鹿炭疽病原學檢疫及其防控措施

叢明智，劉 墨

（ 1.吉林省松原市寧江區動物疫病預防控制中心，吉林 松原 138001，2.吉林省松原市寧江區動物衛生監督所，吉林 松原 138001）

鹿炭疽病原學檢疫及其防控措施

叢明智1，劉 墨2

（ 1.吉林省松原市寧江區動物疫病預防控制中心，吉林 松原 138001，2.吉林省松原市寧江區動物衛生監督所，吉林 松原 138001）

炭疽是由炭疽桿菌引起的急性、熱性、敗血性人畜共患傳染病。本病呈世界性分布，我國西部地區發病較多，東北近年來很少有大規定疫情。其臨床特征是突然發生高熱，昏迷倒臥，天然孔出血，可視黏膜發紺，很快死亡。炭疽桿菌可以在凍尸中存活上百年，在解凍之后即可以進入地下水。人畜一旦飲用就可導致炭疽病爆發，因此要高度重視，全民防范。

1 病原學檢疫

根據流行病學、臨床癥狀和病理剖檢變化，只能做出初步診斷。確診必須采取病料送實驗室作細菌學和血清學檢查。

病料的采集和處理。有懷疑炭疽死亡的病鹿，嚴禁剖檢。因此，對疑似為炭疽死亡的病例病料采取，一般用耳或末梢血涂片送檢。用耳和末梢血涂片后火焰加熱固定，裝入盒內送實驗室染色鏡檢。對已剖開的尸體，取脾臟，必要時也可將皮、皮毛、骨粉等產品或飼草、土壤送檢。取脾臟時，以無菌方法將脾臟取出并剪成3~5 cm方塊。放入預先消毒的并盛有滅菌的液體石蠟，30%甘油緩沖鹽水或飽和氯化鈉溶液容器中。在冷藏條件下寄出或送出病料，同時應附上尸檢記錄和有關說明。

炭疽桿菌的涂片標本觀察。血液、水腫液做涂片，脾或淋巴結做成擦片或壓片，自然干燥后，在火焰上固定，用美蘭或瑞特氏染液染色、鏡檢。炭疽桿菌在組織中的表現是單個的磚頭狀或2~5個短鏈的竹節狀桿菌，外有莢膜。在外界環境中的表現是長鏈條狀帶芽胞的革蘭氏陽性大桿菌。

病原分離培養方法：被檢血液、水腫液、脾髓等，用接種環蘸取適量，劃線，置37℃孵育18~24 h后，觀察有無表面粗糙、邊緣卷發狀的典型菌落生長。如有，可挑選個別菌落移植于肉湯內，孵育24 h后觀察。肉湯澄清，管底有細絨毛狀或絮狀生長物，輕搖不散，涂片鏡檢，可見到革蘭氏陽性大桿菌。皮毛、骨粉、土壤、飼料等，可剪碎或直接浸于適量肉湯中，經80℃水浴15 min，以后在37℃孵育18~24 h，觀察及鏡檢后在平板上劃線分離。

分離培養物的鑒定。培養特性：炭疽桿菌為需氧或兼性厭氧菌。對營養要求不嚴格，在一般培養基中即可生長，最適生長溫度為30~37℃，但在14~44℃也能生長，最適pH為7.2~7.6。普通培養基上培養18~24 h，形成扁平、灰白色、不透明、干燥、邊緣不整齊的火焰狀大菌落，用低倍鏡觀察菌落邊緣呈卷發狀；在血液瓊脂平板上生長，菌落周圍無明顯溶血環；明膠高層穿刺培養，呈倒立的松樹狀生長；普通肉湯培養基中生成白色絮狀沉淀，肉湯透明，不形成菌膜和菌環。

生化特性：本菌能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、果糖等，產酸不產氣；不分解乳糖和楊苷；能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，過氧化氫酶陽性。

菌體形態：菌體是一種長而粗的大桿菌，長3.0~10.0 μm、寬1.0~3.0 μm。菌體兩端平齊。在動物或人體內常成對或3~5個菌體連成竹節狀短鏈，其外被包厚的莢膜。在一般培養基或自然界中，則形成由10個菌體相連的長鏈，具有卵圓形，位于菌體中央，小于菌體橫徑的芽胞。本菌不產生鞭毛，不能運動。革蘭氏陽性。

動物接種試驗：① 材料準備：肉湯培養物及血液可直接作注射，脾髓則先在無菌研缽中研細，淋巴結則剪碎后研磨，研時可加滅菌的白細砂或玻璃粉，并徐徐加入5~10倍量的無菌鹽水，做成乳劑，靜置取上清或濾過后取濾液作注射材料。② 接種方法與劑量：一般用皮下注射法，小鼠0.1~0.2 mL、豚鼠0.2~0.5 mL、家兔0.2~1 mL。接種后分別置于鐵絲籠中，12 h后可見局部發生水腫；18~72 h后，動物死于敗血病。③ 死后剖檢：試驗動物死后應盡快剖檢，取心血和脾做分離培養，并做涂片或壓片鏡檢。在小鼠脾臟的壓片中，經瑞特氏染色后可見布滿莢膜的，呈短鏈或長鏈狀炭疽桿菌。動物尸體應立即焚毀，器械須經嚴格消毒。④ 快速檢驗法：以病死鹿的血液或滲出液0.2 mL或1：3~5稀釋度的組織乳劑，腹腔內注射于1~2只小鼠，同時皮下注射于另1只小鼠（或兔，皮下注射1 mL）。于注射后2、4、6 h，分次抽出腹腔滲出液（只要針頭上帶一點就夠了），涂片，染色鏡檢，觀察有無帶莢膜的大桿菌。小鼠于10 h死亡（遲的48 h），剪斷其尾，以斷尾涂片、染色、鏡檢。

2 防控措施

發現可疑病鹿，立即向上級衛生防疫部門匯報，同時采取隔離、消毒措施，對同群其他鹿注射抗生素進行預防性治療，并采用疫苗緊急接種等防范措施，控制疫情擴散和傳播，與之接觸過的飼養員、獸醫也要進行隔離，防止感染和傳播。

出現疑似炭疽病鹿時，應立即派獸醫到現場進行診斷，并對尸體做焚燒深埋處理，回填土中拌上生石灰，填滿填完后周圍再撒上一層生石灰，周圍設圈欄或警示標志，防止人畜誤入。被死鹿污染過的場地，能去土的先除去15~25 cm，再作新土拌均生石灰填埋覆蓋。不能去土的水泥地面、墻壁、用具等，全部用20%燒堿噴灑，每日4次，連續5~7 d。

對鹿場內已經感染的鹿堅決捕殺，并做無害化處理。對其他疑似鹿肌肉注射青霉素2萬U·只-1，連用5 d；同時接種無毒炭疽芽胞苗進行緊急預防。

對疫區、疫點實行隔離、封鎖，嚴禁動物及可能受到污染的畜產品出入，防止疫情擴散。采用多種形式向群眾宣傳炭疽病的防治常識，提高大家對本病的防范意識。開展轄區炭疽病的流行病學調查和監測，對近年來有過疫情的地區和相鄰周邊地區的家畜用無毒炭疽芽胞苗進行免疫注射，定期預防。不到疫區參觀、引種，堅持自繁自養，從源頭遏制各種病原菌。

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1001-0084（2017）11-0066-01

2017-10-17

叢明智（1990-），女，吉林松原人，助理獸醫師，主要從事動物疫控實驗室化驗工作。