復合型甘藍夜蛾核型多角體病毒制劑對菜粉蝶幼蟲室內毒殺試驗

楊士杰

摘 要：室內試驗結果顯示，由甘藍夜蛾核型多角體病毒（MbNPV）與棉鈴蟲核型多角體病毒（HaNPV）按1∶1復合而成的復劑，與甘藍夜蛾核型多角體病毒單一制劑相比，在相同濃度下毒殺菜粉蝶幼蟲效果差異顯著（F復=40.38>F0.01（5，45）=3.47）。感染病毒的第6、7天測定，甘藍夜蛾核型多角體病毒復劑對菜粉蝶幼蟲的毒殺效果分別是單劑的26.6，54.53倍；濃度為2.0×105，2.0×106的復劑毒殺菜粉蝶幼蟲死亡時間比相同濃度下單劑毒殺幼蟲死亡時間分別提前了1.285，2.358 d。

關鍵詞：MbNPV；HaNPV；菜粉蝶；復合毒殺；效果比較

中圖分類號：S476+.13 文獻標識碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2016.08.033

Abstract： The result of indoor experiment showed that compared with the cabbage moth karyotype polygonal body virus （MbNPV） and the karyotype of cotton bollworm polygonal body virus （HaNPV） with complex agent compounded by 1：1， and the single karyotype of cabbage moth polygonal body virus preparations under the same concentration had significant effect on cabbage white larvae （F = 40.38 > F0.01（5，45） = 3.47）. After 6，7 days， the effect of complex virus preparations on cabbage white larvae were respectively 26.6， 54.53 times than the single dose， under the same concentration the death time of complex virus preparations of 2.0×105，2.0×106 on cabbage white larvae were 1.285 d and 2.358 d ahead than the single dose respectively.

Key words： MbNPV； HaNPV； small white； compound poison； effect comparison

菜粉蝶是我國十字花科蔬菜上發生普遍的一種害蟲，它食量大，給十字花科蔬菜生產造成重大損失。化學農藥的頻繁使用，不僅對環境污染大，而且菜粉蝶幼蟲對多種農藥產生了不同程度的抗藥性。這既增加了防治難度，又提高了防治成本。因此，筆者采用生物農藥甘藍夜蛾核型多角體病毒（MbNPV）單劑和甘藍夜蛾核型多角體病毒與棉鈴蟲核型多角體病毒（HaNPV）復合劑對菜粉蝶幼蟲進行室內毒殺對比試驗，以期為田間生物防治提供參考。

1 材料和方法

1.1 病毒材料

甘藍夜蛾核型多角體病毒（MbNPV）：2.0×109 PIB·mL-1，由江西新龍生物科技有限公司提供。

棉鈴蟲核型多角體病毒（HaNPV）：2.0×109 PIB·mL-1，由江西新龍生物科技有限公司提供。

1.2 供試昆蟲

將養蟲室內飼養的同一天孵化的菜粉蝶幼蟲初齡幼蟲接入已經滅菌的養蟲管內，用無污染的新鮮甘藍嫩葉飼養到3齡初期，供毒殺試驗。

1.3 試驗方法

（1）甘藍夜蛾核型多角體病毒單劑對菜粉蝶幼蟲的毒殺試驗。取甘藍夜蛾核型多角體病毒材料1 mL，用蒸餾水稀釋成所需的6種濃度，分別是2.0×103，2.0×104，2.0×105，2.0×106，2.0×107，2.0×108 PIB·mL-1備用。用毛筆將3齡菜粉蝶幼蟲接入消過毒的干凈養蟲管內，每管1頭，饑餓8 h。取新鮮甘藍嫩葉洗凈晾干，經紫外燈照射20 min后，剪成3 cm×5 cm長方形，分別浸入不同濃度病毒懸浮液中2～3 s，取出晾干，分別移入各處理養蟲管中，每養蟲管1片。每30管為一濃度處理組，每組重復3次。設無菌水處理為對照，各處理均在26 ℃室內飼養感染36 h后，去掉殘余葉片，用無毒新鮮甘藍嫩葉繼續飼養。每天觀察幼蟲取食情況，接毒后第3、4、5、6、7 天記載各處理死亡數，并計算其平均死亡率、校正死亡率，進行方差分析，后繪出各濃度致死死亡曲線圖，并作比較分析[1-3]。

（2）甘藍夜蛾核型多角體病毒與棉鈴蟲核型多角體病毒混合復劑對菜粉蝶幼蟲毒殺試驗。將以上2種相同濃度的病毒材料各0.5 mL按1∶1混合后，用蒸餾水稀釋成所需的6種濃度分別是2.0×103，2.0×104，2.0×105，2.0×106，2.0×107，2.0×108 PIB·mL-1備用。后面處理方法、感染試驗操作同1.3的（1）[4-5]。

（3）病毒復劑與病毒單劑對菜粉蝶幼蟲毒殺結果分析比較。對甘藍夜蛾核型多角體病毒單劑毒殺菜粉蝶幼蟲的數據與甘藍夜蛾核型多角體病毒和棉鈴蟲核型多角體病毒混合復劑毒殺菜粉蝶幼蟲數據進行方差分析，列出各濃度對數和第6、7 天單劑和復劑毒殺菜粉蝶幼蟲死亡機率值，求出單劑、復劑回歸直線方程及相關系數、LC50、LT50、增效比，并分析比較[6-10]。

2 結果與分析

2.1病毒單劑對菜粉蝶幼蟲的毒殺試驗結果分析

以2.0×103，2.0×104，2.0×105，2.0×106，2.0×107，2.0×108 PIB·mL-1等 6種濃度甘藍夜蛾核型多角體病毒單劑感染3齡菜粉蝶幼蟲，其校正死亡率見表1。對表1進行方差分析，結果如表2。

由表2知，F=10.09>F0.05（5 ，20）=2.71、F=10.09>F0.01（5 ，20）=4.10，表明不同濃度間甘藍夜蛾核型多角體病毒單劑對菜粉蝶幼蟲毒殺效果差異顯著和極顯著。

從圖1知：隨著病毒單劑作用時間增加，菜粉蝶幼蟲死亡率陸續增加；隨著病毒作用濃度的增加，菜粉蝶幼蟲死亡率也逐漸增加，尤其以2.0×107，2.0×108 PIB·mL-12個處理死亡率增速相對顯著，在第6天死亡率分別達到77.6%和82.5%。而其他4個濃度對菜粉蝶幼蟲的致死率均在60%以下，尤其2.0×103，2.0×104 PI·mL-12個濃度致死率較低，增速較小。

2.2 病毒復劑對菜粉蝶幼蟲毒殺試驗結果分析

以2.0×103，2.0×104，2.0×105，2.0×106，2.0×107，2.0×10 8 PIB·mL-1等 6種濃度甘藍夜蛾核型多角體病毒單劑感染3齡菜粉蝶幼蟲，校正死亡率見表3。對表3進行方差分析，結果如表4。

由表4知，F=18.43>F0.05（5，20）=2.71、F=18.43>F0.01（5，20）=4.10，表明不同濃度間甘藍夜蛾核型多角體病毒與棉鈴蟲核型多角體病毒復劑對菜粉蝶幼蟲毒殺效果差異顯著和極顯著。

從圖2可知，2.0×106，2.0×107，2.0×108 PIB·mL-13個濃度的二種病毒復合劑致幼蟲死亡率在第4 天的增加就非常明顯，死亡率分別為65.4%，69.7%，73.8%，但濃度低的2.0×103，2.0×104 PIB·mL-1致幼蟲死亡率增幅較小，到第6天死亡率仍較低，分別為14.3%，32.2%。

2.3 復劑與單劑對菜粉蝶幼蟲毒殺結果對比分析

對表1和表3數據進行方差分析，結果見表5。

由表5知，F=40.38>F0.05（5，45）=2.43、F=40.38>F0.01（5，45）=3.47，表明甘藍夜蛾核型多角體病毒復劑與單劑對菜粉蝶幼蟲毒殺二者差異顯著和極顯著。

由第6、7 天不同濃度的單劑和復劑感染菜粉蝶幼蟲校對死亡率，得各對應的機率值（表6）。

由表6分別求出第6、7 天甘藍夜蛾核型多角體病毒單、復劑濃度對數與死亡機率值之間的回歸直線方程，結果見表7。

從表7知，第6、7 天單、復劑回歸直線方程的相關系數均大于r001（0.875），故回歸關系均極顯著，感染濃度對數值與校正死亡率呈高度相關性，制劑濃度與測定昆蟲死亡關系密切。從表7中還可知，感染病毒的第6天，復劑的致死中濃度LC50=3.674×105<單劑的致死中濃度LC50=9.651×105，即菜粉蝶幼蟲對復劑更敏感，甘藍夜蛾核型多角體病毒復劑對菜粉蝶幼蟲的毒殺效果是單劑的26.27倍。同樣，在感染病毒的第7天，復劑的致死中濃度LC50=2.360×104<單劑的致死中濃度LC50=1.287×105，即菜粉蝶幼蟲對甘藍夜蛾核型多角體病毒復劑更敏感，復劑對菜粉蝶幼蟲的毒殺效果是單劑的54.53倍；。

以2.0×105、2.0×106死亡時間對數和死亡機率值列出回歸直線方程，求相關系數、LT50，結果如表8。

從表8知，2種濃度的單劑和復劑回歸直線方程的相關系數均大于r0.01（0.917），以2.0×105，2.0×106 2種濃度感染幼蟲死亡時間與死亡率均存在顯著相關性。從表中還可知：2.0×105的復劑毒殺幼蟲死亡時間比相同濃度下單劑毒殺幼蟲死亡時間提前1.285 d；2.0×106的復劑毒殺幼蟲死亡時間比相同濃度下單劑毒殺幼蟲死亡時間提前2.358 d。

3 結 論

通過試驗可知，甘藍夜蛾核型多角體病毒與棉鈴蟲核型多角體病毒二者復合后，2.0×106，2.0×107，2.0×108 PIB·mL-13個濃度毒殺菜粉蝶幼蟲效果比甘藍夜蛾核型多角體病毒單劑均有顯著提高。感染病毒的第6 天測試，復劑的致死中濃度LC50=3.674×105<單劑的致死中濃度LC50=9.774×105，即復劑對菜粉蝶幼蟲的毒殺效果是單劑的26.6倍；在感染病毒的第7天，復劑的致死中濃度LC50=2.360×104<單劑的致死中濃度LC50=1.287×105，即復劑對菜粉蝶幼蟲的毒殺效果是單劑的54.53倍。以2.0×105的復劑毒殺幼蟲死亡時間比相同濃度下單劑毒殺菜粉蝶幼蟲死亡時間提前1.285 d；2.0×106的復劑毒殺菜粉蝶幼蟲死亡時間比相同濃度下單劑毒殺幼蟲死亡時間提前2.358 d。因此，甘藍夜蛾核型多角體病毒與棉鈴蟲核型多角體病毒復合后，能顯著提高甘藍夜蛾核型多角體病毒毒殺菜粉蝶幼蟲的效果。

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