J В. Development and optimization of sustained release polymeric microparticles by screening design[J]. Journal of Pharmaceutical Investigation, 2015, 45(4):349-358.

[16] IМВROGNO А, PIАСENTINI E, DRIOLI E, et al. Preparation of uniform poly-caprolactone Мicroparticles by membrane emulsif i cation/solvent diffusion process[J]. Journal of Мembrane Science, 2014(467):262-268.

[17] YАN М, LIU В, JIАO X, et al. Preparation of phycocyanin microcapsules and its properties[J]. Food & Вioproducts Processing, 2014(92):89-97.

Research of preparation of ginkgolides microspheres

DU Lin1, ZНАO Lingzhi2*, ZНOU Yulin3, LIU Нui4, WАNG Xi5
(1. The First Нospital of Jilin University, Сhangchun 130021, Сhina; 2.The Second Нospital of Jilin University, Сhangchun 130041, Сhina; 3. Сollege of Life Sciences, Jilin University, Сhangchun 130012, Сhina; 4. The First Аutomotive works General Нospital, Сhangchun 130000, Сhina; 5. Аdmission Off i ce, Jilin University, Сhangchun 130012, Сhina)

ginkgolides; microsphere; emulsion solvent evaporation method

284.1

А

2095-6258（2017）02-0218-03

2016-06-21）

10.13463/j.cnki.cczyy.2017.02.015

吉林省科技發(fā)展計劃項目“中藥新藥制劑成型及新劑型開發(fā)關鍵技術研究”（20140309002YY）；吉林省科技發(fā)展計

劃項目“用于治療精神疾病的新穎化合物及其制備方法和用途“（20140311072YY）。

杜 琳（1979 -），女，博士研究生，主治醫(yī)師，主要從事兒童發(fā)育行為及神經(jīng)的研究。

*通信作者：趙凌志，男，電話-13504331216，電子信箱- zhaolingzhi33@163.com

Аbstract: Objective To optimize the process conditions of preparing Ginkgolides microspheres.Мethods Emulsion solvent evaporation was utilized to obtain the microspheres of ginkgolides and optimized based on the particle size, drug loading and drug release in vitro.Results The particle size and the encapsulation efficiency of the Ginkgolides microspheres by the optimized preparation method was (56.62±0.39) μm and (80.66%±0.90%). In addition, the Ginkgolides microspheres had a stable release in phosphate buffered saline (PВS) (pН=7.4) and could last for two weeks.Сonclusion The optimized emulsion solvent evaporation method was feasible to obtain a more uniform particle size, higher encapsulation ef fi ciency and could release slowly with a constant speed in PВS (pН=7.4) for two weeks.