血清miRNA-1、miRNA-21檢測(cè)預(yù)測(cè)PCI術(shù)后患者再狹窄的臨床價(jià)值

剌梅，楊登魁，李江

(延安大學(xué)咸陽(yáng)醫(yī)院檢驗(yàn)科1、心內(nèi)科2，陜西 咸陽(yáng) 712000)

血清miRNA-1、miRNA-21檢測(cè)預(yù)測(cè)PCI術(shù)后患者再狹窄的臨床價(jià)值

剌梅1，楊登魁2，李江1

(延安大學(xué)咸陽(yáng)醫(yī)院檢驗(yàn)科1、心內(nèi)科2，陜西 咸陽(yáng) 712000)

目的 探討血清中miRNA-1、miRNA-21水平檢測(cè)對(duì)經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)（PCI）后患者半年內(nèi)擴(kuò)張部位再狹窄的臨床預(yù)測(cè)價(jià)值。方法選取2014年5月至2016年5月在延安大學(xué)咸陽(yáng)醫(yī)院接受PCI術(shù)的70例冠心病患者（再狹窄組37例，未狹窄組33例），行血管內(nèi)超聲(IVUS)檢查，并選擇33例體檢健康者(對(duì)照組)，檢測(cè)各組血清中miRNA-1、miRNA-21水平，采用t檢驗(yàn)、Pearson相關(guān)性分析及建立受試者工作曲線(ROC曲線)進(jìn)行比較分析。結(jié)果血清miRNA-1在再狹窄組、未狹窄組和對(duì)照組中的表達(dá)水平分別為(0.23±0.05)、(0.35±0.09)、(0.91± 0.13)，血清miRNA-21的水平分別為(0.85±0.15)、(0.36±0.08)、(0.20±0.03)。再狹窄組血清miRNA-1水平明顯低于對(duì)照組，miRNA-21水平則明顯高于對(duì)照組。而與未狹窄組比較，再狹窄組miRNA-1水平顯著下調(diào)，miRNA-21水平則顯著上調(diào)，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。IVUS結(jié)果顯示PCI術(shù)后再狹窄組外彈力膜內(nèi)橫截面積(EEM)、斑塊面積(PLA)和最小管腔面積(MLA)分別為(9.97±2.17)mm2、(11.28±2.75)mm2、(3.78±1.87)mm2；IVUS結(jié)果顯示PCI術(shù)后未再狹窄組EEM、PLA和MLA分別為(13.66±2.28)mm2、(6.13±1.90)mm2、(6.07±2.07)mm2。再狹窄組與未狹窄組比較，PLA顯著增高，EEM和MLA顯著降低。再狹窄組miRNA-21水平分別與EEM、PLA和MLA有明顯的相關(guān)性(r=-0.588，P＜0.01；r=0.583，P＜0.01；r=-0.608，P＜0.01)；再狹窄組miRNA-1水平分別與EEM、PLA和MLA有相關(guān)性(r=0.613，P＜0.01；r=-0.605，P＜0.01；r=0.593，P＜0.01)。再狹窄組的血清miRNA-1與miRNA-21水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.657，P＜0.01)。ROC曲線分析顯示，血清miRNA-21水平的AUC為0.751(95%CI：0.687～0.892，P= 0.000)；血清miRNA-1水平的AUC為0.722(95%CI：0.679～0.883，P=0.000)。根據(jù)SPSS統(tǒng)計(jì)結(jié)果計(jì)算出miRNA-21在最佳臨界值處診斷PCI術(shù)后再狹窄發(fā)生及狹窄程度監(jiān)測(cè)的敏感性和特異性為96.9%和95.3%，miRNA-1的敏感性和特異性為90.6%和95.3%。結(jié)論檢測(cè)PCI術(shù)后患者血清中miRNA-1、miRNA-21水平可以預(yù)測(cè)其擴(kuò)張部位再狹窄的發(fā)生。

經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)；miRNA-1；miRNA-21；再狹窄

目前臨床上采用冠狀動(dòng)脈支架介入術(shù)來治療冠脈狹窄所導(dǎo)致的缺血性心臟病。近年來，經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)(PCI)在我國(guó)迅速普及。來自衛(wèi)生部的統(tǒng)計(jì)顯示，2011年中國(guó)大陸PCI數(shù)量已超過332 992例。在最近的PCI術(shù)中雖然多采用藥物洗脫支架，但術(shù)后擴(kuò)張部位再狹窄的發(fā)生仍然成為嚴(yán)重的并發(fā)癥[1]，影響著冠心病患者的預(yù)后及生活質(zhì)量。因此，如何減少PCI術(shù)后再狹窄的發(fā)生成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。有報(bào)道認(rèn)為，微小RNA(miRNA)可能參與缺血性心臟病的病理過程并呈現(xiàn)差異性表達(dá)[2]。目前人類已發(fā)現(xiàn)的miRNA超過1 000種[3]。另外的研究顯示，miRNAs在血液循環(huán)中可穩(wěn)定地存在，可作為診斷疾病的生物學(xué)標(biāo)志物[4]。筆者通過檢測(cè)PCI術(shù)后患者的血清miRNA-1、miRNA-21的表達(dá)水平，旨在探討其與PCI術(shù)后再狹窄發(fā)生的關(guān)系，并為再狹窄的早期檢出提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年5月至2016年5月在本院心血管內(nèi)科住院接受經(jīng)皮冠脈支架術(shù)后半年內(nèi)的冠心病患者70例入選病例組。按冠脈造影原病變部位是否有再狹窄分為兩組，其中再狹窄組37例，男性23例，女性14例，年齡40～72歲，平均(55.7±12.6)歲；未狹窄組33例，男性20例，女性13例，年齡38～70歲，平均(52.3±13.2)歲。所有患者均為單支病變，病變位于前降支者45例，其中8例患者病變位于前降支與對(duì)角支分叉處；病變位于右冠脈者20例；位于回旋支者5例。共置入支架90枚，其中前降支置入支架63枚，右冠脈置入23枚，回旋支置入4枚。PCI術(shù)后再狹窄診斷標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)冠脈造影顯示患者原病變部位支架內(nèi)和節(jié)段內(nèi)血管管腔直徑狹窄≥50%。所有入選病例排除多支病變及血管慢性閉塞再通者、泵衰竭KillipⅢ級(jí)及Ⅲ級(jí)以上者、嚴(yán)重肝、腎功能不全者。選取同期本院體檢中心體檢健康者33例作為對(duì)照組，其中男性19例，女性14例，年齡42～73歲，平均(53.7±13.6)歲。兩病例組患者均于支架置入術(shù)后服用阿司匹林100 mg/d及波力維75 mg/d。各組試驗(yàn)對(duì)象的性別和年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有試驗(yàn)對(duì)象均為自愿加入，并簽署知情同意書。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 IVUS檢查 采用血管內(nèi)超聲(intravascular ultrasound，IVUS)來評(píng)價(jià)PCI術(shù)后再狹窄的發(fā)生。使用Boston Scientific Clearview血管內(nèi)超聲儀，采用肝素抗凝，并于冠脈內(nèi)注射硝酸甘油。使用2.5F、頻率為40 Mhz的超聲探頭，通過狹窄病變處遠(yuǎn)段后以0.5 mm/s的速度回撤探頭導(dǎo)管，對(duì)支架內(nèi)病變及病變近段、遠(yuǎn)段各10 mm處測(cè)量3次。測(cè)量及計(jì)算外彈力膜內(nèi)橫截面積(external elastic membrance，EEM)、最小管腔面積(minimal luman area，MLA)和斑塊面積(plaque area，PLA)。通過機(jī)器自帶的軟件計(jì)算狹窄程度(restenosis rate，RS%)。測(cè)量參數(shù)參考美國(guó)心臟病學(xué)院的IVUS檢測(cè)指南。介入系統(tǒng)為德國(guó)SIEMENS COROSKOP T.O.P心血管造影系統(tǒng)，配有數(shù)字成像系統(tǒng)和冠狀動(dòng)脈定量分析軟件。PCI術(shù)后IVUS見圖1。

1.2.2 標(biāo)本采集 所有研究對(duì)象采集的血液于2 h內(nèi)分離血清：4℃、3 000 r/min離心10 min，取上清，4℃、3 000 r/min進(jìn)一步離心10 min，將所得的血清標(biāo)本分裝于無RNA酶的凍存管中，-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 研究方法 采用實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)研究冠心病患者血清miRNA-1、miR-NA-21表達(dá)狀況。

圖1 PCI術(shù)后IVUS圖

1.2.4 儀器和試劑 RNA提取采用美國(guó)Invitrogen公司產(chǎn)品。LightCycler熒光PCR儀來自德國(guó)Roche公司。RT-PCR試劑盒采用上海久盛醫(yī)療用品有限公司產(chǎn)品。

1.2.5 RNA的提取及保存 在冰上融化血漿，吸取100 mL，加入等體積的變性液，渦旋混勻，在冰上孵育5 min；再加入等體積的酸/酚/氯仿，渦旋混勻1 min，冷凍離心5 min，重復(fù)此步驟三次，再與1.25倍體積的無水乙醇充分混合，過柱，洗柱兩次，將所得的RNA用緩沖液稀釋；再加葡萄糖和無水乙醇在4℃沉淀過夜，棄去上清，將沉淀在空氣中干燥2～3 min，用無RNA酶蒸餾水1 μL溶解，相當(dāng)于100 μL的血漿。

1.2.6 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng) 依據(jù)RT-PCR試劑盒說明進(jìn)行操作。每個(gè)樣品取3 μL逆轉(zhuǎn)錄，PCR反應(yīng)體系如下：10 μL、2×Taqman通用的PCR預(yù)混物，1 μL、20× miRNA特異性引物，1.33 μL的cDNA，7.67 μL的蒸餾水；反應(yīng)條件：95℃變性10 min，95℃15 s，60℃、1 min 50循環(huán)(每個(gè)樣品重復(fù)3次)。用Primer5軟件設(shè)計(jì)引物，miRNA-21的引物序列為：上游5'-GCCCATCCTCAAATACAAAGC-3'，下游 5'-GGTCCTGAACACAAAATGAGC-3'，擴(kuò)增產(chǎn)物為335 bp；miRNA-1的引物序列為：上游：5'-AGCGGCAGAATCAGGAGTA-3'，下游：5'-GAGGACCTTGGAGGCAGAC-3'，產(chǎn)物350 bp；以β-actin作為內(nèi)參照，其上游序列為5'-CTCATTGACAATGGTGAT-3'，下游序列為5'-ACCGAG CGCGGCTACAGC-3'，擴(kuò)增產(chǎn)物為650 bp。

1.2.7 基因片段序列測(cè)定和分析 使用測(cè)序儀對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行序列測(cè)定。將結(jié)果通過BLAST軟件與GenBank中的已知序列進(jìn)行同源性相符比較。

1.2.8 miRNA表達(dá)量測(cè)定 對(duì)擴(kuò)增的目的片斷進(jìn)行凝膠電泳，通過紫外光凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行掃描并記錄，測(cè)定各組的cDNA的特異性。miRNA-1、miRNA-21表達(dá)量用Ct變化值(△Ct)表示。△Ct= (HVCT)Ct-(Xn)Ct，(HVCT)Ct是內(nèi)參照的Ct平均值，(Xn)Ct表示每個(gè)受試對(duì)象的Ct值。miRNA的相對(duì)表達(dá)量為2-△ct，miRNA-1、miRNA-21電泳見圖2、圖3。

圖2 不同病變組織miRNA-1表達(dá)

圖3 不同病變組織miRNA-21表達(dá)

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以(±s)表示，組間差異的比較采用t檢驗(yàn)分析。相關(guān)性分析用Pearson法。建立受試者工作曲線(ROC曲線)來評(píng)價(jià)血清miRNA-1、miRNA-21表達(dá)在診斷PCI術(shù)后再狹窄發(fā)生中的意義。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的IVUS檢查結(jié)果比較 與未狹窄組比較，再狹窄組斑塊面積顯著增高(P=0.000)，EEM和MLA顯著降低(P=0.000)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 兩組患者的IVUS結(jié)果比較(±s)

表1 兩組患者的IVUS結(jié)果比較(±s)

組別再狹窄組未狹窄組t值P值例數(shù)37 33 EEM(mm2) 9.97±2.17 13.66±2.28 6.35 0.000斑塊面積(mm2) 11.28±2.75 6.13±1.90 10.29 0.000 MLA(mm2) 3.78±1.87 6.07±2.07 7.78 0.000

2.2 各組受檢者血清中miRNA-1和miRNA-21表達(dá)量比較 與對(duì)照組比較，再狹窄組miRNA-1表達(dá)量顯著下調(diào)，miRNA-21表達(dá)量則顯著上調(diào)，其差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；與未狹窄組比較，再狹窄組miRNA-1表達(dá)量顯著下調(diào)，miRNA-21表達(dá)量顯著上調(diào)，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見表2。

表2 各組受檢者血清中miRNA-1和miRNA-21表達(dá)量比較(±s)

表2 各組受檢者血清中miRNA-1和miRNA-21表達(dá)量比較(±s)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.01，bP＜0.01；與再狹窄組比較，cP＜0.01。

組別對(duì)照組再狹窄組未狹窄組例數(shù)33 37 33 miRNA-21 0.20±0.03 0.85±0.15a 0.36±0.08bcmiRNA-1 0.91±0.13 0.23±0.05a0.35±0.09bc

2.3 相關(guān)性分析 再狹窄組的血清miRNA-21與miRNA-1水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.657，P＜0.01)。再狹窄組miRNA-21分別與EEM、斑塊面積和MLA有明顯的相關(guān)性(r=-0.588，P＜0.01；r=0.583，P＜0.01；r=-0.608，P＜0.01)；再狹窄組miRNA-1分別與EEM、斑塊面積和 MLA有相關(guān)性(r=0.613，P＜0.01；r=-0.605，P＜0.01；r=0.593，P＜0.01)。

2.4 ROC曲線分析 以再狹窄組和未狹窄組為因變量，血清miRNA-21水平的AUC為0.751(95%CI：0.687～0.892，P=0.000)；血清miRNA-1水平的AUC為0.722(95%CI：0.679～0.883，P=0.000)。根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果計(jì)算出miRNA-21在最佳臨界值處診斷PCI術(shù)后再狹窄發(fā)生及狹窄程度監(jiān)測(cè)的敏感性和特異性為96.9%和95.3%，miRNA-1的敏感性和特異性為90.6%和95.3%。以上提示血清miRNA-1、miRNA-21表達(dá)水平對(duì)PCI術(shù)后再狹窄的發(fā)生有診斷意義。ROC曲線見圖4。

圖4 miRNA-1、miRNA-21 ROC曲線

3 討 論

目前臨床上采用冠狀動(dòng)脈支架介入術(shù)來治療冠脈狹窄所導(dǎo)致的缺血性心臟病。但介入術(shù)后半年內(nèi)擴(kuò)張部位往往出現(xiàn)再狹窄，有報(bào)道認(rèn)為其發(fā)生率有20%～30%。藥物涂層支架使用后雖然降低了再狹窄的發(fā)生，但其發(fā)生率還有10%左右[1]。因此，冠狀動(dòng)脈支架介入術(shù)后再狹窄(ISR)的早期診斷成為目前的研究熱點(diǎn)。研究表明支架介入術(shù)容易引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。這種損傷引起機(jī)體的自我修復(fù)，而修復(fù)過度則可能引起血管再狹窄[1]。PCI治療過程中導(dǎo)致動(dòng)脈血管壁的直接損傷，可能引起炎癥反應(yīng)的發(fā)生、血栓形成以及血管內(nèi)膜過度增殖等。血管壁的這些變化最終引起血管新生內(nèi)膜形成及血管重塑，導(dǎo)致PCI術(shù)后再狹窄的發(fā)生。研究認(rèn)為再狹窄形成的主要機(jī)制是血管內(nèi)膜過度增殖所致[5-7]。

miRNA-21是miRNA家族中的亞型之一，其具有典型的基因編碼區(qū)域，且不受到其他基因編碼區(qū)域啟動(dòng)子的限制，而存在其自身的啟動(dòng)子區(qū)域。研究認(rèn)為miRNA-21在多種病理狀態(tài)下(如腫瘤、心血管疾病等)呈現(xiàn)過表達(dá)[8-10]。有報(bào)道顯示miRNA-21在血管平滑肌、內(nèi)皮細(xì)胞及心肌細(xì)胞中均有表達(dá)，并在不同的心臟疾病中呈現(xiàn)不同的作用[11-14]。Ji等[15]對(duì)大鼠頸動(dòng)脈球囊血管成形術(shù)后miRNA基因表達(dá)譜的研究發(fā)現(xiàn)miRNA-21表達(dá)明顯上調(diào)。他們?cè)趯?shí)驗(yàn)中去除平滑肌細(xì)胞中的miRNA-21，結(jié)果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖減少、而細(xì)胞凋亡增加。因此認(rèn)為在平滑肌細(xì)胞中miRNA-21對(duì)細(xì)胞增殖有促進(jìn)作用，而對(duì)細(xì)胞凋亡有拮抗作用，進(jìn)而影響血管壁新生內(nèi)膜的形成，參與血管狹窄發(fā)生的病理過程。本文結(jié)果顯示冠脈支架術(shù)后再狹窄組患者血清miRNA-21水平明顯增高(P＜0.01)，表明冠脈介入術(shù)后發(fā)生再狹窄患者的冠狀動(dòng)脈血管內(nèi)膜出現(xiàn)過度增殖，推測(cè)其可能是導(dǎo)致再狹窄發(fā)生的主要原因。miRNA-21在缺血性心臟病方面的研究還處于起步階段，尤其在PCI術(shù)后再狹窄方面的作用還存在爭(zhēng)議。隨著科學(xué)研究的快速發(fā)展及對(duì)miRNA-21研究的不斷深入，相信該標(biāo)志物在缺血性心臟病防治及ISR發(fā)生中的應(yīng)用值得期待。

以往研究顯示，miRNA-1是一類肌細(xì)胞特異性miRNA，其過度表達(dá)可抑制心室肌細(xì)胞的增殖[16-18]。張亦等[19]通過RT-PCR實(shí)驗(yàn)證實(shí)在動(dòng)脈粥樣硬化閉塞癥及血管重建術(shù)后再狹窄患者的病變動(dòng)脈中，miRNA-1的表達(dá)量較正常動(dòng)脈明顯下調(diào)，再狹窄患者的下調(diào)更為顯著。心肌細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞是心血管系統(tǒng)兩類主要的功能細(xì)胞，血管平滑肌細(xì)胞存在于血管中膜，其作用為影響血管活力、維持血管張力及參與血管重塑等。血管平滑肌細(xì)胞根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能的不同可分為兩個(gè)表型，即收縮型和合成型。研究認(rèn)為在動(dòng)脈粥樣硬化閉塞癥及血管再狹窄的病理過程中，血管平滑肌細(xì)胞可由收縮型向合成型轉(zhuǎn)化，并分泌大量細(xì)胞因子，引起血管平滑肌細(xì)胞異常增殖，導(dǎo)致血管壁增厚管腔變狹窄[20]。最近的研究認(rèn)為，miRNA-1在人主動(dòng)脈收縮型血管平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)較其在合成型中的表達(dá)顯著增高，進(jìn)而調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞的收縮力及增殖水平[21-22]。以上顯示miRNA-1可能與血管再狹窄的病理過程有關(guān)。本文通過比較PCI術(shù)后兩組miRNA-1的表達(dá)水平顯示再狹窄組的miRNA-1表達(dá)降低，預(yù)示患者PCI術(shù)后的血管內(nèi)膜過度增殖進(jìn)而引起血管新生內(nèi)膜形成，其結(jié)果可能導(dǎo)致血管重塑，引起血管再狹窄。

再狹窄組的miRNA-21和miRNA-1表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，兩標(biāo)志物水平分別與EEM、斑塊面積和MLA有明顯相關(guān)性。提示兩標(biāo)志物水平與PCI術(shù)后再狹窄的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，其可能參與再狹窄的發(fā)病機(jī)制。建立ROC曲線分析顯示miRNA-21和miRNA-1表達(dá)在診斷PCI術(shù)后再狹窄的發(fā)生中有臨床意義，其在最佳臨界值處也有較高的特異性和敏感性。因此筆者認(rèn)為miRNA-21和miRNA-1表達(dá)水平變化對(duì)于PCI術(shù)后是否再狹窄的鑒別有一定意義，對(duì)于再狹窄的早期檢出有診斷意義。

綜上所述，檢測(cè)血清miRNA-21和miRNA-1表達(dá)對(duì)ISR的預(yù)測(cè)和PCI術(shù)后的療效觀察具有重要的意義，可能為ISR的診斷和治療開辟新的途徑。

[1]Choi IJ,Park HJ,Seo SM,et al.Predictors of early and late target lesion revascurilazition after drug-eluting stent implantation[J].J Interv Cardiol,2013,26(2):137-144.

[2]蘇強(qiáng),李浪.微小核糖核酸-21與缺血性心臟病關(guān)系的研究進(jìn)展[J].中國(guó)循環(huán)雜志,2013,28(5):390-392.

[3]Bentwich I,Avniel A,Karov Y,et al.Identification of hundreds of conserved and nonconserved human microRNAs[J].Nat Genet, 2005,37(7):766-770.

[4]Mitchell PS,Parkin RK,Kroh EM,et al.Circulating microRNAs as stable blood based markers for cancer detection[J].Proc Natl Acad Sci USA,2008,105(30):10513-10518.

[5]夏章勇,楊華,曲懷謙,等.頸動(dòng)脈支架置人術(shù)后內(nèi)皮功能的變化及與再狹窄的相關(guān)研究[J].中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志,2011,10(5): 452-455.

[6]Yari F,Azadpour S,Shiri R.Platelet storage media change the expression characteristics of the platelet-derived microparticles[J].Indian J Hematol Blood Transfus,2014,30(3):169-174.

[7]Kumar MA.Coagulopathy associated with traumatic brain injury[J]. Curr Neurol Neurosci Rep,2013,13(11):391.

[8]Cai X,Hagedorn CH,Cullen BR.Human microRNAs are processed from capped,polyadenylated transcripts that can also function as mRNAs[J].RNA,2004,10(12):1957-1966.

[9]Fujita S,Ito T,Mizutani T,et al.miR-21 gene expression triggered by AP-1 is sustai-ned through adouble-negative feedback mechanism [J].J Mol Biol,2008,378(3):492-504.

[10]lagos-Quintana M,Rauhut R,Yalcin A,et al.Identification of tissuespecific micmRNAs from mouse[J].Curr Biol,2002,12(9): 735-739.

[11]Song Jt,Hu B,Qu Hy,et al.Mechanical stretch modulates micro RNA-21 expression,participating in proliferation and apeptosis in cultured human aortic smooth muscle cells[J].PLoS One,2012,7 (10):e47657.

[12]Sabatel C,Malvaux L,Bovy N,et al.MicroRNA-21 exhibits antiangiogenic function by targeting RhoB expression in endothelial cells [J].PLoS One,2011,6(2):e16979.

[13]Qin Y,Yu Y,Dong H,et al.MicroRNA-21 inhibits left ventricular remodeling in the early phase of rat model with ischemia reperfusion injury by suppressing cell apoptosis[J].Int J Med Sci,2012,9(6): 413-423.

[14]Liang H,Zhang C,Ban T,et al.A novel reciprocal loop between microRNA-21 and TGFbetaRIII is involved in cardiac fibrosis[J].Int JBiochem Cell Biol,2012,44(12):2152-2160.

[15]Ji R,Cheng Y,Yue J,et al.microRNA expression signature and antisense-mediated epletion reveal an essential role of microRNA in vascular neointimal lesion formation[J].Circ Res,2007,100(11): 1579-1588.

[16]Chen JF,Tao Y,Li J.microRNA-1 and microRNA-206 regulate skeletal muscle satellite cell proliferation and differentiation by repnmilIs Pax7[J].J CeU Biol,2010,190(5):867-879.

[17]Sayed D,Hong C,Chen IY,et al.MicroRNAs play an essential role in the development of cardiac hypertrophy[J].Circ Res,2007,100 (3):416-424.

[18]Takaya T,Ono K,Kawamura T,et al.MicroRNA-l and microRNA-133 in spontaneous myocardial differentiation of tnotlme embryonic stem cells[J].Cite J,2009,73(8):1492-1497.

[19]張亦,黃英,李維敏,等.動(dòng)脈重建術(shù)后再狹窄相關(guān)miRNA表達(dá)譜分析及靶基因鑒定[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,2012,29(3):535-538.

[20]Haler H,Lindschau C,Quass P,et al.Differentiation of vascular smooth muscle cells and the regulation of protein kinase C-alpha[J]. Circ Res,1995,76(1):2l-29.

[21]Jiang Y,Yin H,Zheng XL.MicroRNA-1 inhibits myocardin-induced contractility of human vascular smooth muscle cells[J].J Cell Physiol,2010,225(2):506-511.

[22]Chen J,Yin H,Jiang Y,et al.Induction of microRNA-1 by myocmdin in smooth muscle cells inhibits cell proliferation[J].Arterioscler Thromb Vase Biol,20l0,3l(2):368-375.

Value of the expression of miRNA-1,miRNA-21 in serum for predicting in-stent restenosis of expanded area after percutaneous coronary intervention.

LA Mei1,YANG Deng-kui2,LI Jiang1.Department of Laboratory1, Department of Cardiology2,Xianyang Hospital of Yan'an University,Xianyang 712000,Shaanxi,CHINA

ObjectiveTo explore the clinical predictive value of the expression of miRNA-1,miRNA-21 in serum for the in-stent restenosis(ISR)of expanded area after percutaneous coronary intervention(PCI)in half a year.MethodsFrom May 2014 to May 2016,70 patients with coronary heart disease undergoing PCI(37 patients in ISR group and 33 patients in non-ISR group)were selected from Xianyang Hospital of Yan'an University and received intravascular ultrasound(IVUS)examination.At the same time,33 healthy volunteers were enrolled as the control group.The levels of serum miRNA-1,miRNA-21 were measured,compared,and analyzed byttest,Pearson correlation analysis and ROC curve.ResultsThe levels of miRNA-1 in ISR group,non-ISR group and control group were(0.23±0.05), (0.35±0.09),(0.91±0.13),respectively,and the miRNA-21 levels were(0.85±0.15),(0.36±0.08),(0.20±0.03),respectively.The level of miRNA-1 in ISR group was significantly lower than that in the control group(P＜0.01),while miRNA-21 were significantly higher(P＜0.01).The level of miRNA-1 in ISR group was significantly lower in comparing with that in non-ISR group,while miRNA-21 were significantly higher(P＜0.01).The results from IVUS examination showed that in the ISR group,external elastic membrane(EEM),plaque area(PLA)and the minimal lumen area(MLA) were,respectively,(9.97±2.17)mm2,(11.28±2.75)mm2,(3.78±1.87)mm2,as compared with(13.66±2.28)mm2,(6.13± 1.90)mm2,(6.07±2.07)mm2in non-ISR group,with statistically significant differences.The level of miRNA-21 in the ISR group had a significant correlation with EEM,PLA and MLA(r=-0.588,P＜0.01;r=0.583,P＜0.01;r=-0.608,P＜0.01),and miRNA-1 also showed a significant correlation with EEM,PLA and MLA(r=0.613,P＜0.01;r=-0.605,P＜0.01;r=0.593,P＜0.01).There was a negative correlation between the levels of miRNA-1,miRNA-21 in the ISR group (r=-0.657,P＜0.01).The results from ROC curve analysis showed that AUC of the levels of serum miRNA-21 was 0.751(95%CI:0.687-0.892,P=0.000),and that of serum miRNA-1 was 0.722(95%CI:0.679-0.883,P=0.000). SPSS statistics showed that the sensitivity and specificity on the best critical value in diagnosing the occurrence of restenosis after PCI and monitoring stenosis degree were,respectively,96.9%and 95.3%(miRNA-21),90.6%and 95.3%(miRNA-1).ConclusionThe detection of the levels of miRNA-1,miRNA-21 can predict the occurrence of restenosis of expanded area in postoperative patients with PCI.

Percutaneous coronary intervention;miRNA-1;miRNA-21;Restenosis

R654.2

A

1003—6350（2017）06—0923—05

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.06.022

2016-08-22)

剌梅。E-mail：3248089878@qq.com