自身免疫性溶血性貧血對輸血前血型鑒定、抗體篩查及交叉配血的影響

李玖平, 陳利紅, 楊浩瑩

(1. 西安交通大學醫學院附屬三二〇一醫院 輸血科, 陜西 漢中, 723000; 2. 陜西省漢中市第二人民醫院 檢驗科, 陜西 漢中, 723000)

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自身免疫性溶血性貧血對輸血前血型鑒定、抗體篩查及交叉配血的影響

李玖平1, 陳利紅2, 楊浩瑩1

(1. 西安交通大學醫學院附屬三二〇一醫院 輸血科, 陜西 漢中, 723000; 2. 陜西省漢中市第二人民醫院 檢驗科, 陜西 漢中, 723000)

自身免疫性溶血性貧血; 血型鑒定; 抗體篩查; 交叉配血

輸血在搶救自身免疫性溶血性貧血(AIHA)患者過程中起著至關重要的作用，但進行血型鑒定、抗體篩選及交叉配血時確保治療安全性是仍需解決的問題[1]。AIHA患者的血清中存在全凝集素，血型鑒定比較困難，還有可能使共存的同種抗體難以被檢測，交叉配血也不相合，加大輸血的風險[2]。本研究對400例AIHA患者的血液標本進行輸血前血型鑒定、抗體篩查和交叉配血，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2013—2015年收治的AIHA患者400例，其中男210例，女190例，年齡20～73歲，平均(42.51±2.32)歲; 病程2～6年，平均(3.28±2.13)年。

1.2 檢測試劑

譜細胞、抗-A/B血型定型試劑、直接抗人球蛋試劑由上海血液醫藥生物有限公司提供; LISS/Coombs卡、ABO/RhD血型檢測卡等由江陰力博醫藥生物技術股份公司提供。

1.3 檢測方法

① 血型鑒定：采取試管法, DTT處理后紅細胞與DAT強陽性紅細胞的ABO正定型、RhD血型采取ABO血型定型卡對其進行鑒定[3]。② DTT處理自凝紅細胞：采用DTT處理，紅細胞懸液保留[4]。③ 自身抗體吸收：采取參考文獻[5]中方法處理，吸收后的血清保留。④ 抗體篩選和鑒定：采取鹽水介質試管法，檢測IgM抗體用自身抗體吸收后的血漿; 檢測IgG抗體則采用LISS-IAT法、直接IAT法[6]。⑤ 直接抗人球蛋白試驗：采用LISS/Coombs卡等進行交叉配血。

2 結 果

400份AIHA患者血液標本中，溫自身抗體有342份(85.50%), 冷自身抗體有23份(5.75%), 混合型自身抗體有35份(8.75%)。血型鑒定結果：① 對ABO正定型、RhD血型干擾及解決方法：針對342份溫自身抗體中26份DAT強陽性標本出現紅細胞非特異性凝集現象，可選用ABO血型卡; 而23份冷自身抗體和35份混合型自身抗體則因紅細胞自凝受影響, 9份(15.52%)在37 ℃溫鹽水中洗滌3遍, 13份(22.41%)用DTT處理紅細胞, 36份(62.07%)再使用ABO血型卡。② 對ABO反定型的干擾及解決方法: 342份溫自身抗體無干擾; 23份冷自身抗體和35份混合型自身抗體因Ac、Bc、Oc均產生凝聚從而受影響, 40份(68.97%)試管法, 37 ℃溫度下水浴孵育15 min, 18份(31.03%)自身抗體吸收后再試管法。

342份溫自身抗體型 AIHA 患者的抗體鑒定結果: 342份溫自身抗體篩選呈陰性; 51份在LISS/Coombs卡中反應特異性, 47份有強弱之分。對51份有特異性的患者血漿采用LISS/Coombs法做抗體鑒定; 對其余患者血漿、自身抗體吸收后的血漿采用直接IAT法做抗體鑒定，結果顯示，無特異性自身抗體244份(71.35%), 抗體特異性為全凝集素; 有特異性自身抗體51份(14.91%), 抗體特異性為自身抗-D 7份、抗-Ce 39份、抗-M 2份、抗-Jka3份; 自生抗體+同種抗體47份(13.74%), 抗體特異性為同種抗-Ce 22份、抗-C 3份、抗-e 2份、抗-c E0份、抗-c 2份、抗-E 3份、抗-M 2份、抗-Jka2份、抗-Jkb1份。

23份冷自身抗體篩選呈陽性; 其中3份在LISS/Coombs卡中反應也呈陽性。對其血漿做IgM類和IgG類抗體鑒定，結果顯示，無特異性自身抗體17份(73.91%), 抗體特異性為全凝集素(IgM, 3份37 ℃有反應性); 有特異性自身抗體6份(26.09%), 抗體特異性為自身抗-HI 4份、抗-I 2份(IgM, 37 ℃均無反應性); 自生抗體+同種抗體0份(0%), 抗體特異性為無。

35份患者血漿進行抗體篩選，室溫下呈陽性, 37 ℃無反應性，孵育15 min呈陰性; 35份與篩選細胞在LISS/Coombs卡中的反應均呈陽性。采用試管法鹽水介質對其血漿做IgM類抗體鑒定; 采用直接IAT對3其做IgG類抗體鑒定，結果顯示，無特異性自身抗體32份(91.43%), 抗體特異性為全凝集素(IgM類, 37 ℃無反應性+IgG類); 有特異性自身抗體為0份(0%), 抗體特異性為無; 自生抗體+同種抗體3份(8.57%), 抗體特異性為同種抗-Ce 2份、抗-cE 1份。

交叉配血方面: ① 342例溫抗體型AIHA患者中存在51例只有自身抗體且抗體有特異性, 47例同種+自身抗體, 244例只有同種抗體且抗體為全凝集素。主側交叉配血，無自身抗體對應抗原的獻血者紅細胞，采用LISS/Coombs卡和試管法LISS-IAT, 分別相合21例、22例; 無同種抗體對應抗原的均相合; 同種抗體且抗體為全凝集素，相合93例，不相合151例。② 23例冷抗體型AIHA患者與獻血者采用直接IAT法，均相合。③ 混合抗體型患者與獻血者紅細胞相合27例，不相合5例。35例混合抗體型中，存在自身+同種抗體3例和只有同種抗體且抗體為全凝集素32例。沒有同種抗體對應抗原的用直接IAT法均相合。226例AIHA患者主側交叉配血相合, 200例采用洗滌紅細胞輸用, 26例采用懸浮紅細胞; 配血不相合者中，選擇輸用配血相合度相對最高的紅細胞35例。

3 討 論

近年來，AIHA發病率逐漸升高，甚至趨近于白血病[7]，AIHA為一組溶血性貧血疾病，起因于免疫系統功能異常，從而產生自身抗體和(或)補體，與紅細胞膜結合后破壞紅細胞，引發此種疾病[8]。主要有頭暈、高熱等表現。自身抗體則是人體重要的免疫性球蛋白[9], 具有免疫作用。AIHA患者體內具備自身抗體，分為溫抗體、冷抗體和冷-熱抗體[10]，能夠凝集所有紅細胞，自身抗體包被在紅細胞上或游離在血清當中[11]。治療AIHA患者一般需要多次輸血。而輸血時遇到的最大困難即自身抗體對患者的血型鑒定、抗體篩選及交叉配血的影響[12]。

本研究400例AIHA患者，溫自身抗體有342份(85.50%), 冷自身抗體有23份(5.75%), 混合型自身抗體有35份(8.75%)。其中，有293份自身無特異性抗體, 57份特異性自身抗體, 50份自生+同種抗體; 交叉配血21份LISS/Coombs卡相合, 22份試管法LISS-IAT相合, 193份直接抗人球蛋白法相合，配血均不合有156份。

研究結果[13]顯示，采用科學嚴謹的檢測技術對AIHA患者輸血前的血型鑒定、抗體篩查及交叉配血，在極大程度上能夠避免不良事件的發生，提高治療成功率。具體對策如下: ① 血型鑒定：若有一些DAT強陽性紅細胞溫自身抗體在ABO/RhD血型鑒定時，采用血型定型卡處理用試管法正定型紅細胞非特異性凝集的問題; 采用DTT處理冷自身抗體導致紅細胞自凝的問題; 37℃溫度孵育，血漿在自身紅細胞吸收之后再做反定型解決反定型時試劑紅細胞全凝集的現象[11]。② 抗體篩選及鑒定：溫抗體型、冷抗體型、混合抗體型AIHA患者血漿與篩選細胞/譜細胞檢測是否存在IgM類同種抗體可采用鹽水介質試管法; 溫抗體型檢測自身抗體是否有特異性，冷抗體型檢測自身抗體37 ℃是否有反應性及是否同時存在同種抗體都可采用LISS/Coombs卡; 溫抗體型對患者血漿、自身吸收后血漿做抗體鑒定，混合抗體型檢測是否同時存在同種抗體都可采用直接IAT法。③ 交叉配血：做主側交叉配血，對只有自身抗體且抗體有特異性的用LISS/Coombs卡/試管法LISS-IAT, 對沒有自身抗體對應抗原的獻血者和同種+自身抗體的和只有同種抗體且抗體為全凝集素的紅細胞，用直接抗人球蛋白法。④ 輸血：可輸用洗滌紅細胞或懸浮紅細胞使得AIHA患者主側交叉配血相合; 若配血不相合，醫生對情況進行鑒定，可篩選出不相合度最低的紅細胞進行輸血[15]。

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2016-12-23

陜西省教育廳科研項目(B2011213)

R 457.1

A

1672-2353(2017)09-199-03

10.7619/jcmp.201709066