電針督脈穴對大鼠血管性認知障礙的影響

萬隆，薩喆燕，潘曉華，黃倩茹，許金森（福建省中醫藥研究院，福建福州350003）

電針督脈穴對大鼠血管性認知障礙的影響

萬隆，薩喆燕，潘曉華，黃倩茹，許金森
（福建省中醫藥研究院，福建福州350003）

目的探討電針督脈穴對腦卒中后認知障礙的影響。方法21只SD大鼠隨機分為假手術組、模型組、電針組，每組7只。模型組、電針組用線栓法制備左側大腦中動脈閉塞模型，電針組電針神庭、百會穴7 d，用Longa評分觀察大鼠神經功能缺損情況，用Morris水迷宮檢測大鼠學習記憶能力。結果與模型組比較，電針組大鼠神經功能缺損評分明顯減少，逃避潛伏期顯著縮短，穿越平臺次數增加。結論電針督脈穴能減輕大鼠神經功能缺損程度，改善血管性認知障礙大鼠的學習記憶能力。

血管性認知障礙；學習記憶；電針；大鼠

我國已逐漸步入老齡化社會，隨著老齡人口的日益增長，認知障礙的發病率也逐年增加，由此帶來的家庭和社會問題也越來越嚴重。因此，早期認知功能障礙的防治意義重大。血管性認知障礙（vascular cognitive impairment，VCI）是指有腦血管病危險因素、明顯或不明顯的腦血管病引起的從輕度認知障礙到癡呆的一大類綜合征［1］，主要表現為記憶力保留而注意力和執行功能障礙，可伴有行動和信息處理遲緩、抑郁、情緒不穩、情感淡漠等。目前針對VCI治療，國內外尚無確切有效的藥物。對于存在認知障礙尚未癡呆的患者，可以通過控制各種危險因素，采取有效的干預措施，來減輕和逆轉認知功能缺損癥狀［2］，針灸在治療VCI中占有重要地位。我們采用左側大腦中動脈閉塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）大鼠模型作為認知障礙大鼠模型，通過電針督脈的百會、神庭穴，觀察治療前后模型大鼠學習記憶能力的改變。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組成年雄性SD大鼠21只，清潔級，體質量（250±20）g，購自福建醫科大學實驗動物中心，許可證號：SCXK（閩）2012-0001。實驗前1周適應性飼養于福建省中醫藥研究院實驗動物中心，飼養條件：溫度（22±2）℃，濕度（55± 15）%，12 h明暗交替，自由進食與飲水。大鼠隨機分為假手術組、模型組、電針組，每組7只。

1.2 實驗儀器Morris水迷宮視頻跟蹤與分析系統（成都盟泰科技有限公司）；SDZ-II型華佗牌電子針療儀（蘇州醫療用品廠有限公司）。

1.3 模型制備模型組和電針組參考Longa改良線栓法［3］制備左側大腦中動脈閉塞MCAO大鼠模型，具體方法：大鼠術前12 h禁食，不禁水。經腹腔注射10%水合氯醛（400 mg／kg）麻醉后，大鼠仰臥位固定，常規備皮消毒。取頸前正中切口，鈍性分離左側頸總動脈、頸外動脈和頸內動脈。結扎頸外動脈及頸總動脈近心端，于頸總動脈結扎處遠端4 mm處剪一小口，插入栓線進入頸內動脈約18～22 mm，輕微遇阻即止。固定栓線并縫合傷口，待缺血2 h后緩慢退出栓線至頸總動脈分叉處，實現再灌注。動物于25℃蘇醒，正常飲食。假手術組只分離動脈，不結扎、不插線。

1.4 干預措施電針組參考《實驗針灸學》［4］，選神庭、百會穴，0.5寸華佗牌無菌毫針，斜刺0.2～0.3 cm，連接SDZ-II電針儀，電壓5～10 V，以針體輕微抖動為度，疏密波，頻率2～10 Hz，每次20 min，每日1次。手術后24 h開始治療，連續7 d。模型組、假手術組于手術后回籠飼養，給予同等條件抓取，不做任何治療。

1.5 神經行為學評分大鼠清醒后，根據Longa法進行神經功能評分。0分：無神經功能缺失癥狀；1分：不能完全伸展患側前爪；2分：行走時向患側轉圈；3分：行走時向患側傾倒；4分：不能自發行走，意識喪失。造模24 h后評分1～3分的大鼠納入實驗，剔除死亡和造模不成功的大鼠。

1.6 Morris水迷宮實驗Morris水迷宮為一高50 cm、直徑120 cm的圓形水池，水深30 cm，水溫（26 ±2）℃，加入二氧化鈦使水顯乳白色。水池等分為4個象限，池壁外標4個入水點，任選1個象限在其中央放置平臺，平臺高28 cm，直徑6 cm，沒于水下2 cm，水池周圍參照物保持不變。實驗時，于水迷宮水池中央的上方2 m處設置1個攝像頭，自動采集動物游泳圖像，收集信號輸入計算機，由水迷宮跟蹤分析系統自動采集和分析處理。

Morris水迷宮包括定位航行實驗和空間探索實驗2個部分，定位航行試驗：造模前先進行2天適應性訓練，手術后第3天開始實驗。將受試大鼠依順時針方向從水池4個象限面向池壁放入水中，若大鼠90 s內爬上平臺并停留3 s以上，則認為大鼠找到平臺，此為逃避潛伏期。如果90 s內大鼠未找到平臺，則將其引導上平臺，停留10 s，潛伏期記為90 s。歷時4 d。空間探索試驗：術后第7天撤去平臺，取原平臺對側象限為入水點將受試大鼠放入水中，測定大鼠在90 s內穿過原平臺區域的次數。

1.7 統計學處理數據用x±s表示，用SPSS 13.0統計軟件進行分析處理，組內數據比較用配對t檢驗，組間數據比較用方差分析、LSD檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

實驗結果見表1、表2、表3。

表1 3組大鼠神經功能缺損評分比較min

表1 3組大鼠神經功能缺損評分比較min

注：與假手術組比較，1）P＜0.01；與模型組比較，2）P＜0.01；與術后1 d比較，3）P＜0.01。

組別電針組模型組假手術組術后7 d 0.71±0.101）2）3）1.07±0.071）0.00±0.00大鼠／只7 7 7術后1 d 1.00±0.001）1.14±0.141）0.00±0.00

表2 3組大鼠逃避潛伏期

表2 3組大鼠逃避潛伏期

注：與假手術組比較，1）P＜0.01；與模型組比較，2）P＜0.05。

組別電針組模型組假手術組術后4 d 48.33±7.811）2）75.34±8.521）17.23±2.67大鼠／只7 7 7術后3 d 52.68±9.911）66.25±4.211）28.65±7.11術后5 d 33.85±7.191）3）67.90±9.361）15.38±3.10術后6 d 26.96±4.091）3）70.31±10.701）13.82±1.65

表3 3組大鼠穿過平臺位置的次數次

表3 3組大鼠穿過平臺位置的次數次

注：與模型組比較，1）P＜0.05。

組別電針組模型組假手術組大鼠／只7 7 7術后7 d 3.14±0.961）0.57±0.57 2.71±0.47

3 討論

3.1 中醫治療認知障礙時多選擇督脈穴位，朱永磊等［5］選擇水溝、印堂、神庭、上星、百會等穴位，采用從督論治針刺法治療腦卒中后認知障礙患者，發現其對于簡易智能狀態檢查量表評分及日常生活活動量表評分有明顯改善，優于對照組常規針刺法。黃凡等［6］發現針刺百會、水溝、神門等穴位，對腦梗死后血管性認知障礙的臨床療效優于電針療法。林志誠等［7］觀察電針百會穴對腦梗死后認知障礙患者聽覺事件相關電位P300的影響，結果表明電針后認知障礙患者P300潛伏期縮短、波幅升高，優于單純認知訓練對照組。

3.2 本研究選擇督脈的神庭、百會穴作為電針穴位，因其能調控神經系統，與腦密切相關［8］。實驗結果顯示通過線栓法制作左側大腦中動脈閉塞大鼠模型，造模24 h后大鼠的神經行為評分明顯高于假手術組（P＜0.01），說明模型制備成功。模型制備3 d后模型組和電針組大鼠逃避潛伏期明顯高于假手術組（P＜0.01），可見大腦中動脈缺血再灌注造成了大鼠的空間學習記憶功能障礙。連續電針神庭、百會穴7 d后，電針組大鼠的逃避潛伏期較模型組大鼠明顯縮短（P＜0.01），穿過平臺的次數也高于模型組大鼠（P＜0.05），說明電針督脈穴可以有效改善大鼠的學習記憶能力，減輕認知障礙的癥狀。

［1］中國防治認知功能障礙專家共識專家組.中國防治認知功能障礙專家共識［J］.中華內科雜志，2006，45（2）：171-173.

［2］DEAK F，FREEMAN W M，UNGVARI Z，et al.Recent Developments in Understanding Brain Aging：Implications for Alzheimer's Disease and Vascular Cognitive Impairment［J］.J Gerontol A Biol Sci Med Sci，2016，71（1）：13-20.

［3］LONGA E Z，WEINSTEIN P R，CARLSON S，et al.Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats［J］. Stroke，1989，20（1）：84-91.

［4］余曙光，郭義.實驗針灸學［M］.北京：中國中醫藥出版社，2012：252.

［5］朱永磊，黃川，邢甲進.“從督論治”針刺法治療腦卒中后認知功能障礙40例［J］.安徽中醫藥大學學報，2014，33（2）：50-52.

［6］HUANG F，KUANG W C，ZHOU F X，et al.Therapeutic efficacy observation on acupuncture treatment for vascular cognitive disorder following a cerebral infarction［J］.Journal of Acupuncture and Tuina Science，2012，10（1）：29-33.

［7］林志誠，陳立典，陶靜，等.電針百會穴對腦梗死后認知障礙患者聽覺P300的影響［J］.上海針灸雜志，2014，33（1）：14-17.

［8］高玲莉，馮曉東.電針神庭、百會穴對腦缺血再灌注后認知障礙大鼠學習記憶能力及自噬相關基因和蛋白表達的影響［J］.康復學報，2016，26（4）：17-22.

R245.3

A

1000-338X（2017）01-0033-02

2016-10-28

福建省屬公益類科研院所基本科研專項資助課題（2015R 1035-14，2016R1033-10，），福建省衛計委衛生系統中青年骨干人才培養項目資助課題（2015-ZQN-JC-35）

萬?。?972—），男，實驗師，主要從事中醫經絡現代研究。

許金森（1963—），男，研究員。E-mail：xujinsenjls@163.com