MSCT灌注成像評估胃癌組織表面通透性及其與微血管密度的相關性

陶敏敏 毛慶聰 何瑞軒*

隨著醫學影像學技術的不斷發展和創新，多層螺旋 CT（multislice spiral computed tomography，MSCT）已經被廣泛應用于臨床，并在腫瘤研究領域越來越受到臨床的重視，其不僅應用于腫瘤早期篩查診斷中，而且應用于腫瘤術前評估、藥物有效性評估以及生物學行為研究中［1］。大量研究表明，腫瘤的生物學行為與其組織的微血管密度（microvessel density，MVD）有著密切的聯系［2］。本研究旨在運用MSCT對胃癌病灶進行灌注成像檢查，探討其在不同臨床病理因素下的表面通透性（permeability surface，PS）特征，及其與MVD的相關性，以期為胃癌的臨床治療提供有價值的參考依據。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2014年2月至2016年9月期間，因胃癌在武警浙江省總隊嘉興醫院行手術切除并最終經術后病理證實的54例患者作為觀察對象，其中男36例，女18例；年齡28～66歲，平均年齡（45.3±13.5）歲。所有觀察對象于術前1周均接受MSCT灌注成像檢查獲得病灶組織的PS值，并對術后病灶組織標本進行病理學檢查獲得MVD值。所有觀察對象在接受MSCT灌注成像前以及胃癌病灶手術切除前，均未接受任何形式的抗腫瘤治療。

1.2 MSCT灌注成像檢查 儀器：GE Light Speed 64 VCT；工作站分析軟件：ADW 4.4，CT Perfusion 4.0 體部腫瘤灌注程序；對比劑：碘普羅胺（規格：300mg I/ml，注射速率：4.5ml/s，劑量：50ml）。儀器參數：管電壓及管電流：120KV和200mA；掃描層厚及范圍：5mm和膈頂-肛門；掃描時間及曝光時間：50s和16.8s；域值范圍：0～140。清晨空腹狀態，于MSCT檢查前20min，囑咐觀察對象飲用2.5%等滲甘露醇1200ml，隨后并接受20mg用藥劑量的山莨菪堿進行肌肉注射。囑咐觀察對象取仰臥位，脫去金屬衣物及飾品并在腹部加以腹帶，MSCT檢查期間應作平靜呼吸。進行MSCT灌注成像檢查前，首先對觀察對象行常規CT平掃檢查，觀察胃癌病灶所在層面并以此作為MSCT灌注成像檢查的靶層面。在對比劑靜脈注射7s后，作MSCT灌注成像動態連續掃描，存儲灌注成像影像信息。影像信息導入灌注成像工作站進行分析處理時，將輸入動脈設定為腹主動脈，選取病灶的實性部位作為感興趣區（region of interest，ROI），系統自動分析生成ROI的時間-密度曲線并由此獲得病灶組織的PS值（最終取值為3次重復測量的平均值）。見圖1。

1.3 MVD分析 參照MSCT灌注成像檢查的ROI影像信息，術后獲取對應ROI胃癌組織標本，并使用10.0%甲醛液對組織標本進行固定后，以石蠟對組織標本進行包埋并切片。使用免疫組織化學染色方法（試劑盒：來源于美國MBI公司，CD34單克隆抗體染色）獲取ROI胃癌組織標本的MVD值（單位：條/200HP）［3］。經染色后組織標本的微血管內皮細胞呈現棕黃色-深棕色。MVD計數開始時，首先使用低倍視野（40倍鏡）對組織標本進行仔細觀察，尋找并確定組織標本中血管分布最豐富、密度最高的區域，然后使用高倍視野（200 倍鏡）對3個高倍視野內的MVD值進行計數（計數時獨立的染色單位作為一個MVD計數值），取其均值作為最終取值［4］。見圖1。

1.4 統計學方法 采用SPSS19.0 統計軟件。計量資料以（s）表示，組間比較采用t檢驗。兩變量間的關系分析使用Pearson相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料 54例胃癌患者的術后病理結果顯示：腺癌患者合計44例，其中高分化腺癌患者4例，中分化腺癌患者22例，低分化腺癌患者18例；印戒細胞癌患者4例；黏液腺癌患者6例。TNMⅡ期患者16例，TNMⅢ期患者32例，TNMⅣ期患者6例。淋巴結轉移患者38例，淋巴結無轉移患者16例。本研究的分化組患者26例，由高分化腺癌患者+中分化腺癌患者共同構成；未分化組患者共28例，由印戒細胞癌患者+低分化腺癌患者+黏液腺癌患者共同構成。

2.2 胃癌在不同臨床病理特征中的PS比較 未分化組胃癌病灶組織的PS明顯高于分化組，差異有統計學意義（P＜0.05）；淋巴結轉移組胃癌病灶組織的PS明顯高于淋巴結無轉移組，差異有統計學意義（P＜0.05）；TNMⅢ～Ⅳ期組胃癌病灶組織的PS明顯高于TNMⅠ～Ⅱ期組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 胃癌在不同臨床病理特征中的PS值（

表1 胃癌在不同臨床病理特征中的PS值（

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2.3 胃癌在不同臨床病理特征中的MVD比較 見表2。

表2 胃癌在不同臨床病理特征中的MVD（

表2 胃癌在不同臨床病理特征中的MVD（

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2.4 胃癌病灶組織的PS與其MVD之間的相關性 胃癌病灶組織的PS值與其MVD之間呈正相關，相關系數 r=0.672，P 值 =0.000（P＜0.05）。見圖 2。

圖2 PS與MVD的相關性散點圖

3 討論

PS是指在腫瘤組織血液循環中的物質成分從毛細血管腔經過毛細血管內皮到達組織間隙中的速率，PS值的大小不僅能良好地反映胃癌病灶組織中血管內皮細胞的完整性情況，而且能客觀反映毛細血管壁的通透性情況［5］。本資料結果中，未分化組、淋巴結轉移組以及TNMⅢ～Ⅳ期組胃癌病灶組織的PS均分別明顯高于相對應的分化組、淋巴結無轉移組以及TNMⅠ～Ⅱ期組，提示胃癌病灶組織的PS狀態與胃癌的發生發展有著密切關系。胃癌病灶組織的PS值越高，預示胃癌病灶可能具有更高的惡性程度和TNM分期級別，其發生淋巴結轉移的可能性增加。胃癌屬于血管依賴性腫瘤，其生長發展需要大量的血供營養物質作為基礎。胃癌病灶的惡性程度和TNM分期級別越高，常伴隨大量毛細血管網的異常形成，使單位組織內的血管密度和動-靜脈通道異常增加，加之新生血管的基膜完整性和成熟度較正常血管明顯下降，造成血管內皮細胞之間的間隙明顯增寬，連接松散，血管內物質成分易從血管腔滲透至組織間隙，即胃癌病灶組織的PS明顯增大［6］。因此，運用MSCT灌注成像對胃癌病灶組織的PS進行定量分析，對判定胃癌病灶的分化及進展程度具有一定參考價值。

目前，臨床上公認的腫瘤血管生成評定“金標準”仍然是術后病理檢查所獲得的腫瘤組織MVD，借助于腫瘤組織的MVD指標可以對腫瘤組織結構內部的微血管生成情況以及分布情況進行客觀評估。本資料結果中，未分化組、淋巴結轉移組以及TNMⅢ～Ⅳ期組胃癌病灶組織的MVD值均分別明顯高于相對應的分化組、淋巴結無轉移組以及TNMⅠ～Ⅱ期組，提示胃癌病灶組織中微血管生成狀態與胃癌的發生發展同樣密切相關。胃癌病灶分化程度越低，TNM分期級別越大，其組織內部的微血管生成越旺盛，胃癌病灶組織的MVD越高。同時胃癌病灶內部具有豐富的異常增生畸形血管網，有利于癌細胞以更快的速度向周圍正常組織及淋巴結進行轉移擴散，使患者病情進展加快。這與胃癌作為富血供惡性腫瘤的生長機制相一致。

本資料結果中，胃癌病灶組織的PS與其MVD呈正相關，相關系數r=0.672，提示胃癌病灶組織的PS與其MVD之間具有一致性趨勢，即胃癌組織的MVD水平越高，預示在進行MSCT灌注成像檢查時其PS值越大。利用MSCT灌注成像定量分析胃癌病灶組織的PS，可無創性地在一定程度上反映胃癌病灶組織的微血管生成狀態。上述兩者間的趨勢關系可能與胃癌病灶組織內部大量異常新生的毛細血管具有高通透性，同時高度密集的新生血管網中存在大量動-靜脈短路有著密切關系。對研究結果綜合分析后，作者得出以下推測，胃癌組織的分化程度越差和TNM分期級別越高，預示其單位組織內所具有的新生微血管密度越高，即MVD越大，MSCT灌注成像的PS值越大；反之即MVD、PS值越小。

［1］ 劉倩倩,黃小華,董國禮,等．多層螺旋CT灌注成像在胰腺癌診斷中的應用價值．中華臨床醫師雜志:電子版,2014,8(14):45-49．

［2］ 王更記, 楊文鋒, 付政, 等． 非小細胞肺癌18F-FLT PET/CT顯像與腫瘤微血管密度的相關性．中華核醫學與分子影像雜志,2015, 35(1):1-4．

［3］ 馬燕,李晶,任衛東,等．超微血管成像與乳腺腫瘤微血管密度的相關性研究．臨床與病理雜志,2016,36(4):364-369．

［4］ 陳炳,趙振華,楊建峰,等．肝細胞癌磁共振擴散加權成像與腫瘤細胞密度及微血管密度的相關性研究．腫瘤學雜志,2015,21(5):440-442．

［5］ 徐官珍,陳玉峰,鄒文遠,等．MSCT在胃癌TNM分期與手術病理的對照研究．CT理論與應用研究,2015,24(3):429-435．

［6］ 王勇,成瑤,張曉勇．螺旋CT血管成像和灌注成像技術對胃癌血供和血流動力學評價．標記免疫分析與臨床,2014,21(5):589-592．