cyclin D1和p16基因在早期宮頸癌中的表達

柴姣

摘 要：目的：探討cyclin D1和p16基因在宮頸癌發生中的作用。方法：應用免疫組織化學S-P法檢測cyclin D1和p16基因在20例早期宮頸癌和20例正常黏膜中的表達。結果：cyclin D1在早期癌中的表達高于正常黏膜（P<0.05），p16在早期癌中的表達低于正常黏膜（P<0.05）。結論：cyclin D1和p16與宮頸癌的發生有關，他們的變化是宮頸癌發生中的早期事件。

關鍵詞：cyclin D1；Rb；p16；早期宮頸癌；免疫組織化學

中圖分類號：R73511 文獻標識碼：A 文章編號：1671-2064（2017）02-0173-01

宮頸癌是一種常見的婦科惡性腫瘤，居于婦科惡性腫瘤的第一位，對婦女的生命健康構成極大威脅。宮頸癌早期癥狀不明顯，大部分患者就診時已處于中晚期，治療效果較差，如果能早期診斷，經手術等治療，宮頸癌患者的5年生存率可達90%以上。因此，提高早期宮頸癌診斷率是提高宮頸癌治療效果的關鍵。

我們擬通過對早期宮頸癌組織中cyclin D1和p16表達的檢測，探討二者在宮頸癌發生中的作用及其相互關系。

1 材料與方法

1.1 材料

20例早期宮頸癌和20例正常宮頸黏膜標本均為安陽市第三人民醫院手術標本。組織學類型：早期癌均為鱗癌。 所有標本經10%甲醛固定，石蠟包埋切片；抗體及免疫組化試劑盒均購自北京中杉公司。

1.2 方法

免疫組織化學S-P法：切片常規脫蠟水化，高壓抗原熱修復，其余步驟按試劑說明書上進行。cyclin D1的抗體稀釋度為1：100，p16的抗體稀釋度為1：125，用已知陽性切片作為陽性對照，用PBS代替一抗做陰性對照。

1.3 結果判定

細胞核或細胞漿內見均勻一致的棕黃色顆粒為陽性，根據陽性細胞的數量進行結果判定：無陽性細胞為陰性（-），陽性細胞數小于25%為弱陽性（+），陽性細胞數介于25%～75%之間為陽性（++），陽性細胞數大于75%為強陽性（+++），cyclin D1過度表達指陽性和強陽性。

1.4 統計學處理

采用SPSS17.0統計軟件進行統計學處理，顯著性檢驗采用計數資料的χ2檢驗，以α=0.05作為檢驗水準。

2 結果

cyclin D1在早期癌和正常黏膜中的過表達率分別為45.0% （9/20）和0%（0/20），cyclin D1在早期癌中與正常黏膜相比存在過度表達（P<0.05），見表1；p16在早期癌和正常黏膜中的陽性率分別為55.0%（11/20）和100.0%（20/20），p16在早期癌中與正常黏膜相比表達降低（P<0.05），見表2。經Spearman等級相關檢驗，cyclin D1和p16的表達存在負相關關系。

3 討論

cyclin D1編碼基因位于11q13上，有5個外顯子，全長約15kb。細胞中過度表達cyclin D1可使G1期縮短，細胞生長增殖失控。cyclinD1在多種腫瘤中存在過度表達，比如乳腺癌、食管癌和肺癌等。p16基因定位于9p21，它是CDK4/CDK6的抑制因子，在細胞增殖的調控中，p16 蛋白與cyclin D1競爭與CDK4/CDK6的結合，發揮負性調節作用，共同完成對細胞增殖周期的調控。在肺癌[1]、胃癌和食管癌[2]等許多腫瘤中都存在p16表達缺失。

本實驗結果顯示，cyclin D1在早期癌中與正常黏膜相比呈過度表達（P<0.05），p16在早期癌中與正常黏膜相比表達降低（P<0.05）。這些提示cyclin D1和p16的異常在宮頸癌的早期發生中可能起重要作用，是宮頸癌發生中的早期事件。兩者的表達呈負相關關系，提示cyclin D1的表達增高和p16的表達降低可能共同參與了宮頸癌的發生。兩者在宮頸癌中具體的作用機制，還有待于進一步深入研究。

參考文獻：

[1]Han JC， Xu F， Chen N， Qi GB， et al.Promoter methylations of RASSF1A and p16 is associated with clinicopathological features in lung cancers.J Cancer Res Ther. 2016 Jan-Mar；12（1）：340-349.

[2]Wang L，Li J，Yu X，et al.Prognostic significance of overexpressed p16（INK4A） in esophageal squamous cell carcinoma：a meta-analysis.Biomark Med.2016 May；10（5）：537-546.