灰樹花子實體噴硒對其硒及礦質元素和粗多糖含量的影響

李紅俠 方雪梅 劉江南 李 陽 張 穎 楊宜銀

（宿州學院生物與食品工程學院，安徽宿州234000）

硒是一種較稀有的重金屬元素，1973年世界衛生組織（WHO）宣布，硒是人體必需的14 種微量元素之一[1]，同時是谷胱甘肽過氧化物酶的組成成分[2]，機體缺硒產生如肝病、大骨節病、癌癥、免疫功能低下等各種疾病。人體必需的這種硒元素，人們對它的認識越來越深，近幾十年以來一直進行與硒相關的疾病的研究，諸如心血管疾病，癌癥，帕金森病，心律失常等，一些克山病更是由于缺硒導致[3～4]。我國72%的地區缺硒，中國營養學會推薦日攝入硒量50～200 μg，而我國居民為26～32 μg，這就意味著我國居民膳食缺硒[5～8]。

隨著人們生活水平的提高，健康意識的增強，食用菌的攝入量逐漸增加，它不僅具有較高的營養價值，還能防癌、抗癌、增強人體免疫力，是其他食物所不能替代的，尤其食用菌中的多糖能消除自由基、抗病毒和抗腫瘤[9]。灰樹花（Grifola frondosa），又名多孔菌，蓮花菌，子實體中不僅含有較高的蛋白質、膳食纖維，還富含多種有益的礦物質（K、P、Fe、Zn、Ca、Se 等），多糖[10～11]，灰樹花多糖對腫瘤細胞的增長具有較強的抑制作用[12～13]。K、Mg、Zn 等礦質元素在人生理活動中起著重要作用[14～20]，食用菌具有較強的富硒能力，灰樹花硒含量高，具有較好的抵御癌腫瘤和抗愛滋病毒等作用。灰樹花富硒的研究大多是在菌絲體或培養基層面[21-22]，灰樹花多糖的研究國內外較多，而子實體噴硒對其礦質元素及硒的影響報道較少。因此，通過子實體噴硒來改善食用菌硒含量及其他礦物質的含量具有重要意義。

試驗旨在探討噴施不同質量濃度硒液（Na2SeO3）對灰樹花子實體中硒的富集及幾種主要礦質元素和粗多糖含量的影響，以期找到較適宜的噴施量，提高灰樹花子實體中硒、礦質元素和粗多糖的含量，為灰樹花在食品、醫藥以及硒在其他食用菌上應用提供理論依據。

1 材料和方法

1.1 試驗材料灰樹花菌種（菌種號:WS1號，安徽宿州市食用菌生產基地供應），雜木屑，棉子殼，麩皮，玉米粉等市場購買。

1.2 試驗方法將培養好的灰樹花原種，接種到栽培種培養基中（栽培種培養基的原料雜木屑，棉子殼，麩皮，玉米粉等，按照一定的比例混勻裝入聚丙烯栽培袋中，經高壓滅菌），培養基含水量65%，pH6.0 左右，菌絲黑暗條件下培養（溫度23℃左右，相對濕度70%），35～45 d后，菌絲長滿袋，拿出等待出菇。待菇蕾長至珊瑚期，開始噴硒，硒以亞硒酸鈉計，硒的質量濃度20，40，60，80，100，150 mg/L，每天1 次，向子實體上均勻噴至霧狀水滴，連續10 d，對照以噴去離子水。每個處理，重復3 次。數據用SPSS17.0軟件處理。

1.3 灰樹花子實體中礦質元素的測定灰樹花子實體收獲后，于烘箱中烘至恒重，溫度40℃，用粉碎機打成粉末，過200 目篩，待用。每個樣品，分別準確稱取0.5000 g，置于100 mL 的燒杯中，加消化液15～20 mL（消化液的組成高氯酸∶硝酸，體積比為1∶4，二者均為優級純），于通風櫥中小火緩緩加熱，有黃色濃煙產生，待反應緩和后，拿出通風櫥冷卻后，沿杯壁加入15～20 mL去離子水，繼續置于通風櫥中緩慢加熱，待溶液變為無色，停止消化，冷卻后，加去離子水定容至100 mL。Se，K，Mg，Zn 用火焰原子吸收光譜法測定。

1.4 標準回歸曲線由表1 可知，相關系數均在0.99以上。

1.5 灰樹花子實體中粗多糖的測定[23～26]取已處理好的子實體粉末，準確稱取5 g→于2000 mL 超純水中，熱水90～95℃，超聲波，功率600 W，處理時間25 min→離心（5000 r/min，10 min）→將上清液真空濃縮至15 mL，用Sevage 試劑（氯仿∶正丁醇=5∶1）去蛋白2 次→3 倍無水乙醇沉淀→4℃冰箱12 h→離心（5000 r/min，10 min）→除去上清液→將沉淀收集，用無水乙醇洗滌3次→冷凍干燥得粗多糖。

2 結果與分析

2.1 灰樹花子實體噴硒對其K含量的影響從圖1可看出，灰樹花子實體噴不同質量濃度的硒后，子實體中礦質元素K 的含量均高于對照，與對照相比均達到了極顯著水平，通過LSD 比較各處理間也均達到極顯著差異，當硒質量濃度為20、80 mg/L 時，效果最好，分別高于對照10.9%和9.2%。

2.2 灰樹花子實體噴硒對其Se含量的影響由圖2可見，噴施不同質量濃度硒，灰樹花子實體中Se 含量與對照相比，均達到極顯著差異，當噴硒質量濃度為60 mg/L時，子實體中Se含量最高，是對照的12倍，可見灰樹花具有較強的富硒能力。不同噴施硒濃度間，灰樹花子實體硒含量表現出極顯著差異。

2.3 灰樹花子實體噴硒對其Mg含量的影響從圖3可知，噴施不同質量濃度的硒對灰樹花中Mg 含量與對照，均有極顯著差異，尤其是噴硒質量濃度在20、80 mg/L 時，灰樹花子實體Mg 含量最高，分別高于對照28.94%和40.11%。40 mg/L 與100 mg/L 處理，子實體中Mg 含量沒達到顯著差異，其余各處理間Mg含量均達到極顯著差異。

2.4 灰樹花子實體噴硒對其Zn含量的影響由圖4可見，灰樹花子實體噴硒后，子實體礦質元素Zn 含量與對照差異極顯著，各處理間的差異也極顯著。20、80 mg/L 處理，Zn 含量分別高于對照74.08%和150.82%，而當硒濃度高于80 mg/L 后，子實體中Zn含量反而下降。

2.5 灰樹花子實體噴硒對其粗多糖含量的影響從表2可以看出，隨噴硒質量濃度的上升，灰樹花子實體中粗多糖的含量也逐漸增加，但噴硒質量濃度20、40 mg/L，粗多糖的含量雖增加，但沒達到顯著差異，噴硒質量濃度60～150 mg/L，灰樹花子實體粗多糖的含量與對照，均達到極顯著差異，當硒質量濃度達到100 mg/L，灰樹花子實體粗多糖的含量達到最高，高于對照61.3%，當噴硒質量濃度高于100 mg/L，子實體粗多糖的含量不再增加。

表1 各元素回歸方程

圖1 灰樹花子實體噴硒對其K含量的影響

圖2 灰樹花子實體噴硒對其Se含量的影響

圖3 灰樹花子實體噴硒對其Mg含量的影響

圖4 灰樹花子實體噴硒對其Zn含量的影響

表2 噴不同質量濃度的硒灰樹花子實體粗多糖含量

3 小 結

灰樹花子實體噴硒，可以較好的富集硒，這對發展富硒食用菌有著廣闊的前景，也為人們膳食補硒提供了條件。試驗結果表明:過高質量濃度硒不利于灰樹花子實體硒積累，其機理有待進一步研究。噴硒，也改變了灰樹花子實體對礦質元素（K、Zn、Mg）的吸收，它們的吸收有兩個高峰點，均是噴硒質量濃度20 mg/L 和80 mg/L 時。噴施20 mg/L 對K 積累效果最好，而對Zn 和Mg 積累，都是噴硒80 mg/L最好。噴施100 mg/L硒，灰樹花子實體中粗多糖的含量達到最高。綜合試驗結果噴硒質量濃度在60～100 mg/L時較為適宜。