豬圓環(huán)病毒2型O R F2基因片段的原核表達(dá)

李 裕，鄧舜洲，傅勝才，黃 勇，高 華，劉文峰，張文波，陳松昌，萬文忠，張 順

（1.湖南省獸藥飼料監(jiān)察所，湖南長沙410006；2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西南昌330045；3.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南長沙410006；4.沅江市畜牧水產(chǎn)局，湖南沅江413100；5.南昌金牧動物保健服務(wù)有限公司，江西南昌330013)

豬圓環(huán)病毒2型O R F2基因片段的原核表達(dá)

李 裕1，鄧舜洲2，傅勝才3，黃 勇1，高 華4，劉文峰2，張文波2，陳松昌5，萬文忠5，張 順5

（1.湖南省獸藥飼料監(jiān)察所，湖南長沙410006；2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西南昌330045；3.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南長沙410006；4.沅江市畜牧水產(chǎn)局，湖南沅江413100；5.南昌金牧動物保健服務(wù)有限公司，江西南昌330013)

豬圓環(huán)病毒2型（PC V2）的衣殼蛋白由O R F2編碼。采用PC R技術(shù)擴(kuò)增得到O R F2基因片段，克隆入pU C m-T載體，構(gòu)建了重組質(zhì)粒pU C m-PC V2-O R F2。根據(jù)pU C m-PC V2-O R F2測序結(jié)果設(shè)計(jì)引物，用Pf u酶擴(kuò)增替換稀有密碼子三聯(lián)體。改造后的基因片段連接入表達(dá)載體pG EX-4T-1，并轉(zhuǎn)化到BL21(D E3)宿主菌，成功構(gòu)建了G ST-PC V2-O R F2蛋白大腸桿菌工程菌。經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá)后，對以包涵體形式存在的G ST-PC V2-O R F2重組蛋白進(jìn)行純化、復(fù)性。復(fù)性后的G ST-PC V2-O R F2重組蛋白具有良好的反應(yīng)原性。

PC V2；O R F2；基因；原核表達(dá)

豬圓環(huán)病毒屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬。根據(jù)致病性、抗原性、基因序列的不同，豬圓環(huán)病毒分為豬圓環(huán)病毒1型(PCV1)和豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)。PCV1和PCV2都廣泛存在于全世界的豬群中。PCV1無致病性。PCV2能損傷豬的免疫系統(tǒng)，表現(xiàn)出多種病癥。這些病癥有斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PM W S)、皮炎腎病綜合征(PDNS)、豬呼吸道疾病復(fù)合癥(PRDC)、繁殖障礙、肉芽腫性腸炎、滲出性皮炎、壞死性淋巴結(jié)炎、仔豬先天性震顫?！?br>