呂洪國(guó)
(山東省招遠(yuǎn)市畜牧獸醫(yī)總站,山東 招遠(yuǎn) 265400)
鴕鳥(niǎo)衣原體病的臨床診斷和試驗(yàn)室檢疫
呂洪國(guó)
(山東省招遠(yuǎn)市畜牧獸醫(yī)總站,山東 招遠(yuǎn) 265400)
鴕鳥(niǎo)衣原體病是由鸚鵡衣原體引起的多種禽類(lèi)的一種接觸性自然疫源性傳染病。鸚鵡患本病曾稱鸚鵡病,后又稱鸚鵡熱,而將鸚鵡以外的家禽及野禽的禽衣原體病則稱之為鳥(niǎo)疫。鴕鳥(niǎo)感染禽衣原體病也已有報(bào)道。禽衣原體病臨床常缺乏特征性的臨床癥狀,患病鴕鳥(niǎo)以腸炎和呼吸道癥狀表現(xiàn)為主。有人則認(rèn)為任何鳥(niǎo)類(lèi)出現(xiàn)結(jié)膜炎都應(yīng)懷疑是否感染了本病。各種鳥(niǎo)禽類(lèi)患禽衣原體病后的病理變化基本相似,其特征為胸腔和腹腔器官漿膜和氣囊膜的纖維素性炎癥病變及同時(shí)伴有脾、肝、腎等實(shí)質(zhì)器官腫大和局灶性壞死。
本病呈世界性分布,且在很多國(guó)家的鳥(niǎo)類(lèi)中呈地方流行。衣原體的宿主幾乎包括所有野生或飼養(yǎng)的禽鳥(niǎo)類(lèi),現(xiàn)已從190多種野鳥(niǎo)體中檢測(cè)出衣原體抗體,其中部分禽鳥(niǎo)因患禽衣原體病而表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀和較高死亡率;另外大部分禽鳥(niǎo)在感染衣原體后,本身常常僅出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀甚至呈隱性經(jīng)過(guò),但可以帶毒和排毒。本病的發(fā)生和流行無(wú)明顯的季節(jié)性,而幼禽和在有繼發(fā)感染(常見(jiàn)于沙門(mén)氏桿菌),及惡劣的環(huán)境條件時(shí)會(huì)使本病的發(fā)生率和死亡率明顯增高。病鳥(niǎo)和帶菌鳥(niǎo)是本病最主要的傳染源,它們通過(guò)糞便、帶毒分泌物,造成呼吸道、消化道的接觸性傳染機(jī)會(huì)。某些吸血昆蟲(chóng)也可能成為傳播媒介。本病雖不能通過(guò)種蛋垂直傳播,但一些衣原體毒體可在某種鳥(niǎo)的若干個(gè)體上經(jīng)繼代后,致使受感染鳥(niǎo)出現(xiàn)明顯的臨床癥狀甚至死亡。
不同日齡的鴕鳥(niǎo)均可能受到衣原體感染,其臨床癥狀、病程和病死率因病原的致病力和其他因素影響存有一定的差異,尚不能排出隱性病例的存在。病鳥(niǎo)表現(xiàn)腹瀉,排灰褐色或帶有綠色的稀便,頸無(wú)力、頭下垂、精神委頓,有時(shí)從鼻孔或喙處流出水樣或黏液膿性分泌物。呼吸頻率加快、呼吸困難,出現(xiàn)明顯的呼吸音。病鳥(niǎo)最后拒食,體重下降,最終因極度衰竭而死亡。另外部分幸存病鳥(niǎo)癥狀可逐漸減輕,但可長(zhǎng)期帶毒,并持續(xù)地排出衣原體。
病理剖檢變化:鴕鳥(niǎo)患衣原體病的病理剖檢變化和其他鳥(niǎo)類(lèi)相一致,以較典型的體腔內(nèi)器官和氣囊膜的纖維素炎性病變?yōu)橹?,其中以纖維素性心包炎、肝周炎和氣囊炎常見(jiàn),此時(shí)可在胸腔和腹腔見(jiàn)到數(shù)量不等的纖維素性滲出液。肺充血有炎癥變化,脾臟明顯腫大、常有壞死灶,相似病變可能發(fā)生在肝、腎、心等其他實(shí)質(zhì)器官。幾乎所有病例均伴有不同程度的腸炎病變。
病理組織學(xué)變化:實(shí)質(zhì)器官表層的纖維素性炎癥的病例,鏡檢時(shí)可觀察到心包及心外膜血管充血,并含有纖維蛋白滲出物及大單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞、異染細(xì)胞滲出。肝臟竇狀隙因單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和異染細(xì)胞浸潤(rùn)而發(fā)生彌漫性腫脹。脾臟被膜有纖維蛋白滲出,在漿膜表面形成灰白色、無(wú)光澤、干燥的纖維素膜,纖維素附著部的脾臟表層組織可見(jiàn)炎性腫脹和壞死。小腸黏膜充血腫脹和白血球浸潤(rùn),黏液腺分泌亢進(jìn),在黏液內(nèi)可發(fā)現(xiàn)混有脫落的細(xì)胞上皮及黏液腺及其排泄管的上皮細(xì)胞和白血球。
病料采集及處理:用于衣原體分離的病料可無(wú)菌采集于病變心包組織及滲出液,腫大的脾和肝臟,充血部位的腸黏膜,增厚的氣囊和鼻腔病理分泌物等。試驗(yàn)室通常用牛心浸液,PBS(pH 7.2),SPG緩沖液和組織培養(yǎng)液等作為稀釋液制成20%~40%的勻漿懸液。在接種動(dòng)物或細(xì)胞培養(yǎng)前,為防止雜菌污染,可在樣品內(nèi)加入500~1 000 μg·mL-1毫升的鏈霉素、萬(wàn)古霉素、卡那霉素和兩性霉素B,作用24 h。如樣品污染嚴(yán)重,可將加入抗生素后的勻漿,經(jīng)1 000~2 000 r·min-1離心30 min,取上清液接種試驗(yàn)動(dòng)物或進(jìn)行組織培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng):多數(shù)衣原體菌株可在細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖,常用的細(xì)胞系為McCoy、Hela、Vero和L-929等。在細(xì)胞培養(yǎng)中的衣原體,能形成不同形態(tài)的核旁包涵體,可采用直接熒光免疫試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。
雞胚接種:將獲取的病料接種于雞胚卵黃囊是分離培養(yǎng)鸚鵡衣原體常用的方法。取0.5 mL材料接種于6~7日齡的雞胚卵黃囊內(nèi),39℃孵化,一般于接種后5~12 d,衣原體復(fù)制能引起雞胚死亡;并因衣原體感染,接種雞胚卵黃囊膜出現(xiàn)典型的血管充血病變。有些衣原體菌株引起病變不明顯或雞胚仍存活,應(yīng)進(jìn)行2代盲傳,有時(shí)要盲傳5代才能做出結(jié)論。
動(dòng)物致病性試驗(yàn):試驗(yàn)動(dòng)物可選用21~28日齡的幼鼠,將病料通過(guò)腹腔、腦內(nèi)或鼻腔內(nèi)接種,如5~15 d小鼠出現(xiàn)臨床癥狀和肉眼病變,表現(xiàn)停食、被毛蓬亂,出現(xiàn)結(jié)膜炎,腹部脹滿甚至死亡;剖檢腹腔有纖維素性滲出物,肺充血,肝、脾腫大等衣原體感染典型癥狀,即可進(jìn)一步診斷為衣原體病。
S864
B
1001-0084(2017)08-0062-01
2017-06-27
呂洪國(guó)(1976-),男,山東招遠(yuǎn)人,獸醫(yī)師,主要從事畜牧業(yè)生產(chǎn)發(fā)展。