HER2/c-erbB-2蛋白在胃癌組織中的表達及其臨床意義

陸藝，姜保成，費建平

(上海交通大學醫學院蘇州九龍醫院普外科，江蘇 蘇州 215021)

HER2/c-erbB-2蛋白在胃癌組織中的表達及其臨床意義

陸藝，姜保成，費建平

(上海交通大學醫學院蘇州九龍醫院普外科，江蘇 蘇州 215021)

目的探討表皮生長因子受體2(HER2/c-erbB-2)蛋白在胃癌患者癌組織、遠癌正常胃組織中的表達及其與患者臨床特征參數和生存期的關系。方法選取2012年1月至2015年10月上海交通大學醫學院蘇州九龍醫院普外科手術治療的88例胃癌患者為研究對象，采用IHM兩步方法檢測88例胃癌患者癌組織及26例部分配對遠癌正常胃組織中HER2/c-erbB-2的表達情況。分析胃癌患者癌組織中HER2/c-erbB-2陽性表達與患者的年齡、性別、淋巴結轉移等臨床病理特征的關系；比較HER2/c-erbB-2陽性胃癌患者與陰性患者生存期有無差別。結果HER2/c-erbB-2蛋白主要在胞膜中表達，少部分表達于細胞漿；HER2/c-erbB-2在癌及遠癌組織中陽性率分別為27.3%和3.8%，癌組織顯著高于遠癌組織，差異有統計學意義(P＜0.05)；HER2/c-erbB-2陽性表達與腫瘤的浸潤深度和區域淋巴結轉移有關(P＜0.05)；HER2/c-erbB-2陽性和陰性患者中位生存時間分別為13.8個月與33.9個月，兩組比較差異有統計學意義(HR=2.25，95%CI：1.06～4.80，P＜0.05)。結論HER2/c-erbB-2蛋白可能與胃癌的發生發展及侵襲轉移有關，并可作為預后不良的分子標志物。

胃癌；表皮生長因子受體2；預后

胃癌臨床上較為常見，來自北美的流行病學資料顯示，2012年美國胃癌新發病21 320例，當年胃癌死亡10 540例[1]。在我國胃癌的發病率一直居高不下，農村發病率顯著高于城市，欠發達地區高于發達地區，且近年來發病率有升高趨勢。與日本相比，我國胃癌患者確診時晚期患者比例較高，大多數患者確診時已發生區域淋巴結轉移或遠處轉移，預后較差。近年來的研究顯示腫瘤癌基因的過表達與抑癌基因的低表達在胃癌的發生發展中起到重要作用。近年來的文獻報道，HER2/c-erbB-2在人多種惡性腫瘤中高表達，并與患者預后不良有關[2-3]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月至2015年10月上海交通大學醫學院蘇州九龍醫院普外科手術治療的88例胃癌患者為研究對象。采用免疫組織化學SP法檢測88例胃癌患者手術切除的癌組織及配對的26例遠癌正常胃組織中HER2/c-erbB-2蛋白的表達情況。88例胃癌患者年齡33～78歲，平均（58.3±16.6）歲；男性51例，女性37例；臨床分期Ⅰ/Ⅱ期41例，Ⅲ/Ⅳ47例；腫瘤位于賁門者36例，幽門者38例，位于中部胃體者14例；術后證實區域淋巴結轉移者60例，無區域淋巴結轉移者28例。

1.2 儀器設備 石蠟切片機（購自德國徠卡公司），顯微鏡（購自日本奧林巴斯公司）、電熱恒溫箱（上海榮珂檢測儀器有限公司生產），電熱恒溫鼓風干燥箱(上海躍進醫療儀器廠)，臺式離心機（購自美國貝克曼公司）。

1.3 主要試劑 兔抗人HER2/c-erbB-2多克隆抗體，購自美國Sigma公司；EliVisionlM廣譜染色及DAB顯色試劑盒，均購于中山科技(北京)有限公司。

1.4 免疫組化檢測 EnVision二步法，具體操作是實驗室操作流程說明進行，首先常規進行脫蠟并水化，3%過氧化氫處理8 min，用于清除內源酶活性，枸櫞酸高壓抗原修復，試劑A室溫封閉15 min，一抗4℃過夜，二抗37℃溫育20 min，試劑C 37℃溫育10 min，DAB顯色，蘇木素復染。

1.5 結果判定[4]兩位資深的病理科醫師獨立進行閱片，在高倍鏡下選取5個視野，計算每個視野下的HER2/c-erbB-2陽性細胞比例。陽性細胞均以細胞質中出現棕黃色顆粒為主。陽性細胞＜5%為-；陽性細胞5%～25%為+；陽性細胞25%～50%為++；陽性細胞＞50%為+++。

1.6 統計學方法 應用stata12.0統計軟件進行數據分析，計數資料采用例表示，組間比較采用χ2檢驗；生存數據采用中位數表示，組間比較采用生存曲線Log-rank檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 HER2/c-erbB-2蛋白表達 HER2/c-erbB-2蛋白主要在細胞膜中表達，少部分表達于細胞漿(圖1)。HER2/c-erbB-2在癌及遠癌組織中陽性率分別為27.3%和3.8%，癌組織中HER2/c-erbB-2表達陽性率明顯高于遠癌組織，差異有統計學意義(χ2=6.43，P＜0.05)。

圖1 HER2/c-erbB-2蛋白在癌組織中的表達(A:陰性；B：陽性)

2.2 HER2/c-erbB-2蛋白表達與臨床病理參數的關系 HER2/c-erbB-2表達與腫瘤的浸潤深度、區域淋巴結轉移有關(P＜0.05)；而與患者的年齡、性別、臨床分期、病理分級和病變部位無關(P＞0.05)，見表1。

表1 HER2/c-erbB-2蛋白表達與與患者臨床特征(例)

2.3 HER2/c-erbB-2表達與患者預后 HER2/ c-erbB-2表達陽性患者的中位生存時間為13.8個月，陰性患者為33.9個月，兩組比較差異有統計學意義HR=2.25，95%CI：1.06～4.80(P＜0.05)。

圖2 HER2/c-erbB-2陽性與陰性患者生曲線

3 討 論

從GenBank數據庫中我們查找HER2/c-erbB-2基因發現，該基因在人類定位17號染色體長臂12帶21區。HER2/c-erbB-2轉錄后的mRNA編碼一個185 kda跨膜的且具有TK活性的蛋白[5]。近年來的研究顯示，HER2/c-erbB-2在人類多種惡性實體腫瘤組織中呈現表達水平升高，并與患者腫瘤的惡性程度有關，陽性表達患者往往預后較差，中位生存時間較短[6-7]。

胃癌是臨床上較為常見的實體惡性腫瘤之一，也是消化系統最為常見的惡性腫瘤。但胃癌發生發展的確切分子機制仍然不是十分清楚，同時其預后并不理想，晚期患者5年生存率較低。既往有研究報道[8]，HER2/c-erbB-2在胃癌組織中大多呈現高表達且與患者的預后不良有關。豆穎等[8]應用免疫組化法檢測在78例原發胃癌及39例正常胃組織中HER2/c-erbB-2基因的表達情況，發現HER2/c-erbB-2在癌和正常胃細胞中陽性率分別為23.08%和0，正常細胞中幾乎不表達。同時還發現HER2/c-erbB-2與腫瘤部位和大體分型有關，但與細胞分化情況無關(P＞0.05)。因而，作者認為HER2/c-erbB-2是否表達與患者的預后存在相關性，可作為預后的分子標志物，并通過分析HER2/ c-erbB-2表達水平，從而判斷患者是否能從輔助化療中受益。裴波及其同事[4]觀察77例胃癌患者HER2/ c-erbB-2的表達情況，發現HER2/c-erbB-2在癌組織中的表達率為10.4%，而在正常胃組織中不表達，與豆穎等[8]的研究一致。而本研究顯示HER2/c-erbB-2在胃癌組織中陽性率為27.3%，略高于豆穎等[8]和裴波等[4]的結果，分析原因可能與納入研究患者的臨床病理特征等不完全相同有關。但我們的研究顯示HER2/ c-erbB-2陽性表達與患者的腫瘤浸潤深度(P＜0.05)、區域淋巴結轉移(P＜0.05)有關，這與裴波等[4]的研究結論一致。因此，可以認為HER2/c-erbB-2可能與胃癌的發生發展及侵襲轉移有關，但由于樣本量相對較小，統計學效能不高，其相關性有待大樣本研究進一步證實。同時我們對HER2/c-erbB-2表達與患者的生存期進行了對比研究，結果發現HER2/c-erbB-2陽性和陰性患者中位生存時間分別為13.8個月和33.9個月，陽性表達患者的中位生存時間顯著短于陰性患者，研究結果與Uprak等[9]的報道一致。因此，我們認為，HER2/c-erbB-2的陽性表達可作為判斷胃癌患者預后不良的腫瘤標志物。

[1]Siegel R,Ma J,Zou Z,et al.Cancer statistics,2014[J].CA Cancer J Clin,2014,64(1):9-29.

[2]Selcukbiricik F,Erdamar S,Buyukunal E,et al.Is her-2 status in the primary tumor correlated with matched lymph node metastases in patients with gastric cancer undergoing curative gastrectomy?[J]. Asian Pac J Cancer Prev,2014,15(24):10607-10611.

[3]Arslan D,Uysal M,0000-0002-8524-0665 AO,et al.Her-2 positive gastric cancer presented with thrombocytopenia and skin involvement:a case report[J].Case Rep Oncol Med,2014,2014:194636.

[4]裴波,寸英麗,查勇,等.胃癌組織HER-2表達預后意義分析[J].中華腫瘤防治雜志,2015,22(5):359-362,367.

[5]Hsu JT,Chen TC,Tseng JH,et al.Impact of HER-2 overexpression/ amplification on the prognosis of gastric cancer patients undergoing resection:a single-center study of 1,036 patients[J].Oncologist, 2011,16(12):1706-1713.

[6] Lesnikova I,Lidang M,Hamilton-Dutoit S,et al.HER2/neu (c-erbB-2)gene amplification and protein expression are rare in uterine cervical neoplasia:a tissue microarray study of 814 archival specimens[J].APMIS,2009,117(10):737-745.

[7]Eccles SA.The role of c-erbB-2/HER2/neu in breast cancer progression and metastasis[J].J Mammary Gland Biol Neoplasia,2001,6 (4):393-406.

[8]豆穎,閆哲,劉秀芹,等.胃癌組織中Her-2的表達及臨床病理意義[J].中國實用醫藥,2015,10(5):1-3.

[9]Uprak TK,Attaallah W,Celikel CA,et al.HER-2 incidence in gastric cancer,its association with prognosis and clinicopathological parameters[J].Ulusal Cerrahi Dergisi,2015,31(4):207-213.

Expression of HER2/c-erbB-2 protein in gastric carcinoma and its clinical significance.

LU Yi,JIANG Bao-cheng, FEI Jian-ping.Department of General Surgery,Suzhou Kowloon Hospital Shanghai Jiao Tong University,School of Medicine,Suzhou 215021,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of epidermal growth factor receptor 2(HER2/c-erbB-2) protein in gastric carcinoma tissue and normal gastric tissue,and to analyze its relationship with clinical parameters and survival time of patients.MethodsEighty-eight patients with gastric carcinoma who received operation therapy from Jan.2012 to Oct.2015 were selected as the research subjects.The expression of HER2/c-erbB-2 protein in the gastric cancer tissue(88 cases)and corresponding normal gastric tissue(26 cases)were evaluated by two step immunohistochemical(IHM)method.The relationships between the HER2/c-erbB-2 protein positive expression in gastric carcinoma and its clinicopathological characteristics such as age,gender,lymph node metastasis were analyzed.ResultsThe HER2/c-erbB-2 protein was mainly expressed in the cell membrane,and a small part was expressed in the cytoplasm. The positive rate in carcinoma tissue was significantly higher than that in normal gastric tissue,27.3%vs 3.8%,and the difference was statistically significant(P＜0.05).The positive expression of HER2/c-erbB-2 was related to the depth oftumor invasion and regional lymph node metastasis(P＜0.05).The median survival time of HER2/c-erbB-2 positive and negative patients were respectively 13.8 months and 33.9 months,and the difference was statistically significant between the two groups(HR=2.25,95%CI:1.06～4.80,P＜0.05).ConclusionHER2/c-erbB-2 protein may be related to occurrence,development,and invasion and metastasis of gastric carcinoma,and can be used as a marker of poor prognosis.

Gastric carcinoma;Epidermal growth factor receptor 2(HER2/c-erbB-2);Prognosis

R732

A

1003—6350（2017）01—0091—03

2016-06-08)

陸藝。E-mail：luyi_jiulong@163.com

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.01.028