葡萄胎中E-cadherin和Laminin的表達及臨床意義

張力鵬，丁巖

(新疆醫科大學第一附屬醫院，新疆 烏魯木齊 830054)

葡萄胎中E-cadherin和Laminin的表達及臨床意義

張力鵬，丁巖

(新疆醫科大學第一附屬醫院，新疆 烏魯木齊 830054)

目的探討E-cadherin和Laminin對部分性葡萄胎、完全性葡萄胎和侵蝕性葡萄胎的診斷價值。方法收集2005年1月至2016年3月新疆醫科大學第一附屬醫院婦科75例患者的葡萄胎組織，石蠟包埋組織，采用免疫組化SP法檢測包埋組織中E-cadherin和Laminin的表達水平，其中部分性葡萄胎25例，完全性葡萄胎36例，侵蝕性葡萄胎14例。結果按部分性葡萄胎、完全性葡萄胎和侵蝕性葡萄胎順序，E-cadherin陽性檢出率分別為88.0%(22/25)、69.4%(25/36)和35.7%(5/14)，表達依次降低，差異有統計學意義(χ2=11.539，P=0.003)；Laminin陽性檢出率分別為84.0%(21/25)、72.2%(26/36)和28.6%(4/14)，表達依次降低，差異有統計學意義(χ2=12.648，P= 0.002）。結論免疫組化法分析E-cadherin和Laminin可以作為不同類型葡萄胎傳統診斷方法的輔助手段。

葡萄胎；E-cadherin；Laminin；免疫組織化學；SP法

臨床上妊娠滋養細胞疾病最常見的一種類型是葡萄胎，如未做出及時診治，有發展為侵蝕性葡萄胎甚至絨癌的風險，血清HCG主要用于妊娠的診斷，雖然在妊娠滋養細胞相關疾病具有一定的診斷價值，但其作為診斷手段的特異性仍不強，所以，尋找早期預測葡萄胎轉移及惡變的指標顯得尤為重要。近年研究表明，上皮型粘鈣素(E-cadherin)和層黏連蛋白(Laminin，LN)異常表達與腫瘤轉移、分化及惡變密切相關[1-3]。本文采用免疫組化法檢測75例葡萄胎患者病變組織中E-cadherin和LN的表達，以期對其分型、侵蝕及進行早期預測。

1 資料與方法

1.1 對象 選擇2005年1月至2016年3月在新疆醫科大學第一附屬醫院婦科就診的葡萄胎患者75例，所有病例均經病理檢查確診。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 選取每一例葡萄胎患者的病變組織，分裝后送病理檢查。石蠟包埋組織切片厚度為4 μm。

1.2.2 病理處理 將確診為葡萄胎患者的病理組織進行免疫組織化學SP法檢測E-cadherin和Laminin的表達。免疫組化試劑盒、E-cadherin和Laminin抗體均購自北京中山生物技術有限公司，設陰、陽性對照，實驗步驟均參照試劑盒說明進行，在顯微鏡下觀察到棕黃色顆粒為陽性細胞，每張病理切片均隨機選擇10個不同象限視野，對每個不同視野的陰、陽性細胞進行計數，陽性細胞占細胞總數＜5%為-，5%～25%為+，25%～50%為++，＞75%為+++。

1.3 統計學方法 采用Excel錄入數據，SPSS19.0統計軟件進行數據統計處理，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 基本情況 75例入選患者均未絕經，月經史規律，此前均無妊娠滋養細胞病史，年齡22～43歲，平均年齡32.5歲。經產婦33例，有孕無育史42例(首次妊娠37例，5例未婚)。停經時間6～20周，其中＞12周21例，8～12周36例，6～8周18例。

2.2 E-cadherin在不同類型葡萄胎組織中的表達 E-cadherin在葡萄胎中的表達：(1)在葡萄胎組織中，E-cadherin通常在滋養細胞間的連接部位進行表達(圖1A)，(2)侵蝕性葡萄胎組織中，E-cadherin染色明顯變淡，染色呈不連續性或點狀著色，陽性表達率明顯下降，且多為弱陽性表達(圖1B)。

2.3 Laminin在不同類型葡萄胎組織中的表達 Laminin在葡萄胎組織中的表達：(1)典型葡萄胎組織中，Laminin主要表達于胎盤絨毛滋養層上皮基底膜(圖1C)；(2)基底膜完整性缺失，Laminin的表達也從圖1C的連續線性發展為間斷和部分缺失，表現為表達下降(圖1D)。

2.4 E-cadherin和Laminin在不同類型葡萄胎組織的表達比較 E-cadherin和Laminin在部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蝕性葡萄胎中的表達逐漸減少，陽性率差異均有統計學意義（P＜0.05），見表1。

圖1 E-cadherin與Laminin在不同類型葡萄胎組織中的表達(×400)

表1 不同類型組織中E-cadherin和Laminin表達比較(例)

3 討 論

部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蝕性葡萄胎作為葡萄胎的重要組成部分，前二者雖無惡性行為，但如果未能及時診治，有10%～20%的概率發展為侵蝕性葡萄胎甚至絨癌等。葡萄胎預后又與其組織學類型及分化程度密切相關，故通過各種方式對影響其惡變因素進行早期預測是提高葡萄胎治愈率、降低惡變率的關鍵。本實驗選取了兩個與腫瘤轉移、分化及惡變相關的標記物E-cadherin和Laminin[1-3]，以了解其表達改變與葡萄胎發生發展的關系。

E-鈣粘附素(E-cadherin)是一種協助同類細胞間互相粘附的鈣依賴跨膜糖蛋白，對介導細胞連接非常重要。本研究顯示，E-cadherin在部分性葡萄胎、完全性葡萄胎及侵蝕性葡萄胎中的表達從高到低，在侵蝕性葡萄胎中明顯減少，與先前報道[4-5]相似，表明其與葡萄胎的發生發展有一定的關聯。這一結論可能是隨著葡萄胎增殖程度的增加，鈣粘素表達下降，增加了滋養細胞的侵蝕性，對母體造成過度侵襲、使滋養細胞間的粘附連接減弱，從而使細胞容易脫落、離散、遠處轉移，致使普通葡萄胎向侵蝕性葡萄胎及絨癌轉變。但是，據Wang等[6]報道，E-cadherin在不同葡萄胎組織中表達差異無統計學意義(P＞0.05)。Erol等[7]報道，E-cadherin、p53、Inhibin-α聯合可以作為傳統方法區分不同類型葡萄胎的一種輔助手段。

先前報道表明，Laminin(LN)在正常絨毛組織和葡萄胎組織中均有表達[8]。本研究的75例葡萄胎組織中，隨著葡萄胎增殖程度的增加，LN的表達從連續線性發展為間斷缺失，表達下降，而基底膜部分缺失又與腫瘤的侵襲性密切相關。因此，提示LN的表達在葡萄胎發展及侵襲中起一定作用，這與崔彩蓮等[9]報道一致。本研究中，LN與葡萄胎的病理變化相關，而安瑞芳等[10]報道恰恰相反，LN只與孕周存在一定的關聯，這可能與兩個研究所選擇的人群不同有關。

目前代表葡萄胎滋養細胞發生惡變的一類指標，通過檢測其在不同葡萄胎組織中的表達強度，可以輔助傳統檢測方法對葡萄胎類型做出準確及時的診斷，以期達到合理有效的診治，降低其惡變率，提高生存率的目的。

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Immunohistochemical analysis of E-cadherin and Laminin in hydatidiform mole.

ZHANG Li-peng,DING Yan.The First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,Xinjiang,CHINA

ObjectiveTo investigate the role of E-cadherin and Laminin in the differential diagnosis of partial hydatidiform mole(PHM),complete hydatidiform mole(CHM)and invasive hydatidiform mole(IHM).MethodsFrom January 2005 to March 2016,75 cases of hydatidiform mole tissues were collected in Department of Gynaecology,the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University.Hydatidiform mole tissues were paraffin embedded.E-cadherin and Laminin expression were investigated by immunohistochemically SP methods in paraffin-embedded tissue sections, including diagnosed cases of PHM(n=25),CHM(n=36)and HA(n=14).ResultsFrom PHMs to CHMs to IHMs,positive detection rate of E-cadherin were 88.0%(22/25),69.4%(25/36)and 35.7%(5/14)respectively,with statistically significant differences(χ2=11.539,P=0.003).Positive detection rate of E-cadherin were 84.0%(21/25),72.2%(26/36)and 28.6%(4/14)respectively,and there were statistically significant differences(χ2=12.648,P=0.002).ConclusionImmunohistochemical analysis of E-cadherin and Laminin expression could serve as a useful adjunct to conventional methods in the differential diagnosis of PHM,CHM and IHM.

Hydatidiform mole;E-cadherin;Laminin;Immunohistochemistry;SP method

R737.33

A

1003—6350（2017）06—0875—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.06.004

2016-10-02)

國家自然科學基金（編號：81660249）

丁巖。E-mail：ddy8930@126.com