紫外分光光度法測定參芪三七膠囊中總皂苷含量

岳展鵬，王賢英

(1.重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院，重慶 400014；2.重慶市中藥研究院，重慶 400065)

·檢驗檢測·

紫外分光光度法測定參芪三七膠囊中總皂苷含量

岳展鵬1，王賢英2

(1.重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院，重慶 400014；2.重慶市中藥研究院，重慶 400065)

目的建立測定參芪三七膠囊中總皂苷含量的紫外分光光度法。方法采用紫外分光光度儀，于542 nm波長處，以高氯酸顯色法測定總皂苷含量。結果總皂苷質量濃度在6.87～41.22 g／mL范圍內與峰面積線性關系良好，Y＝0.015 54 X＋0.002 9，r＝0.999 6 (n＝6)，平均回收率為98.32%，RSD為1.08%(n＝9)。結論該方法簡單、易操作、重復性良好，可用于測定參芪三七膠囊中總皂苷的含量，可用于參芪三七膠囊的質量控制。

參芪三七膠囊；總皂苷；含量測定

參芪三七膠囊是由西洋參、黃芪、三七組方的保健食品，主要功效為增強免疫力。西洋參為五加科植物西洋參的根，具有養(yǎng)陰潤肺、清心安神的功效，用于營養(yǎng)、滋補、抗疲勞、養(yǎng)胃生津[1－2]。黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，味甘，性溫，主歸脾肺二經，具有補中益氣、健脾益肺、托毒生肌之功效。研究表明，黃芪的主要化學成分有皂苷類、多糖、黃酮類具有可提高免疫功能、抗輻射、抗癌、抗氧化、舒張血管平滑肌等作用[3]。三七為五加科植物三七的根，具有散瘀止血、消腫止痛之功效，用于改善血液系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)功能，以及滋補強壯、調節(jié)免疫等[4－6]。西洋參和三七同科、同屬，為親緣關系，化學成分相似，種類大體相同，均含有人參皂苷類成分，如人參皂苷(ginsenoside)Rg1，Rg2，Re，Rb1等。西洋參中以人參二醇型皂苷為主，人參皂苷Rb1含量(2.2129%）最高，三七中人參皂苷Rg1（2.632 6%）和人參皂苷Rb1（2.162 6%）含量都很高[6]。為此，本研究中建立以人參皂苷Rb1作為對照品來測定本品總皂苷的含量方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV－2006型紫外－可見分光光度計(日本島津公司)；AB265－S型電子分析天平(瑞士梅特勒公司)；SK250LH型超聲波清洗儀（上海科導超聲儀器有限公司）；KW系列恒溫水浴鍋（上海必爾得儀器實業(yè)有限公司）；LIM－40型低速大容量離心機(北京醫(yī)用離心機廠)。

1.2 試藥

試劑：冰醋酸、高氯酸、正丁醇、乙醇、氫氧化鈉、無水乙醇、香草醛均為分析純；人參皂苷Rb1對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為110704－201525）。

顯色劑：精密稱取香草醛0.5 g，冰醋酸溶解，移至10 mL容量瓶，并用冰醋酸稀釋至刻度，制得5%香草醛－冰醋酸溶液，臨用新配。

2 方法與結果[8－12]

2.1 溶液制備

對照品溶液：精密稱取人參皂苷Rb1對照品20.61mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，配制成質量濃度為2.061 g／L的對照品溶液。

供試品溶液：取參芪三七膠囊20粒，取囊內容物約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加水飽和正丁醇50mL，密塞，超聲處理30 min，再完全移至圓底燒瓶中，加水飽和正丁醇50 mL，加熱回流30 min，趁熱過濾至分液漏斗中，用1%NaOH溶液洗滌2次，每次15 mL，靜置分層，取正丁醇層，揮干溶劑，用甲醇移至100 mL容量瓶，加甲醇至刻度，搖勻；精密吸取10 mL溶液，置25 mL容量瓶，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.2 測定波長選擇

取人參皂苷Rb1對照品溶液，稀釋成0.206 1 g／L，按標準曲線制備項下方法顯色后，進行全波長掃描。結果見圖1，最終選取最大吸收波長542 nm作為測定波長。

圖1 人參皂苷Rb1波長掃描紫外光譜圖

2.3 測定方法

精密量取供試品溶液1 mL置具塞試管，平行6份，水浴揮干溶劑，精密加入新鮮配制的5%香草醛－冰醋酸溶液0.2 mL、高氯酸0.8 mL顯色，在60℃水浴中保溫15 min，立即置冰水浴中冷卻5 min，加入冰醋酸5.0 mL，搖勻，用相應試劑平行操作，作為空白溶液，按照2015年版《中國藥典（四部）》紫外－可見分光光度法(附錄ⅤA)于542 nm波長處測定吸光度。

對高校思想政治教育的環(huán)境進行系統(tǒng)的分析，不僅僅是表面上的宏觀的環(huán)境，還應該深入的分析圍觀的環(huán)境，分析各種要素之間的相互關系和相互的作用，使其教育功能發(fā)揮到最大。高校思想政治教育是在一定的社會中進行的，因此影響思想政治教育環(huán)境最主要的因素就是社會環(huán)境。一定的社會具有一定的經濟、政治、文化制度和環(huán)境。這三個層面相互作用，形成了思想政治教育環(huán)境的物質要素、制度要素和精神要素。由社會的經濟環(huán)境、政治環(huán)境和文化環(huán)境形成的思想政治教育要素結構，與思想政治教育層次結構相互滲透、相互影響、相互作用，形成了思想政治教育環(huán)境的特征，即多維性、復雜性、開放性。

2.4 方法學考察

線性關系考察：精密吸取對照品溶液20，40，60，80，100，120 μL，置6支具塞試管中，水浴揮干溶液，分別精密加入新鮮配制的5%香草醛－冰醋酸溶液0.2 mL、高氯酸0.8 mL顯色，在60℃水浴中保溫15 min，立即置冰水浴中冷卻5 min，加入冰醋酸5.0 mL，搖勻，用相應試劑平行操作，得空白對照溶液。于542 nm波長處測定吸光度，得回歸方程Y＝0.015 54 X＋0.002 9，r＝0.999 6(n＝6)。結果表明，人參皂苷Rb1質量濃度在6.87～41.22 μg／mL范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗：依法制備對照品溶液，于542 nm波長處測定吸光度。結果的RSD為1.52%(n＝6)，表明儀器精密度良好。

重復性試驗：分別精密稱取6份樣品，每份0.5 g，依法測定總皂苷含量（以人參皂苷Rb1計）。結果的RSD為1.25%(n＝6)，表明方法重復性良好。

穩(wěn)定性試驗：依法制備供試品溶液，于542 nm波長處測定吸光度。結果供試品溶液在8 h內穩(wěn)定。樣品溶液顯色后的穩(wěn)定性考察方法同前，每隔10 min于542 nm波長處測定吸光度。顯色后的供試品溶液在90 min內基本穩(wěn)定，結果的RSD為1.93%(n＝6)。

加樣回收試驗：精密稱取重復性試驗項下樣品（含量1.63%）9份，每份0.25 g，置100 mL置具塞錐形瓶中，在每3份樣品中分別加入1.0，2.0，3.0 mL人參皂苷Rb1對照品溶液(2.061 g／L)，依法于542 nm波長處進行測定，測得總皂苷含量(以人參皂苷Rb1計)。結果見表1。

表1 總皂苷加樣回收試驗結果（n＝9）

2.5 樣品含量測定

按擬定方法測定3批參芪三七膠囊樣品中總皂苷的含量，結果見表2。

表2 參芪三七膠囊總皂苷含量測定結果（%）

3 討論

3.1 比色法選擇

曾比較了香草醛－冰醋酸－高氯酸和香草醛－乙醇－高氯酸比色法，結果顯示，香草醛－乙醇－高氯酸法顯色過快，難以控制；香草醛－冰醋酸－高氯酸比色法顯色明顯，無干擾，顯色穩(wěn)定。故采用香草醛－冰醋酸－高氯酸比色法進行測定。

3.2 對照品選擇

比較了人參皂苷Re、人參皂苷Rb1為對照品測定樣品中總皂苷的含量，結果以人參皂苷Rb1為對照品測定樣品中總皂苷的含量明顯高于以人參皂苷Re為對照品測定樣品中總皂苷的含量。

3.3 方法優(yōu)勢

紫外分光光度法作為一種常用的分析方法，在中藥質量分析中大量應用[13－15]，具有快速、簡單、良好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性及結果準確[16－17]。本研究中采用紫外－可見分光光度法測定參芪三七膠囊總皂苷的含量，精密度、重復性和準確度好，可作為其質量控制方法。

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Content Determination of Total Saponins in Shenqi Sanqi Capsules by Ultraviolet Speetrophotometry

Yue Zhanpeng1,Wang Xianying2
(1.Children′s Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing,China400014; 2.Chongqing Academy of Chinese Medicine,Chongqing,China400065)

Objective To determine the content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules.M ethodsThe content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules was determined by an ultraviolet－visible speetrophotometer at 542 nm with perchloric acid as the ehromogenie reagent.ResultsThe total saponins was linear in the range of 6.87－41.22 μg／mL,Y＝0.015 54 X＋0.002 9,r＝0.999 6(n＝6), and the average recovery rate was 98.32%,RSD＝1.08%(n＝9).ConclusionThe determination method of total saponins is simple, fast,accurate with high sensitivity as well as good repeatability,which can be applied for qualitative discrimination of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules.

Shenqi Sanqi Capsules;total saponins;content determination

R284.1；R286.0

A

1006－4931(2017)01－0022－03

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.01.007

2016－10－14)

岳展鵬（1977－），男，藥師，主要從事門診藥房調劑工作，（電子信箱）415995220＠qq.com。

王賢英（1973－），女，副主任中藥師，主要從事藥品開發(fā)及質量標準研究，（電子信箱）wangxianying＿315＠163.com。