娜 琴,陳阿梅,扈瑞平,武瑞兵,葉紀(jì)誠,鄧 鳳,程 飚
(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110)
實(shí)驗(yàn)證實(shí),皮膚是應(yīng)激反應(yīng)的周圍靶器官之一,以前人們已經(jīng)注意到周圍神經(jīng)、神經(jīng)肽、神經(jīng)激素等對(duì)皮膚的影響,而應(yīng)激狀態(tài)同樣影響皮膚的功能[1]。應(yīng)激可能造成神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)穩(wěn)定性改變,引起許多皮膚疾患,包括創(chuàng)面愈合的失調(diào)節(jié)[2]。但有關(guān)創(chuàng)面愈合方面的研究極少,缺乏機(jī)制的探討和深入認(rèn)識(shí)。本研究建立小鼠應(yīng)激模型,并在其背部制作全層皮膚缺損創(chuàng)面,與未應(yīng)激小鼠創(chuàng)面愈合過程進(jìn)行對(duì)比,了解局部組織血管緊張素系統(tǒng)成分在應(yīng)激狀態(tài)下的變化特點(diǎn)和規(guī)律。為將來合理調(diào)控該系統(tǒng),盡可能改善組織纖維化的愈合結(jié)局提供新思路和手段,目的是達(dá)到人類所期望的完美組織愈合。
本實(shí)驗(yàn)采用6-8周齡的C57BL/6小鼠。皮膚打孔器為自制。束縛應(yīng)激采用打孔的50 ml離心管進(jìn)行。主要試劑:ACE,AT1抗體購自美國SantaCruz公司,AT2抗體購自abcam公司。
1.2.1 小鼠應(yīng)激模型的建立
應(yīng)激模型制作方法參照Padgett等1998年制作的束縛應(yīng)激模型[3],建立這一應(yīng)激模型后小鼠血清中皮質(zhì)醇水平是對(duì)照組的4倍[4]。
1.2.2 小鼠背部全層皮膚缺損模型的制作
將小鼠麻醉后,在小鼠背部脊柱兩側(cè)用特制打孔器(直徑0.8 mm,面積0.64 mm2)切割2個(gè)圓形創(chuàng)面,深至皮下。手術(shù)時(shí)間均為上午10∶00,因?yàn)檫@時(shí)皮質(zhì)醇分泌量最大,并且統(tǒng)一時(shí)間易于比較[5]。
1.2.3 小鼠創(chuàng)面愈合情況的觀察
分別在在制作創(chuàng)面的第0、3、5、7天,于上午10∶00將小鼠麻醉后用半透明薄膜紙描記其背部創(chuàng)面[6]。……