紅梔骨通凝膠膏對家兔皮膚刺激性的研究Δ

彭偉文，王珠強，吳 飛（廣州中醫藥大學附屬中山醫院藥學部，廣東中山 528401）

紅梔骨通凝膠膏對家兔皮膚刺激性的研究Δ

彭偉文＊，王珠強，吳 飛（廣州中醫藥大學附屬中山醫院藥學部，廣東中山 528401）

目的：研究紅梔骨通凝膠膏經皮給藥的安全性。方法：分別取家兔行完整皮膚單次給藥刺激性實驗（n＝4）、破損皮膚單次給藥刺激性實驗（n＝4）、完整皮膚多次給藥刺激性實驗（n＝4）。各家兔左右兩側皮膚分別貼3 cm×3 cm空白基質和紅梔骨通凝膠膏24 h（按生藥計為0.14 g）。前2項實驗家兔分別于去除膠布1、24、48、72 h后觀察去毛部位的紅斑和水腫情況；第3項實驗家兔給藥24 h后，暴露給藥區域1 h后再次給藥，重復3次，分別觀察第1、2次去除膠布后及第3次去除膠布1、24、48、72 h后去毛部位的紅斑和水腫情況。結果：3項實驗中，各組家兔的紅斑和水腫評分均為0分，皮膚刺激性均評價為無刺激。結論：紅梔骨通凝膠膏對家兔皮膚無刺激性。

紅梔骨通凝膠膏；皮膚刺激性；完整皮膚；破損皮膚；單次給藥；多次給藥；家兔

凝膠膏劑（原巴布膏劑）系指提取物、飲片或化學藥物與適宜的親水性基質混勻后，涂布于背襯材料上制得的貼膏劑[1]。醫藥化學工業的發展、制劑技術的提高及高分子輔料的開發與應用，促使凝膠膏劑的發展和應用日益廣泛。因此，凝膠膏劑被視為是一類極具發展前景的新型外用制劑[2]。紅梔骨科洗劑為廣州中醫藥大學附屬中山醫院院內制劑，由紅花、梔子、黃柏、威靈仙、絡石藤等13味中藥構成，臨床用于治療扭挫傷初期、骨折初期的關節活動不利[3]。但這一劑型有藥物滯留時間短、藥材浪費大、使用不方便等缺點，因此迫切需要開發新劑型來滿足患者的需求。凝膠膏劑具有載藥量大、釋藥時間長、透氣、不拔體毛、使用舒適，無皮膚刺激和過敏反應，且可多次在身體各部位貼敷等優點[4]。因此，我院在紅梔骨科洗劑的基礎上研發了紅梔骨通凝膠膏劑，在本研究中，筆者對其皮膚刺激性進行探討，以為其臨床安全用藥提供實驗依據。

1 材料

1.1 儀器

BS224S電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）。

1.2 藥材與試劑

紅梔骨通凝膠膏[廣州中醫藥大學附屬中山醫院藥學部自制，規格：8 cm×12 cm，1.5 g/貼（以生藥計）]；親水凝膠專用聚丙烯酸鈉（NP-800）、甘羥鋁、甘油、酒石酸、乙二胺四乙酸鈉（EDTA-Na2）、聚維酮K90均為分析純；水為純化水。

1.3 動物

健康家兔12只，♀♂各半，體質量2～2.5 kg，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供，實驗動物生產許可證號：SCXK（粵）2015-0001，使用許可證號：SYXK（粵）2010-0109。家兔飼養于廣東省中山市中醫院中藥藥理實驗室。

2 方法

2.1 空白基質的制備

按紅梔骨通凝膠膏配方量，稱取NP-800、甘羥鋁適量，分散于甘油中，混合均勻作為油相備用；另取配方量的酒石酸、EDTA-Na2、聚維酮K90于純化水中，加入適量冰片與薄荷，攪拌均勻作為水相備用；將水相緩慢加入油相中，邊加邊攪拌，約6 min即得黏稠的凝膠膏，將膏體涂布于無紡布上，蓋上印花薄膜，壓平，室溫放置24 h，固化成型，鋁塑袋密封即得。

2.2 完整皮膚單次給藥刺激性實驗

取家兔4只，♂♀各半，給藥前24 h將家兔背部脊柱兩側去毛，左右各2個部位，約3 cm×3 cm，剪毛時應保證皮膚不破損。將膏劑剪切成3 cm×3 cm的小塊，0.14 g/小塊（以生藥計算）。24 h后，分別于去毛處左側2個部位各貼1貼“2.1”項下空白基質、右側2個部位各貼1貼紅梔骨通凝膠膏劑，并用無刺激的膠布固定，24 h后用溫水洗凈[5-6]。于去除膠布后的1、24、48、72 h觀察并記錄去毛部位的紅斑和水腫等情況。紅斑和水腫癥狀按《中藥、天然藥物刺激性和溶血性研究技術指導原則》[7]中有關技術要求評分。紅斑評分：無紅斑計0分、勉強可見計1分、明顯可見計2分、中度到嚴重紅斑計3分、紫紅色紅斑并有焦痂形成計4分；水腫評分：無水腫計0分、勉強可見計1分、可見邊緣高出周圍皮膚計2分、皮膚隆起約1 mm且輪廓清楚計3分、水腫隆起1 mm以上且范圍擴大計4分。分別評分后，計算紅斑和水腫總評分，0～0.49分為無刺激、0.5～2.99分為輕度刺激、3.0～5.99分為中度刺激、6.0～8.0分為重度刺激。

2.3 破損皮膚單次給藥刺激性實驗

取家兔4只，♂♀各半，按“2.2”項下方法去毛，用乙醇清潔、消毒暴露皮膚后，用滅菌針頭在皮膚上劃“井”字造成破損傷口，以滲出細小血珠為標準[7-8]。按“2.2”項下方法給藥，于去除膠布后的1、24、48、72 h觀察并記錄去毛部位的紅斑和水腫情況，評分標準同“2.2”項下。

2.4 完整皮膚多次給藥刺激性實驗

取家兔4只，♂♀各半，按“2.2”項下方法去毛、給藥，給藥后24 h用溫水洗凈殘留藥物，觀察去毛部位的紅斑和水腫情況，暴露給藥區域1 h后再次給藥，重復3次。第3次給藥后24 h，用溫水洗凈殘留藥物[9-10]，并于去除膠布后的1、24、48、72 h觀察并記錄去毛部位的紅斑和水腫情況，評分標準同“2.2”項下。

3 結果

3.1 完整皮膚單次給藥刺激性實驗結果

去除空白基質和紅梔骨通凝膠膏1、24、48、72 h后，完整皮膚家兔去毛部位均未見紅斑和水腫，評分均為0分，表明完整皮膚單次給予紅梔骨通凝膠膏對家兔皮膚無刺激性，結果見表1。

3.2 破損皮膚單次給藥刺激性實驗結果

去除空白基質和紅梔骨通凝膠膏1、24、48、72 h后，破損皮膚家兔去毛部位均未見紅斑和水腫，評分均為0分，表明破損皮膚單次給予紅梔骨通凝膠膏對家兔皮膚無刺激性，結果見表2。

3.3 完整皮膚多次給藥刺激性實驗結果

表1 完整皮膚單次給藥刺激性實驗結果Tab 1 Results of single dose in complete skin irritation test

表2 破損皮膚單次給藥刺激性實驗結果Tab 2 Results of single dose in damaged skin irritation test

第1、2次給藥后24 h和第3次去除空白基質和紅梔骨通凝膠膏1、24、48、72 h后，家兔去毛部位均未見紅斑和水腫，評分均為0分，提示完整皮膚多次給予紅梔骨通凝膠膏對家兔皮膚無刺激性，結果見表3。

表3 完整皮膚多次給藥刺激性實驗結果（n＝4）Tab 3 Results of multiple doses in complete skin irritation test（n＝4）

4 討論

紅梔骨科洗劑作為我院院內制劑多年來已廣泛使用于骨外科疾病，常作為骨折初期、筋骨損傷的輔助藥物，療效顯著、價格低廉。紅梔骨科洗劑中發揮療效的主要是多種中、高極性活性物質，如羥基紅花黃色素A、梔子苷等，這些成分易溶于水，呈弱酸性[11-12]。而凝膠膏含水量高、載藥量大、藥物作用持續時間長，凝膠膏的基質在水中也顯弱酸性，故非常適合將紅梔骨科洗劑開發為凝膠膏劑。此外，凝膠膏親水性基質可適用于各種極性藥物，符合中藥復方多成分、多靶點的特點；且其膏體柔軟、載藥量大、無刺激、無過敏，適合中藥足量、長時間、持續發揮療效的給藥特點。隨著中藥的應用范圍擴展和透皮給藥研究的深入，中藥凝膠膏的應用不斷得到拓展，取得了較為滿意的臨床效果。

本研究結果表明，將紅梔骨科洗劑的劑型改為凝膠膏后對家兔皮膚無明顯刺激性，安全性較好；而由NP-800、甘羥鋁、甘油、酒石酸、EDTA-Na2、聚維酮K90等輔料制成的空白基質對家兔皮膚也無明顯刺激性，可見無論含藥凝膠膏還是空白基質均較安全可靠，這也充分證實了這一劑型的可行性。但是，紅梔骨通凝膠膏劑應用于臨床的安全性如何有待進一步研究證實。此外，凝膠膏劑安全性的評價主要包括感官評測和儀器評測。感官評測有一定的現實運用意義，且簡單易行，但由于影響因素較多，客觀性不強，且個體差異較大，容易造成結果判斷有誤。因此，開發和使用儀器對中藥凝膠膏劑進行更客觀的評價是下一步工作的重點。

2015年版《中國藥典》（四部）對凝膠膏劑的其他質量標準作出了規定，其檢查項包括外觀、含膏量、賦形性、黏附性和微生物限度。本課題組前期對這些指標均進行了檢測，發現紅梔骨通凝膠膏均符合2015年版《中國藥典》（四部）要求，但這些檢查項目尚有不足，并不完善，增加凝膠膏劑刺激性評價有利于凝膠膏劑質量的提高。然而2015年版《中國藥典》（四部）對凝膠膏劑的綜合評價仍不夠詳細，如對實驗儀器和影響因素等未作出詳細說明，某些指標也無具體限度的規定，尚無科學合理的標準可循，測得結果重復性差且沒有可比性。因此，建立完整的綜合測評方法、設置科學的評分指標、制定完善的質量評價標準對凝膠膏劑的發展有著十分重要的意義。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：四部[S].2015年版.北京：中國醫藥科技出版社，2015：22.

[2] 崔瑋.殼聚糖/聚乙烯醇復合水凝膠的制備及藥物釋放研究[D].杭州：浙江大學，2008：25.

[3] 廣東省衛生廳.中醫院制劑標準[M].廣州：廣東人民出版社，2011：123.

[4] 彭偉文，王珠強，吳飛.相關藥物巴布劑的藥效學及毒理學研究近況[J].中國藥房，2016，27（19）：2711-2714.

[5] 國家食品藥品監督管理局.中藥、天然藥物刺激性和溶血性研究技術指導原則[S].北京：軍事醫學科學出版社，2005：2.

[6] 楊基森.巴布劑[M].貴陽：貴州科技出版社，2005：247.

[7] 林靜，胡程萍，劉杰書，等.地木耳乳膏皮膚安全性實驗研究[J].湖北民族學院學報（醫學版），2016，33（1）：53-55.

[8] 單珍珠，周留勇，尤建良，等.復脈膏外敷的安全性及對兔耳緣化療性靜脈炎的影響[J].河北中醫，2015，37（10）：1515-1518.

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[11] 劉聰敏，白潔，杜守穎，等.止痛凝膠膏劑的制備及體外釋放考察[J].中國實驗方劑學雜志，2013，19（15）：5-9.

[12] 張成桂，何苗，巫秀美，等.國內凝膠膏劑的專利分析[J].大理學院學報，2012，11（9）：11-15.

Study on the Skin Irritation of Hongzhi Gutong Cataplasm in Rabbits

PENG Weiwen，WANG Zhuqiang，WU Fei（Dept.of Pharmacy，Affiliated Zhongshan Hospital of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine，Guangdong Zhongshan 528401，China）

OBJECTIVE：To study the safety of percutaneous administration of Hongzhi gutong cataplasm.METHODS：Rabbits were taken for single dose in complete skin irritation test（n＝4），single dose in damaged skin irritation test（n＝4）and multiple doses in complete skin irritation test（n＝4）.The left and right sides of the skin respectively paste 3 cm×3 cm blank matrix and Hongzhi gutong cataplasm for 24 h（calculated by crude drug of 0.14 g）.After removing tape 1，24，48，72 h，the erythema and edema in hair removal site of rabbits in the former 2 tests were observed；after 24 h of administration，the rabbits in the last group were administrated again after exposing the administration area for 1 h，repeated 3 times，the erythema and edema in hair removal site after removing tape the first，second time and 1，24，48，72 h in the third time were respectively observed.RESULTS：In the 3 experiments，the scores of erythema and edema of all rabbits were 0，and skin irritation was evaluated as no irritation.CONCLUSIONS：Hongzhi gutong cataplasm has no skin irritation in rabbits.

Hongzhi gutong cataplasm；Skin irritation；Complete skin；Damaged skin；Single dose；Multiple doses；Rabbits

R283.6；R944.9

A

1001-0408（2017）07-0893-03

2016-07-22

2017-01-06）

（編輯：劉明偉）

廣東省中醫藥強省立項資助科研課題（No. 20141284）

＊主任中藥師。研究方向：中藥制劑開發與研究。電話：0760-88815106。E-mail：pww200688@21cn.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.07.08