液基薄層細胞學技術聯合高危型人乳頭瘤病毒檢測在宮頸癌篩查中的臨床應用研究

李光梅　冼志霞　鄧舒靜

【摘要】 目的 研究高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）檢測與液基薄層細胞學技術（TCT）在宮頸癌前病變中的臨床運用效果， 對比分析其敏感性及特異性。方法 350例宮頸癌病理篩查陽性者分別采用TCT與HR-HPV檢測進行篩查， 對篩查陽性患者6個月1次采用TCT與HR-HPV聯合檢測進行跟蹤測定， 持續3年， 分析研究HPV-脫氧核糖核酸（DNA）載量與疾病進程的關聯性， 并與病理診斷結果比較， 討論兩者對疾病檢測的敏感性及特異性。結果 350例篩查陽性患者中， 其中HR-HPV篩查陽性328例， 陽性率93.7%（328/350）， TCT篩查陽性234例， 陽性率66.9%（234/350）， 比較差異有統計學意義（P<0.05）。328例HR-HPV陽性患者中， 與病理檢查結果宮頸上皮內瘤變（CIN）Ⅱ級以上者相符合為126例， 敏感性為89.6%、特異性為38.4%；234例TCT篩查陽性患者中， 與病理結果符合者190例， 敏感性為68.6%、特異性為81.2%， 兩項檢測特異性、敏感性比較差異有統計學意義（P<0.05）。經過追蹤檢測發現， 宮頸病變CINⅠ級或以上病例病灶復發/殘留與病毒載量有一定關聯性， 宮頸病變CIN分級越高， 與病毒載量相關性越高（P<0.05）。結論 TCT技術和HR-HPV檢測方法各有優勢， HR-HPV聯合TCT技術可以有效提高宮頸癌檢出效率， 能夠彌補單一檢測方法的不足；HR-HPV檢測可以作為病程監控的敏感指標；將TCT與HR-HPV聯合檢查， 值得推薦。

【關鍵詞】 宮頸癌；高危型人乳頭瘤病毒；液基薄層細胞學技術

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.02.014

Research of clinical application of thinprep cytologic test combined with high-risk human papilloma virus detection in cervical cancer screening LI Guang-mei， XIAN Zhi-xia， DENG Shu-jing. Guangdong Wuchuan City Maternal and Child Health Hospital， Wuchuan 524500， China

【Abstract】 Objective To research clinical application effect by high-risk human papilloma virus （HR-HPV） detection and thinprep cytologic test （TCT） in precancerous lesions of uterine cervix， and to analyze their sensibility and specificity. Methods A total of 350 patients with positive pathological screening of cervical cancer all received TCT and HR-HPV detection for screening. Combination of TCT and HR-HPV detection as applied once per 6 months for monitoring detection in patients for 3 years. Analysis was made on correlation between HPV-desoxyribonucleic acid （DNA） capacity and disease progress. Comparing with pathological diagnosis outcomes， their sensibility and specificity in disease detection were discussed. Results Among the 350 patients with positive screening outcomes， there were 328 positive cases in positive HR-HPV screening， with positive rate as 93.7% （328/350）， and 234 positive cases in TCT screening， with positive rate as 66.9% （324/350）. Their difference had statistical significance （P<0.05）. Among 328 positive cases in positive HR-HPV screening， there were 126 corresponding cases with pathological detection over Cervical intraepithelial neoplasias （CIN） Ⅱ grade， with sensibility as 89.6% and specificity as 38.4%. Among 234 positive cases in TCT screening， there were 190 corresponding cases with pathological detection， with sensibility as 68.6% and specificity as 81.2%. The difference of sensibility and specificity had statistical significance between the two detection measures （P<0.05）. Monitoring detection showed certain correlation between lesions recurrencel residual and viral capacity in cases with over cervical lesion CIN Ⅰ grade， and higher cervical lesion CIN grade led to close correlation with viral capacity （P<0.05）. Conclusion Both TCT and HR-HPV detection contain their own advantages. Combination of HR-HPV and TCT can effectively improve detection efficiency of cervical cancer and cover shortages of single detection method. HR-HPV detection can be taken as the sensitive index in disease course monitoring. Combined detection by TCT and HR-HPV is worth recommending.

【Key words】 Cervical cancer； High-risk human papilloma virus； Thinprep cytologic test

宮頸癌為僅次于乳腺癌的女性第二位高發惡性腫瘤， 近年來， 該病發展呈現年輕化趨勢， 分子生物學的研究結論顯示：宮頸癌的發生跟HR-HPV的感染密切相關[1-4]。研究表明：HPV感染， 尤其HR-HPV感染是導致宮頸癌及其癌前病變的重要因素[1， 2]；TCT是采用TCT系統檢測宮頸脫落細胞并進行細胞學分類診斷， 它是目前公認的較為先進的一種宮頸癌細胞學檢查技術， 與傳統的宮頸刮片巴氏涂片檢查相比明顯提高了標本的滿意度及宮頸異常細胞檢出率， 成為宮頸癌篩查的主要手段。本課題以本市區年齡20～60歲有性生活史的社區女性為研究對象， 收集本社區女性宮頸癌病理篩查陽性患者， 對入選對象同時行TCT及HR-HPV檢測， 對陽性患者持續跟蹤3年， 探討HPV感染與宮頸癌疾病的關聯性， 旨在評價TCT聯合人乳頭瘤病毒檢測對社區女性宮頸癌篩查的有效性。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇本地區2011年9月～2013年9月宮頸癌病理篩查陽性者350例作為研究對象， 年齡20～60歲， 平均年齡（33.0±9.5）歲， 入選標準：已婚或有性生活史、表現健康、無婦科重大疾病或宮頸手術史， 產次0～2次， 平均產次1.5次， 妊娠史0～3次， 平均妊娠史1.8次；排除標準：排除已經診斷為宮頸癌或因各種原因切除子宮或宮頸的患者。本研究征得患者知情同意。

1. 2 方法 受檢者3～5 d內無陰道沖洗史或陰道內用藥， 受檢前24 h禁性生活， 由婦科醫生留取樣本分別置于液基細胞專用保存瓶/HPV專用病毒保存管中送檢， 所有檢測項目完成檢測時間不得>72 h；采用杭州博日全自動適時熒光定量DNA擴增技術， 對篩查樣本進行HR-HPV檢測， 試劑采用潮州凱普生物技術有限公司產品， 其中HPV基因型包括HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68共13種；運用全自動液基細胞檢測儀， 對病變細胞進行固定、分離、洗滌、染色、固片、鏡檢等流程， 實現對靶細胞的最高檢出效果， 儀器為珠海某生物公司提供， 試劑耗材為公司配套產品， 操作及結果判讀見說明書。對TCT篩查陽性、HR-HPV篩查陽性或TCT與HPV共同檢測陽性者由專人負責跟進， 提醒患者定期復查， 6個月1次， 持續跟進3年。

1. 3 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗；病理分型與病毒載量的關系采用線性關系分析。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

350例篩查陽性患者中， 其中HR-HPV篩查陽性328例，

陽性率93.7%（328/350）， TCT篩查陽性234例， 陽性率66.9% （234/350）， 比較差異有統計學意義（P<0.05）。328例HR-HPV陽性患者中， 與病理檢查結果CIN Ⅱ級以上者相符合為126例， 敏感性為89.6%、特異性為38.4%；234例TCT篩查陽性患者中， 與病理結果符合者190例， 敏感性為68.6%、特異性為81.2%， 兩項檢測特異性、敏感性比較差異有統計學意義（P<0.05）。經過追蹤檢測發現， 宮頸病變CINⅠ級

或以上病例， 病灶復發/殘留與病毒載量有一定關聯性， 宮頸病變CIN分級越高， 與病毒載量相關性越高（P<0.05）。見表1。

3 討論

據世界衛生組織（WHO）報道， 全世界每年發生的宮頸癌患者大約為50萬左右， 是僅次于乳腺癌的第二大女性殺手， 而發生在我國的宮頸癌患者每年則有約15萬人之眾， 接近全球發病人數的1/3.， 高居我國女性婦科惡性腫瘤的第一位[3]， 大量流行病學及分子生物學資料研究顯示：HPV感染與宮頸癌及其宮頸癌前病變關系密切[4-6]， 由于大部分HPV感染者多無臨床癥狀或臨床癥狀不明顯而往往被患者所忽視， 進而導致病毒在患者體內潛伏從而引發宮頸細胞進行性病變， 導致嚴重問題， 所以， 宮頸癌被檢出者往往處于臨床中晚期而致患者失去了最佳治療時間， 影響治療效果進而直接影響患者生存時間， 因此， 宮頸癌的早期診斷顯得尤為重要[6， 7]；本研究采用TCT對宮頸脫落細胞進行篩查， 特異性高達81.2%， 與相關研究的結論相近[4， 8]， 值得推廣。

研究發現：HPV感染后， 往往伴隨宮頸上皮細胞內瘤樣病變的存在[7-10]， 孫笑非等[5]研究認為：持續攜帶HPV強烈提示感染者處于繼發癌前病變的高危環境中；許曉紅等[6]研究提示：宮頸癌中HPV感染率（84.6%）超過80%， 明顯高于宮頸糜爛感染率（52.1%）， 表明HPV感染是導致宮頸癌的主要原因， 且HPV感染與宮頸糜爛、與宮頸癌的發生、發展密切關聯；陳艷等[11]研究顯示：HPV的持續陽性是CIN發生發展的重要原因， 宮頸病變及宮頸癌的病灶殘留與復發與HPV病毒載量明顯關聯， 與本研究結論相近， 提示監控HPV病毒復制及載量檢測， 可以作為宮頸疾病監控的有效手段。

本研究顯示， HR-HPV檢測與TCT篩查與病理檢查結果對比發現， HR-HPV具有較高敏感性但特異性稍差， 一方面說明宮頸疾病改變是一種時間漫長的漸進性過程， 同時也為臨床防范宮頸疾病惡變提供了時間窗口；TCT篩查雖然有較高的特異性， 而敏感性稍差且需要有高年資專業醫生操作及診斷， 稍顯不足， 但TCT作為一種非創傷性檢測手段， 仍不失為一種可靠而方便的檢查方法。

總之， 將TCT與HR-HPV聯合檢查， 既滿足了臨床早發現早干預的需求， 又能借助對HPV病毒載量的檢測起到對疾病轉歸情況的實時監控， 不失為一種特異且高效的檢測手段， 值得推薦。

參考文獻

[1] 楊敏. 美國最新子宮頸癌篩查指南的介紹. 中華婦產科雜志， 2013， 48（5）：394-396.

[2] 瑛玉. 美國最新子宮頸癌篩查異常女性的臨床處理指南介紹. 中華婦產科雜志， 2014， 49（1）：73-77.

[3] 金善， 崔滿華， 李東， 等. TCT及HPV檢查對宮頸疾病篩查價值中的Meta分析研究. 腫瘤學雜志， 2014， 20（3）：203-207.

[4] 許劍利， 徐克惠.高危型HPV檢測及TCT檢查在宮頸癌篩查中的應用分析.實用婦產科雜志， 2014， 30（12）：946-948.

[5] 孫笑非， 顧依群， 王愛春， 等.高危型人乳頭瘤病毒檢測結合薄層細胞學檢查在宮頸癌篩查中的價值評估.中華實驗和臨床病毒學雜， 2013， 27（4）：273-275.

[6] 許曉紅， 解正新， 馬嶸， 等. HPV高危型別檢測聯合細胞學檢查對宮頸病變篩查的研究. 中華實驗和臨床病毒學雜志， 2011， 25（4）：299-301.

[7] 臧元怡.高危HPV檢測聯合TCT在宮頸癌篩查中的應用.現代中西醫結合雜志， 2015， 24（11）：1184-1186.

[8] 王步軍， 鄭飛云. HPV檢測、TCT及宮頸刮片在宮頸癌和癌前病變篩查中的應用.中國婦幼保健， 2008， 23（5）：707-709.

[9] 李新敏， 古雅麗. 兩種宮頸癌篩查方法對比研究及臨床分析. 臨床與病理雜志， 2012， 32（5）：393-396.

[10] 季雯婷， 樓微華， 洪祖蓓， 等. TCT、HPV、h-TERC基因和c-MYC基因聯合檢測在宮頸疾病篩查中應用價值研究. 現代婦產科進展， 2014， 23（2）：105-108.

[11] 陳艷， 林琳， 賈志強， 等.高危型HPV載量及IFNγ基因多態性與LEEP術后CIN患者預后的相關性.溫州醫科大學學報， 2015， 45（10）：739-741.

[收稿日期：2017-01-10]