血清分泌型卷曲相關蛋白5水平與2型糖尿病腎病的相關性

許 娜，郭淑芹，張云良，馬競軒，王 翯，白廣芹，提素芳，黃一茜，杜亞濤

（保定市第一中心醫院a.內分泌科；b.體檢科；c.檢驗科，河北保定071000）

血清分泌型卷曲相關蛋白5水平與2型糖尿病腎病的相關性

許 娜a，郭淑芹a，張云良a，馬競軒a，王 翯a，白廣芹a，提素芳a，黃一茜b，杜亞濤c

（保定市第一中心醫院a.內分泌科；b.體檢科；c.檢驗科，河北保定071000）

目的探討2型糖尿病（T2DM）患者血清分泌型卷曲相關蛋白5（SFRP-5）水平與糖尿病腎?。―N）的相關性。方法選擇T2DM住院患者137例，根據尿白蛋白排泄率（UAER）分為3組：正常白蛋白尿組（A組）47例；微量白蛋白尿組（B組）45例；大量白蛋白尿組（C組）45例。選擇50例健康體檢者作為對照組。ELISA法檢測血清SFRP-5，同時測定空腹靜脈血糖（FBG）、血脂、肝腎功能、UAER。比較各組間的指標差異。結果4組SFRP-5比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。T2DM患者血清SFRP-5的水平低于對照組，B組、C組血清SFRP-5水平高于A組，C組血清SFRP-5水平高于B組（均P＜0.05）。血清SFRP-5水平與舒張壓（DBP）、總膽固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、FBG、空腹血清胰島素（Fins）、胰島素抵抗指數（HOMA-IR）、尿素氮（BUN）、肌酐（CR）、UAER呈正相關，與高密度脂蛋白（HDL）、腎小球濾過率（GFR）、總膽紅素呈負相關。多元線性回歸分析顯示，UAER、HOMA-IR、空腹血糖（FBG）、空腹血糖（FBG）、尿酸（UA）、收縮壓（SBP）、TG是SFRP-5的獨立影響因素。結論T2DM患者血清SFRP-5水平隨著UAER的增加而升高，兩者可能參與糖尿病腎病的發生，并可能成為糖尿病腎病發生及發展過程中的新的標記物。

糖尿病，2型；糖尿病腎病；分泌型卷曲相關蛋白5

分泌型卷曲相關蛋白5（secreted frizzled-relatedprotein-5，SFRP-5）是分泌型卷曲相關蛋白家族中的一員，被證實是繼脂聯素后的又一抗炎脂肪因子，其可能通過炎癥反應參與肥胖及糖尿病等代謝性疾病的發生［1］。目前，關于SFRP-5與糖尿病微血管病變的研究少見報道。本研究通過測定2型糖尿?。═2DM）患者血清SFRP-5水平變化，探討T2DM患者血清SFRP-5與尿微量白蛋白排泄率（UAER）的相關性及血清SFRP-5是否可以作為糖尿病腎?。―N）早期預測指標。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2015年12月至2016年5月保定市第一中心醫院內分泌科住院治療的T2DM患者137例。根據UAER水平將患者分為3組：正常白蛋白尿（UAER＜20μg／min）；微量白蛋白尿（20μg／min≤UAER＜200μg／min）；大量白蛋白尿（UAER≥200μg／min），其中正常白蛋白尿組（A組）男25例，女22例，平均年齡（55.04±8.52）歲，微量白蛋白尿組（B組）男21例，女24例，平均年齡（57.56±9.58）歲，大量白蛋白尿組（C組）男28例，女17例，平均年齡（56.27±9.94）歲。所有研究對象均符合1999年美國食品藥品管理局（WHO）T2DM的診斷標準；排除標準：①有心臟、肝臟、其他腎臟疾病以及各種感染性疾病者；②1型糖尿病患者；3個月內發生酮癥酸中毒或高滲性昏迷者；③近2周服用血管緊張素轉化酶抑制劑、血管緊張素受體阻斷劑、胰島素增敏劑及其他影響尿蛋白藥物者。同時，選取同期于我院體檢科50例正常體檢者作為對照組，其中，男25例，女25例，平均年齡（53.96±10.33）歲。

1.2 研究方法 記錄研究對象的性別、年齡、病程，測量其身高、體質量、血壓，均禁食10小時于次日清晨采集空腹靜脈血5 ml。采用日立全自動7600生化儀器檢測空腹血糖（FBG）、總膽固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、尿酸（UA）、丙氨酸轉氨酶（ALT）、天冬氨酸轉氨酶（AST）等生化指標，電化學發光法（德國羅氏電化學發光儀Cobas6000-E601）測定空腹胰島素（FIns），利用穩態模式評估法（HOMA model）計算胰島素抵抗指數（HOMA-IR）＝（FBG×FIns）／22.5。根據Cockcroft-Gault公式計算腎小球濾過率（eGFR）＝（140-年齡）×體質量（kg）×K／血漿Cr（μmol／L）。K：男性1.25，女性1.03。抽血后留取24小時尿測定UAER（免疫散射法，重慶博士泰生物技術有限公司提供的全自動特定蛋白分析儀）。ELISA法測定SFRP-5（上海酶聯生物科技有限公司提供試劑盒，批內差異＜6%，批間差異＜10%）。

1.3 統計學方法 應用SPSS 19.0統計軟件進行統計分析處理，正態分布的計量資料以均數±標準差（±s）表示，非正態分布計量資料用中位數（四分位間距）表示。多組間比較用方差分析，組間差異比較采用t檢驗，計數資料用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。對于非正態分布用非參數檢驗進行比較。相關性分析使用Pearson方法。通過多元線性回歸分析SFRP-5的相關影響因素。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 一般資料及生化指標 4組性別、年齡、BMI、ALT、AST差異均無統計學意義。4組SFRP-5比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。T2DM患者血清SFRP-5的水平顯著低于對照組（P＜0.05），B組、C組血清SFRP-5水平顯著高于A組（P＜0.05），C組血清SFRP-5水平顯著高于B組（P＜0.05）。4組DBP、CHO、TG、FBG逐漸升高，差異均有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 各組一般資料及生化指標比較

注：A組：正常白蛋尿組；B組：微量白蛋尿組；C組：大量蛋白尿組。與對照組比較，*P＜0.05；與A組比較，＃P＜0.05；與B組比較，▲P＜0.05；1 mm Hg＝0.133 kPa

2.2 SFRP-5與相關指標的相關性分析 T2DM患者血清SFRP-5水平與DBP、CHO、TG、FBG、Fins、HOMA-IR、BUN、Cr、UAER呈正相關（P＜0.05），與HDL-C、eGFR、總膽紅素呈負相關（P＜0.05）。見表2。

表2 SFRP-5與相關指標的相關性分析

2.3 SFRP-5的相關影響因素分析 以SFRP-5為因變量Y，以DBP、CHO、TG、HDL-C、總膽紅素、FBG、Fins、HOMA-IR、BUN、Cr、UAER、eGFR為自變量，進行多元線性回歸分析，結果顯示，UAER、HOMA-IR、FBG、FBG、UA、SBP、FBG、TG是SFRP-5的獨立影響因素。見表3。

表3 SFRP-5與各相關指標的多元線性回歸結果

3 討 論

糖尿病是一種以高血糖為特征的代謝性疾病。我國20歲以上人群中，糖尿病的患病率為9.7%［2］。DN是糖尿病特異性微血管并發癥，也是糖尿病患者常見的慢性并發癥之一。DN已成為歐美國家終末期腎?。╡nd-stage renal disease，ESRD）的首位原因，在我國ESRD的病因中也高居第2位［3］。DN發展隱匿，早期不易發現，患者一旦出現大量蛋白尿，缺乏有效的治療措施，很快進展為ESRD。因此，對DN早期篩查及治療方法的探索顯的尤為重要。目前認為DN是腎臟血流動力學改變、糖脂代謝紊亂、氧化應激、多種細胞因子、胰島素抵抗和遺傳因素共同作用的結果［4］。研究認為，慢性、低水平炎性反應在DN的發生及發展中起重要作用［5］。

目前研究證實SFRP-5是一種新發現的抗炎脂肪因子。Ouchi等［6］研究表明SFRP-5可能通過抗炎機制實現增強胰島素敏感性及改善糖代謝異常。其具體機制為SFRP-5與脂肪細胞分泌的Wnt5a結合，阻止非經典的Wnt信號通路下游的c-Jun氨基端激酶磷酸化，抑制巨噬細胞激活，減少腫瘤壞死因子、白細胞介素6等炎癥因子釋放，最后減弱炎癥對胰島素信號通路的抑制作用，拮抗胰島素受體底物1絲氨酸磷酸化，從而增加胰島素敏感性，改善胰島素抵抗。但是，Mori等［7］研究發現，沉默SFRP-5并不影響胰島素信號通路中胰島素受體底物1絲氨酸及c-Jun氨基端激酶磷酸化，因此提出了，Wnt5a或SFRP-5可能不參與調控脂肪細胞胰島素敏感性。本研究發現，A組血清SFRP-5較對照組水平降低，這與Hu等［8］及尹經霞等［9］研究結果一致，但與Mori等［7］，Canivell等［10］研究結果相反。考慮可能與實驗設計，Elise實驗操作過程差異，人與實驗動物的差異，或者地域與種族區別有關。

劉云濤等［11］研究認為SFRP-5在單純糖尿病組及早期腎病組表達水平逐漸降低，考慮可能有胰島素或TNF-α水平升高抑制SFRP-5分泌有關。本研究發現SFRP-5在糖尿病各組表達水平隨著腎臟病變程度加重而增加。患者單純患糖尿病的情況下，SFRP-5表達水平下降［12］，合并腎臟病變后表達水平逐漸升高，推測可能機制是：①腎臟病變刺激機體分泌更多地SFRP-5以對抗炎癥反應；②腎臟病變導致腎臟濾過功能減低，SFRP-5排泄減少導致SFRP-5升高。目前具體機制尚不明確，有待進一步研究。本研究與劉云濤等［11］研究結果不一致，考慮原因可能與入選研究對象存在差異有關，劉云濤研究中所納入病例病程較短，均小于3年，且UAER等指標數值偏低或血糖控制情況不相等。本樣本為小樣本試驗存在混雜因素較多，有待大樣本流行病學調查進一步研究SFRP-5在糖尿病中的表達。

本研究發現，T2DM患者SFRP-5與FBG、CHO、TG、HDL-C、HOMA-IR有關，說明SFRP-5可能通過糖脂代謝、胰島素抵抗共同作用于DN的發生發展。SFRP-5與BUN、CR、UAER、eGFR有相關性，推測SFRP-5可能參與了DN的發生發展。多元線性回歸分析顯示UAER、HOMA-IR、FBG、TG是SFRP-5的獨立影響因素。進一步證實了SFRP-5可能通過糖脂代謝、胰島素抵抗參與DN的發生。

另外，本研究發現血清SFRP-5水平與總膽紅素水平相關。膽紅素作為機體內的一種天然內源性抗氧化劑，能夠清除自由基、抑制脂質過氧化、減輕氧化損傷［13］。張曉凡等［14］研究發現血清膽紅素是早期DN的觀察指標。目前許多研究均證實，每1 mmol／L膽紅素可以清除2 mmol／L過氧化自由基［15］。也就是說血清膽紅素水平在一定程度上可以反映機體抗氧化的能力。本研究還發現UA是SFRP-5的獨立影響因素，多項研究已證明UA是一種強大的抗氧化劑，且與DN有關［16-17］。Carstensen等［18］研究發現SFRP-5與氧化應激標記物8-Isoprostane、Nitrotyrosine相關，也證明SFRP-5與氧化應激有關。因此，SFRP-5或可通過氧化應激作用于DN的發生發展。

綜上所述，糖尿病患者血清SFRP-5水平隨UAER增加而升高，說明其可能參與DN發生發展，為T2DM早期診斷及病情評估中提供新思路。但SFRP-5在DN發病中的具體機制還需要更深入的研究證明。

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ReIationship study between serum secreted frizzIed-reIated protein 5 IeveI and diabetic nephropathy

Xu Naa，Guo Shuqina，Zhang Yunlianga，Ma Jingxuana，Wang Hea，
Bai Guangqina，Ti Sufanga，Huang Yiqianb，Du Yataoca.Department of En docrinology；b.Department of Physical Examination；c.Department of Laboratory Medicine，Baoding No.1 Central Hospital，Baoding 071000，China Correspon din g author：Guo Shuqin，Email：977516748＠qq.com

ObjectiveTo investigate relationship between serum secreted frizzled-related protein 5（SFRP-5）and diabetic nephropathy.MethodsA total of 137 patients with type 2 diabetes mellitus were enrolled.According to urinary albumin excretion rate，all patients with type 2 diabetes mellitus were divided into three groups：normal albuminuria group（group A，n＝47），microalbuminuria group（group B，n＝45）and macroalbuminuria group（group C，n＝45）.The control group included 50 healthy individuals.Serum SFRP-5 was determinated with ELISA method.Fasting venous blood samples were collected for glucose and lipid.Twenty-four hour urine was also collected for UAER.Differences of indexes were compared between groups.ResuItsThe level of serum SFRP-5 between groups was statistically significant（P＜0.05）；The level of serum SFRP-5 in T2DM group was significantly lower than that of the normal control group（P＜0.05）；The levels of serum SFRP-5 in the microalbuminuria group and macroalbuminruia group were significantly higher than that of normal albuminuria group（P＜0.05），and the level of serum SFRP-5 in the macroalbuminuria group was significantly higher than that of the microalbuminuria group（P＜0.05）.Correlation analysis showed that the levels of SFRP-5 were positively correlated with DBP，CHO，TG，FBG，Fins，HOMA-IR，BUN，CR and UAER，and negatively correlated with HDL，eGFR and total bilirubin.Multiple linear regression analysis showed that the levels of UAER，HOMA-IR，FBG，UA，SBP and TG were independent influencing factors for SFRP-5.ConcIusionSerum SFRP-5 gradually increases as the urinary albumin excretion rate becomes higher in patients with type 2 diabetes mellitus，both may be involved in the occurrence and development of diabetic nephropathy（DN），and may Serum SFRP-5 become a new marker of diabetic nephropathy.

secreted frizzled-related protein 5；type 2 diabetes mellitus；diabetic nephropathy

R587.2

：A

：1004-583X（2017）03-0233-04

10.3969／j.issn.1004-583X.2017.03.013

2016-11-03 編輯：王秋紅

郭淑芹，Email：977516748＠qq.com