奧貝膽酸的合成

糜佳晨

（嘉興富特吉生物科技有限公司，浙江嘉興 314006）

奧貝膽酸的合成

糜佳晨

（嘉興富特吉生物科技有限公司，浙江嘉興 314006）

以鵝去氧膽酸為起始原料，經選擇性氧化，酯化，三甲基氯硅烷形成烯醇硅醚，與乙醛經向山羥醛縮合，再經氫化還原，水解，選擇性還原反應制得奧貝膽酸，總收率為25.9%，結構用1H-NMR確認。該法操作簡便，試劑廉價易得，適合工業化生產。

奧貝膽酸；鵝去氧膽酸；肝硬化；合成

奧貝膽酸（obeticholic acid，1）是由美國Intercept制藥公司研制的用于治療原發性膽汁性肝硬化（PBC）的一種新藥，并于2016年5月被美國FDA批準上市，這是時隔近20年來第二個用于治療該疾病的藥物，FDA 在審批該藥時采用了加速評審程序，同時授予其孤兒藥地位。1是一種強效的法尼醇X受體激動劑，用于調節膽汁酸的水平，適用于對熊去氧膽酸（UCDA）反應不足的患者[1-5]。

1的合成目前主要問題在于乙基化這一步副反應過多，產率過低，據文獻報道收率只有37%，同時還用到了對人體致癌的六甲基磷酰三胺（HMPa）[6]。本文參考了相關文獻[7-8]，提出了采用鵝去氧膽酸為起始原料，經過選擇性氧化制得3，酯化合成4，與三甲基氯硅烷形成烯醇硅醚5，和乙醛經向山羥醛縮合得到6，再經過催化加氫水解制得8，最后用硼氫化鈉選擇性還原得到1，總收率為25.9%。本法操作簡便，試劑廉價易得，適合工業化生產。合成線路如下：

1 試驗部分

1.1 3α-羥基-7-酮-5β-膽甾烷-24-酸（3）

將2（5.0g，12.74mmol）溶于丙酮/水（3/1）50ml中，分批加入N-溴代琥珀酰亞胺（NBS）（3.40g，19.11mmol），避光，室溫攪拌2h，TLC檢測顯示反應完全，加入飽和亞硫酸鈉30ml以防止進一步氧化，減壓蒸除溶劑，當有白色固體生成時立刻停止，將乳濁液傾入水中，靜止析晶，抽濾，干燥后得白色固體3（4.47g，89.9%）。1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ3.63～3.54（m，1H），2.85～2.81（t，1H），2.46～2.36（m，2H），2.34～2.16（m，2H），1.18（s，3H），0.88（d，3H），0.68（s，3H）。

1.2 3α-羥基-7-酮-5β-膽甾烷-24-甲酯（4）

將3（4.45g，11.39mmol）溶于甲醇（30mL）中，加入甲磺酸3d，加熱回流2h，TLC檢測顯示反應完全，冷卻至室溫，用飽和碳酸氫鈉調pH約至7，減壓蒸除溶劑，用DCM溶解樣品，水洗，無水硫酸鎂干燥后抽濾，旋干溶劑，靜止固化得白色固體4（4.56g，98.9%）。1H-NMR（400MHz，CDCl3）：δ3.63（s，3H），3.60～3.51（m，1H），2.83～2.77（t，1H），2.45～2.34（m，2H），2.32～2.13（m，2H），1.19（s，3H），0.87（d，3H），0.67（s，3H）。

1.3 3α，7-二（三甲基硅氧基）-6-烯-5β-膽甾烷-24-甲酯（5）

氮氣保護下加入THF（10mL），2M的LDA的THF溶液（38mL）及三甲基氯硅烷（4.2mL，33.17mmol），-78℃攪拌30min，緩慢滴加含有4（4.45g，11.00mmol）的THF溶液10mL，10min內滴加完畢。-78℃下繼續攪拌3h，TLC檢測顯示反應完全，緩慢升至室溫，加入飽和碳酸氫鈉溶液（50ml）攪拌30min淬滅反應，用乙酸乙酯（30mLx3）萃取，合并有機層，依次用水（50mL）飽和食鹽水（50mL）洗滌，無水硫酸鎂干燥后抽濾，減壓蒸除溶劑，得黃棕色油狀物5（5.31g，87.9%），由于烯醇硅醚穩定性不佳，經真空干燥后直接用于下步反應。1H-NMR（400MHz，CDCl3）：δ4.73～4.72（d，1H），3.66（s，3H），3.58～3.50（m，1H），2.84～2.80（m，1H），2.68～2.62（m，2H），2.39～2.32（m，2H），1.18（s，3H），0.92（d，3H），0.67（s，3H），0.16（s，9H），0.09（s，9H）。

1.4 3α-羥基-6-亞乙基-7-酮-5β-膽甾烷-24-甲酯（6）

氮氣保護下向圓底燒瓶中加入5（5.31g，9.67mmol）的DCM溶液30mL，冷卻至-60℃，加入乙醛（1.6mL，29.01mmol），攪拌30min，緩慢攪拌下滴加三氟化硼乙醚（7.3mL，58.02mmol），-60℃下繼續攪拌4h，TLC檢測顯示反應完全，緩慢升至室溫，加入飽和碳酸氫鈉溶液（40mL）攪拌30min淬滅反應，水層用DCM（30mLx3）萃取，合并有機層，用飽和食鹽水（40mL）洗滌，無水硫酸鎂干燥后抽濾，減壓蒸除溶劑，剩余物經硅膠柱[洗脫液,乙酸乙酯∶正己烷（1∶1）]純化，得黃色油狀物6（2.00g，48.0%）。1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：6.19（q，1H），3.67（s，3H），3.62～3.54（m，1H），2.88～2.83（m，1H），2.66～2.59（m，2H），2.39～2.31（m，2H），1.70-1.68（d，3H），1.21（s，3H），0.93（d，3H），0.65（s，3H）。

1.5 6α-乙基-3α-羥基-7-酮-5β-膽甾烷-24-甲酯（7）

將6（2.00g，4.64mmol）溶于無水甲醇（20mL）中，加入10%Pd/C（0.4g），用氫氣置換空氣3次后，通氫氣室溫反應24h。抽濾，濾餅用甲醇（20mLx2）淋洗，合并濾液，減壓蒸除溶劑，得黃色油狀物7（1.95g，97.0%）。

1.6 6α-乙基-3α-羥基-7-酮-5β-膽甾烷-24-酸（8）

將7（1.95g，4.51mmol）溶于40%氫氧化鈉溶液（15mL）和甲醇（15mL）的混合溶液中，加熱回流2h，TLC檢測顯示反應完全，冷卻至室溫，減壓蒸除甲醇，加10%鹽酸溶液（20mL）調節pH至1，析出白色固體，抽濾，干燥得淡黃色固體8（1.71，90.5%）。1H-NMR（400MHz，CDCl3）：δ：3.64～3.59（m，1H），2.88～2.84（m，1H），2.42～2.36（t，2H），1.20（s，3H），0.98～0.96（d，3H），0.89～0.83（t，3H），0.69（s，3H）。

1.7 6α-乙基-3α，7α-二羥基-5β-膽甾烷-24-酸（1）

將8（1.71g，4.08mmol）溶于10%氫氧化鈉溶液（40mL）中，升溫至回流，分批加入硼氫化鈉（0.77g，20.4mmol）后回流3h，TLC檢測顯示反應完全，冷卻至室溫，加入10%鹽酸溶液調節pH至1，析出大量固體，用乙酸乙酯溶解，水層用乙酸乙酯（20mLx3）萃取，合并有機層，用飽和食鹽水（50mL）洗滌，無水硫酸鎂干燥后抽濾，減壓蒸除溶劑，剩余物經硅膠柱[洗脫液，乙酸乙酯∶正己烷（2∶1）]純化，得白色固體1（1.35g，78.5%）。1H-NMR（400MHz，CDCl3）δ：3.86（s，1H），3.50～3.45（m，1H），2.27～2.19（m，2H），0.94～0.93（d，3H），0.93～0.90（m，6H），0.66（s，3H）。13C-NMR（100MHz，CDCl3）δ：177.9，73.4，69.9，55.5，52.3，50.4，45.6，44.4，43.1，41.6，38.5，37.2，36.5，35.1，33.9，32.4，30.8，30.1，28.2，25.3，21.9（2C），18.7，12.2，11.5。

[1] 張建忠.2016年10月FDA批準新藥概況[J].上海醫藥，2016，（23）：79.

[2] 朱世超，鄭學敏，張玥，劉巍，周植星.法尼醇X受體激動劑奧貝膽酸[J].現代藥物與臨床，2016，（3）：396-400.

[3] 夏訓明.美國FDA批準Ocaliva奧貝膽酸治療原發性膽汁性膽管炎[J].廣東藥學院學報，2016，（3）：393.

[4] FDA批準治療原發性膽汁性肝硬化藥物Obeticholic Acid上市[J].中國執業藥師，2016，（8）：14.

[5] 李艷梅，王綺夏，馬雄.原發性膽汁性膽管炎的治療進展[J].臨床肝膽病雜志，2016，（8）：1491-1496.

[6] Yu D，Mattern DL，Forman BM.An improved synthesis of 6αethylchenodeoxycholic acid（6ECDCA），a potent and selective agonist for the farnesoid X receptor（FXR）[J].Steroids，2012，77（13）：1335—1338.

[7] 張曉奇.6α-氟熊去氧膽酸的合成與工藝改進[D].上海：華東理工大學，2013.

[8] 英特塞普特醫藥品公司.制備3α（β）-7α（β）-二羥基-6α（β）-烷基-5β-膽烷酸的方法：CN101203526B[P].2012-09-05.

Synthesis of Austempered Cholic Acid

Mi Jia-chen

Based on chenodeoxycholic acid as the starting material，by selective oxidation，esterification，forming three methyl chlorosilane silyl enol ether，and acetaldehyde by condensation to the mountains by aldol，hydrogenation，hydrolysis，selective reduction reaction to prepare Aobei cholic acid，the total yield was 25.9%.The structure is confirmed by 1H-NMR.The method is simple，cheap and easy to be used in industrial production.

Aobei cholic acid；chenodeoxycholic acid；liver cirrhosis；synthesis

R914.5

B

1003-6490（2017）01-0138-02

2017-01-04

糜佳晨（1984—），男，浙江嘉興人，工程師，主要研究方向為藥品質量控制及藥物中間體合成。