銅仁珍珠花生中5種有機氯農藥殘留檢測方法研究

安鳳穎　張儒令　陶菡

摘要 為建立銅仁市地理標志特色農產品銅仁珍珠花生有機氯農藥殘留檢測方法，2016年對銅仁珍珠花生中5種有機氯農藥殘留檢測方法進行探索。珍珠花生樣品經粉碎后經乙腈液液提取、濃縮、凈化，采用氣相色譜法-ECD檢測器檢測。結果表明：5種有機氯類農藥添加濃度為0.005～5.000 mg/kg時，加標回收率為89.61%～107.03%，RSD為3.29%～20.03%。方法的添加回收率數據及RSD數據說明本試驗方法的準確度、精密度均達到農藥殘留檢測的要求。

關鍵詞 珍珠花生；氣相色譜法；有機氯農藥；殘留；貴州銅仁

中圖分類號 TS207.5+3 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）03-0109-02

銅仁珍珠花生是貴州珍寶，2015年獲得農產品地理標志保護。產自梵凈山區的銅仁珍珠花生，顆粒小巧圓潤、色澤紅亮、味香濃郁，是歷代皇家貢品。1991年上市貿易的花生達3 902 t，2015年達34 300 t，成為銅仁市出口農副產品中出口量較多的產品[1]。因此，銅仁珍珠花生中農藥殘留量檢測對于保障人們飲食健康及銅仁市花生進出口貿易具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 主要儀器。氣相色譜儀7890A，安捷倫科技（中國）有限公司；電子天平：FA/JA系列，上海越平科學儀器有限公司；旋轉蒸發儀：RE-522AA，上海亞榮生化儀器廠；循環水式真空泵：SHZ-D （Ⅲ），上海亞榮生化儀器廠；調速多用振蕩器：HY-4型，上海浦東物理光學儀器廠；氮吹儀：HP-5016SY，上海濟成分析儀器有限公司；阿修羅系列超純水機：AXLC1815-2，阿修羅科技發展有限公司；渦旋混合器：QL-901，江蘇海門市麒麟醫用儀器廠；燒杯、離心管、漏斗、滴管等分析常用玻璃儀器。

1.1.2 花生樣品。2016年在碧江區12個村抽樣74個珍珠花生樣品，即隨機選取農戶進行購買。樣品進行日光曬干，測定其水分含量。

1.2 提取劑選擇

液液萃取法應用最為廣泛，且成本低，提取效果良好。采用5種試劑（乙腈、甲醇、二氯甲烷、丙酮-正己烷、丙酮-石油醚）作為提取劑，進行優化。5種有機氯農藥殘留萃取中平均回收率：乙腈>二氯甲烷>丙酮-正己烷>丙酮-石油醚>甲醇；相對標準偏差平均值：丙酮-石油醚>丙酮-正己烷>二氯甲烷>乙腈。選擇乙腈作為銅仁珍珠花生中有機氯農藥殘留的提取劑，平均回收率為100.15%，平均RSD為7.90%。

1.3 樣品前處理

樣品粉碎機粉碎均勻，電子天平稱取10 g，加入50 mL乙腈提取液，組織勻漿3 min，加入1～3 g NaCl充分震蕩，靜置30 min以上（發生乳化現象可用離心機離心5～10 min），吸取上層清液10 mL入50 mL燒杯中，80 ℃恒溫水浴通氮氣蒸發至近干，加入2 mL正己烷。佛羅里硅土柱依次用5 mL正己烷+丙酮（90∶10）、5 mL正己烷預淋洗，用5 mL正己烷+丙酮（90∶10）重復1次轉移至10 mL的比色管中，正己烷定容呈5 mL（大于5 mL用氮吹儀吹降5 mL以下），裝瓶待測[2]。

1.4 固相萃取選擇

5種有機氯農藥殘留凈化處理平均回收率：SPE-Florisil>SPE-SIL>不處理>SPE-CARB/NH2>中性氧化鋁>SPE-PSA；相對標準偏差平均值：SPE-CARB/NH2>SPE-PSA>不處理>SPE-SIL>中性氧化鋁>SPE-Florisil。綜合考慮，選擇SPE-Florisil作為銅仁珍珠花生中有機氯農藥殘留的凈化柱，處理平均回收率為98.44%，平均RSD為5.06%。

Florisil固相萃取容量在1 000 mg，6 mL時，凈化效果明顯，5種有機氯農藥平均回收率為99.69%，平均RSD為7.88%，根據農藥殘留安全檢測良好實驗室標準選擇5種有機氯農藥殘留凈化處理為Florisil固相萃取容量在1 000 mg，6 mL較為理想[3]。

1.5 色譜柱選擇

采用4根色譜柱HP-5、HP-35、DB-1、DB-1701不同極性、不同填料的柱子，對10種混合農藥進行分離，選擇峰型分離較好、峰面積以及峰高較好的作為色譜分析柱。花生樣品中氯氰菊酯濃度0.06 mg/kg、百菌清濃度0.032 mg/kg、甲氰菊酯濃度0.01 mg/kg、三氯殺螨醇濃度0.01 mg/kg、三唑酮濃度0.032 mg/kg時，檢測可選擇HP-5或HP-35作為分析柱，峰面積和峰高區別不大[4-5]。

1.6 儀器條件選擇

儀器檢測條件的其他優化：進樣溫度、檢測器溫度、分流比等條件優化，適當調整，直到得出峰形分離較好，峰面積大，峰高較好，作為銅仁珍珠花生農藥殘留檢測色譜分析條件。

有機氯農藥標準品隨進樣口溫度升高保留時間均提前，但變化不明顯；出峰面積與進樣口溫度升降無明顯關系，5種有機氯農藥在進樣口溫度為200 ℃時，峰面積最大。綜合5種農藥出峰面積與保留時間，選擇進樣口溫度為200 ℃，可以保證5種有機氯農藥分離度較好。

5種有機氯農藥農藥標準品隨檢測器溫度升高保留時間均提前，但變化不明顯；出峰面積與檢測器溫度升降無明顯關系，5種有機氯農藥在進檢測器溫度為320 ℃時，峰面積最大。根據5種農藥出峰面積與保留時間，選擇檢測器溫度為320 ℃，可以保證5種有機氯農藥分離度較好。

5種有機氯農藥標準品保留時間與分流比上升無明顯關系，分流比為50∶1時，分離效果較好，峰面積最大，保留時間也較短，選擇分流比為50∶1作為有機氯農藥氣相分離條件。

1.7 色譜條件

安捷倫7890A，檢測器u-ECD；色譜柱：HP-5柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）或者HP-35（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；進樣口溫度200 ℃；載氣：氮氣 （純度99.999%），流速1 mL/min；輔助氣：氮氣（純度99.999%），流速60 mL/min，進樣體積1.0 μL；檢測器溫度320 ℃。分流進樣，分流比50∶1。

2 結果與分析

2.1 方法靈敏度考察

分析方法的靈敏度是指該方法對單位濃度或單位質量的待測物質的變化所引起的響應量變化的程度，通常以方法的最低檢出濃度（LOQ）表示。最低檢出濃度是指用添加方法能測出待測物在樣品中的最低含量（以mg/kg為單位表示），要求低于或等于該農藥在該種作物上的最大殘留限量（MRL）值即可。5種農藥添加最低檢測出限和線性關系如表1所示。氯氰菊酯、三唑酮、百菌清、三氯殺螨醇、甲氰菊酯的最低檢出濃度分別為0.004 5、0.001 2、0.003 2、0.008 0、0.001 5 mg/kg，均低于相應最大殘留限量。

2.2 方法準確度的考察

準確度是指分析結果與假定的真值之間相符合的程度。它反映的是分析方法或測定系統存在的系統誤差和隨機誤差的綜合指標。在農藥殘留分析時，評價準確度的方法常常使用添加回收率來表征。銅仁珍珠花生添加農藥回收率如表2所示，可以看出，氯氰菊酯在添加濃度0.005、0.050、0.500 mg/kg時，添加回收率分別為95.75%、102.55%、90.25%。三唑酮在添加濃度0.020、0.200、2.000 mg/kg時，添加回收率分別為94.72%、97.01%、100.90%。百菌清在添加濃度0.005、0.050、0.500 mg/kg時，添加回收率分別為89.61%、99.29%、98.96%。三氯殺螨醇在添加濃度0.050、0.500、5.000 mg/kg時，添加回收率分別為95.36%、107.03%、91.27%。甲氰菊酯在添加濃度為0.010、0.100、1.000 mg/kg時，添加回收率分別為96.04%、94.38%、106.06%。

3 結論

建立銅仁市地理標志特色農產品銅仁珍珠花生中5種有機氯農藥殘留檢測方法，經過考察方法的靈敏度、準確度都達到了農藥殘留檢測的要求，可以作為銅仁珍珠花生中敵敵畏、樂果、殺螟硫磷、倍硫磷、毒死蜱農藥殘留檢測方法。

4 參考文獻

[1] 銅仁市2015年國民經濟和社會發展情況[R/OL].（2016-04-25）[2016-11-11].http：//www.tjch.org/tigb/201604/32875.html.

[2] 農業標準出版研究中心.蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定：NYT 761-2008[S].北京：中國農業出版社，2010.

[3] 岳永德，朱魯生.農藥殘留分析[M].北京：中國農業出版社，2004.

[4] 馬金鳳，劉雪，趙志強，等.凝膠滲透色譜-氣相色譜質譜法測定花生中6種除草劑農藥殘留[J].化學分析計量，2012（4）：43-46.

[5] 朱臻怡，馮民，何健，等.固相萃取-氣相色譜法同時測定花生中18種有機氯農藥殘留[J].化學分析計量，2010（1）：19-22.