雞大腸桿菌對12種抗菌藥的藥敏試驗(yàn)

楊立 姚小青 陳海婷/常州市金壇區(qū)金城獸醫(yī)站

雞大腸桿菌對12種抗菌藥的藥敏試驗(yàn)

楊立 姚小青 陳海婷/常州市金壇區(qū)金城獸醫(yī)站

雞大腸桿菌病一年四季均可發(fā)生，但以冬春寒冷和氣溫多變季節(jié)多發(fā)。在自然條件下，本病可發(fā)生于各種年齡的雞，但多發(fā)生于雛雞，特別是3～6周齡內(nèi)的雛雞最為易感。發(fā)病率一般在30%～69%之間，死亡率42%～75%，致死率可高達(dá)100%。隨糞便污染蛋殼的E.coli可感染雞胚，造成雞胚在孵化期死亡。或者被感染的雞胚雖可孵出雛雞，但在第1周內(nèi)即死于臍炎或以卵黃感染而引起生長緩慢。一般情況下，養(yǎng)殖場的大腸桿菌病可通過呼吸道感染而引起。本病常與某些細(xì)菌及病毒同時感染。傳染源主要是被上述血清型的致病病性E.coli所污染的卵、病雞及其分泌物、排泄物，被污染的飼料、飲水、墊草和塵土等。感染途徑為消化道和呼吸道，鼠和臭蟲是該病病原體的攜帶者。

一、臨床癥狀

病禽精神不振，不愛活動，常呆立于禽舍一隅，羽毛松亂，兩翅下垂，食欲減少等一般性病狀。由于大腸桿菌病的臨診病型不同，可以出現(xiàn)腸炎、敗血癥、呼吸道炎、輸卵管炎、眼炎、關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)癥狀、腫頭綜合征等為主的相應(yīng)的癥狀。如雞發(fā)生氣囊炎時，則見病雞呼吸困難，咳嗽，有羅音，羽毛松亂，精神差，食欲減少，肉仔雞則增重緩慢。腸炎型病雞除見一般病狀外，主要是拉稀，消瘦，最后衰竭死亡。關(guān)節(jié)炎時，則見關(guān)節(jié)腫大，跛行。眼炎時，則見流淚，結(jié)膜潮紅，角膜混濁，有膿性分泌物，瞳孔縮小，重者眼前房破潰，失明。神經(jīng)型（腦型）病雞。1986年廣東省首次報(bào)道了大腸桿菌引起的腦炎（現(xiàn)國內(nèi)已有多次報(bào)道），除一般病狀外，主要癥狀是昏睡及神經(jīng)紊亂，歪頭、斜頸，轉(zhuǎn)圈，共濟(jì)失調(diào)，抽搐等神經(jīng)癥狀，以及下痢。除以上原發(fā)性感染時的病型外，如有繼發(fā)或并發(fā)病時，則有其相應(yīng)的病狀。

二、藥敏試驗(yàn)

本文就金壇地區(qū)3個雞場5周齡雞發(fā)生本發(fā)生的以精神不振，采食減少、拉稀等為病癥，部分死亡，剖檢有疑似大腸桿菌病的病例進(jìn)行病原分離鑒定，從分離出的菌株中挑選9株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，旨在為雞大腸桿菌病的診斷和治療提供參考。現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果報(bào)告。

三、試驗(yàn)方法和結(jié)果

（一）細(xì)菌的分離和培養(yǎng)

剖解病雞觀察病變，取病變部位（如肝、小腸）進(jìn)行細(xì)菌的分離。用滅菌的接種環(huán)挑取部分組織在麥康凱培養(yǎng)基進(jìn)行三區(qū)劃線。37℃培養(yǎng)24 h，觀察時候有單個紅色菌落，同時取一小部分組織放到LB液體培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 h進(jìn)行增菌。如麥康凱培養(yǎng)基沒有形成菌落，用LB培養(yǎng)的菌液在麥康凱培養(yǎng)基進(jìn)行三區(qū)劃線，37℃培養(yǎng)24 h觀察是否形成單個紅色菌落。

（二）細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)

對分離的細(xì)菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，采用紙片擴(kuò)散法。在“超凈臺”中，用經(jīng)酒精燈火焰滅菌的接種環(huán)挑取適量細(xì)菌培養(yǎng)物，以劃線方式將細(xì)菌均勻涂布到麥康凱瓊脂平板上。

用滅菌接種環(huán)取適量細(xì)菌分別在平皿邊緣相對四點(diǎn)涂菌，以每點(diǎn)開始劃線涂菌至平皿的二分之一。然后，找到第二點(diǎn)劃線至平皿的二分之一，依次劃線，直至細(xì)菌均勻密布于平皿。

將鑷子于酒精燈火焰滅菌后略停，去藥敏片貼到平皿培養(yǎng)基表面。為了使藥敏片與培養(yǎng)基緊密相貼，可用鑷子輕按幾下藥敏片。為了使能準(zhǔn)確的觀察結(jié)果，要求藥敏片能有規(guī)律的分布于平皿培養(yǎng)基上；一般可在平皿中央貼一片，外周可等距離貼若干片（外周一般可貼七片），每種藥敏片的名稱要記住。將平皿培養(yǎng)基置于37℃溫箱中培養(yǎng)24 h后，觀察效果。

（三）藥敏試驗(yàn)結(jié)果

判定標(biāo)準(zhǔn)：抑菌圈直徑（φ）≥18 mm為高度敏感；抑菌圈直徑18 mm＞（φ）≥14 mm為中度敏感；抑菌圈直徑14＞（φ）≥10 mm為低度敏感；抑菌圈直徑10 mm＞（φ）為耐藥。

四、討論

此項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)：不論是標(biāo)準(zhǔn)菌株還是所分離的大腸桿菌對安普霉素、阿米卡星具有高度敏感性；新霉素、慶大霉素、頭孢噻肟鈉、恩諾沙星、環(huán)丙沙星敏感性居中；而對氟苯尼考、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、頭孢氨芐抑菌作用較低，甚至已產(chǎn)生耐藥性。安普霉素、阿米卡星、慶大霉素及新霉素均為氨基糖苷類抗生素，對金葡菌、綠膿桿菌、大腸桿菌及變形桿菌等均有效。此項(xiàng)試驗(yàn)證實(shí)：氨基糖苷類抗生素不僅對標(biāo)準(zhǔn)菌株具有較強(qiáng)的抗菌活性，而且對各種臨床菌株也具有較強(qiáng)的抗菌活性。掌握雞致病性大腸桿菌的耐藥情況，通過藥敏試驗(yàn)尋找療效最好的藥物，是解決大腸桿菌病的主要手段。