圓二色光譜在中藥小分子與生物大分子相互作用中應用的研究進展Δ

徐 飛，于 慧，陸 彩，陳 軍，谷 巍，吳啟南（.南京中醫藥大學藥學院，南京 0046；.江蘇省中醫院血液科，南京 009）

·綜述講座·

圓二色光譜在中藥小分子與生物大分子相互作用中應用的研究進展Δ

徐 飛1＊，于 慧2，陸 彩1，陳 軍1，谷 巍1，吳啟南1（1.南京中醫藥大學藥學院，南京 210046；2.江蘇省中醫院血液科，南京 210029）

目的：為不同類型中藥小分子體外篩選及設計合成改造提供參考。方法：以“圓二色光譜”“中藥小分子與DNA”“中藥小分子與蛋白質”“Circular dichroism”“Interaction of traditional Chinese medicine and DNA”“Interaction of traditional Chinese medicine and protein”等為關鍵詞，組合查詢2005年1月－2016年4月在PubMed、Web of Science、Wiley Online Library、SpringerLink、中國知網、萬方、維普等數據庫中的相關文獻，對圓二色光譜（CD）在中藥小分子與DNA、中藥小分子與蛋白質相互作用中的應用進行綜述。結果與結論：共檢索到相關文獻349篇，其中有效文獻54篇。生物堿、黃酮類、醌類、苯丙素類、植物色素等類型的中藥小分子，與DNA相互作用以溝槽結合和嵌插結合2種模式為主；苯丙素類、黃酮類、萜類、生物堿、醌類等類型的中藥小分子，與蛋白質結合后，通常使其α-螺旋、β-轉角和無規則卷曲等二級結構發生改變。后續進行誘導圓二色譜的探索性研究，可得到更多兩者相互作用的結合信息，如中藥小分子與DNA的結合序列及與蛋白質的結合位點；還可將CD與紫外-可見吸收光譜法、熒光光譜、分子模擬等技術聯用，以實現多種技術互為驗證、互為補充。

圓二色光譜；中藥小分子與DNA；中藥小分子與蛋白質；相互作用

圓二色光譜（CD）是一種利用平面偏振光研究生物大分子結構的快速、簡單、準確的方法[1]，對生物大分子二級及三級結構的變化十分敏感，可檢測其微小變動，且具高選擇性。近年來，CD在中藥小分子與生物大分子相互作用的研究中得到了廣泛應用。筆者以“圓二色光譜”“中藥小分子與DNA”“中藥小分子與蛋白質”“Circular dichroism”“Interaction of traditional Chinese medicine and DNA”“Interaction of traditional Chinese medicine and protein”等為關鍵詞，組合查詢2005年1月－2016年4月在PubMed、Web of Science、Wiley Online Library、SpringerLink、中國知網、萬方、維普等數據庫中的相關文獻。結果，共檢索到相關文獻349篇，其中有效文獻54篇。現對CD在中藥小分子與DNA、中藥小分子與蛋白質相互作用中的應用進行綜述，以期為不同類型中藥小分子體外篩選及設計合成改造提供參考。

1 CD在中藥小分子與DNA相互作用中的應用

DNA是組成生命體最重要的物質之一，是生命體重要的遺傳信息載體，是很多藥物的重要靶點。研究中藥小分子與DNA的相互作用，有助于從分子水平上了解其藥用機制，而且對抗腫瘤、抗病毒藥物的體外設計、篩選都具有十分重要的意義。

DNA的CD譜是由其骨架結構中的不對稱糖分子和由這些糖分子的構型決定的螺旋結構產生的。根據中藥小分子對原有的DNA CD信號的影響，可得知其DNA結合的不同模式。DNA的CD特征峰包括248 nm處的負峰與276 nm處的正峰，前者對應DNA的右手螺旋B構象，后者對應DNA的堿基堆積，兩者均對DNA與小分子的相互作用模式非常敏感。中藥小分子與DNA相互作用主要有非共價鍵結合、共價鍵結合（烷基化/金屬化）和剪切作用3種模式。非共價鍵結合又分為靜電結合、溝槽結合和嵌插結合3種模式。靜電結合是小分子作用于DNA雙螺旋結構的外壁，無選擇性；溝槽結合是分子與DNA的大溝或小溝的堿基對邊緣直接作用，中藥小分子多在小溝區作用；嵌插結合是小分子中的平面結構嵌入核酸的堿基之間，這是中藥小分子與DNA發生相互作用的最重要的形式之一。小分子與DNA的溝槽結合和靜電結合對堿基堆積和螺旋的色帶影響很小或幾乎沒有影響，而嵌插結合會改變色帶的穩定并使DNA的右手螺旋B構象向C構象轉變[2-5]。下面從中藥的有效成分幾大分類分別進行介紹。

1.1 生物堿

Kundu N等[2]研究發現，鹽酸小檗堿（BBCL）與DNA作用時，插入DNA堿基對，該結果為深入研究其抗腫瘤作用機制提供了理論依據。Chen ZF等[3]研究發現，氧化海罌粟堿（OG）及其與金離子（Au3+）、鋅離子（Zn2+）、鈷離子（Co2+）、錳離子（Mn2+）4種金屬配合物與DNA相互作用的方式均是嵌插結合。Saha SK等[4]研究發現，白毛茛（HC）中的小檗堿、黃連堿、巴馬汀和氫化小檗堿與DNA的結合導致了DNA構象變化，作用方式為嵌插結合。

BBCL、OG、小檗堿、氫化小檗堿、黃連堿、巴馬汀等均屬于異喹啉類生物堿，該類生物堿結構為2個異喹啉環稠合而成。CD譜結果顯示，其與DNA結合模式均為嵌插結合。

1.2 黃酮類

李悅等[5]研究發現，楊梅素使DNA的CD譜正峰和負峰強度略有減弱，同時正峰位伴有輕微藍移，說明楊梅素與DNA為溝槽結合。歐陽熙林等[6]研究發現，山柰苷及其鋅配合物與DNA作用時均以插入方式嵌入到DNA雙鏈的堿基對之間。配合物插入鍵合作用更強，說明山柰苷鋅配合物抗腫瘤能力強于山柰苷。王瑞玲[7]研究發現，4′-苯基-3-溴-8-[N，N-二（2-羥基乙基）氨基甲基]黃酮會使274 nm波長處信號發生變化，說明其與DNA發生了嵌插結合。Hemachandran H等[8]研究發現，兒茶素與DNA非嵌插結合，而是發生溝槽結合和靜電作用。Hegde AH等[9]研究發現，橙皮素和柚皮素與DNA為嵌插結合。Zhang G等[10]研究發現，杜鵑素與DNA結合為嵌插結合，作用力主要為疏水相互作用和氫鍵。

黃酮類中藥小分子與DNA相互作用的結合模式不盡相同，與其結構有關。山柰苷、楊梅素屬于黃酮醇類，兒茶素屬于黃烷醇類，杜鵑素、橙皮素、柚皮素屬于二氫黃酮類，4′-苯基-3-溴-8-[N，N-二（2-羥基乙基）氨基甲基]黃酮屬黃酮類。CD譜的結果表明，黃酮類和二氫黃酮類中藥小分子與DNA相互作用方式多為嵌插結合，黃烷醇類和黃酮醇類多為溝槽結合。比較結構差異可知，黃烷醇類和黃酮醇類C環的3位均有—OH，而黃酮類和二氫黃酮類該位置無—OH。提示黃酮類化合物的中藥小分子與DNA相互作用的方式可能與其C環3位上的—OH有關，該位置為兩者結合的關鍵位點。

1.3 醌類

李玉英等[11]研究發現，隨著1，4-二甲基-6，8-二甲氧基-9，10-蒽醌濃度的增大，DNA的CD譜正、負峰的強度均減弱，說明為嵌插作用。王新寧等[12]研究發現，隨著大黃素濃度的不斷增加，c-myc G4-DNA在265 nm波長處的正CD信號不斷減弱，且c-myc G4-DNA在295 nm波長處出現了1個正的誘導CD信號，說明其與c-myc G4-DNA可能是溝槽結合。

1，4-二甲基-6，8-二甲氧基-9，10-蒽醌和大黃素均屬于羥基蒽醌類，但兩者與DNA的結合模式不同。分析結構差異，大黃素的1位、6位和8位均為—OH，1，4-二甲基-6，8-二甲氧基-9，10-蒽醌的結構中無—OH，由此推測該類結構中1、6、8位為兩者結合的關鍵位點，1、6、8位的—OH為兩者結合的關鍵基團。

1.4 苯丙素類

田莉莉[13]研究發現，丹參素、咖啡酸、原兒茶醛與DNA相互作用方式為溝槽結合。呂夢嬌[14]研究發現，新型選擇性雌激素受體調節劑類香豆素衍生物與DNA的主要作用方式是溝槽模式，當衍生物是由丙二酸相連接時，CD信號明顯。Sarwar T等[15]研究發現，秦皮乙素與DNA結合模式主要為溝槽結合，不插入DNA堿基對。Zhou X等[16]研究發現，補骨脂素（PSO）與DNA的相互作用為嵌插作用。

丹參素、原兒茶醛、咖啡酸屬簡單苯丙素類，PSO、秦皮乙素、新型SERMs類香豆素衍生物均屬香豆素類。CD譜結果表明，簡單苯丙素類的中藥小分子與DNA的作用模式多是嵌插結合，而香豆素類的中藥小分子則多為溝槽結合。分析兩者結構，二者均具有1分子苯環和3個直鍵碳連在一起為單位的基礎單元，但香豆素具有苯駢α-吡喃酮母核的結構，因此推測其吡喃環上的內酯鍵可能是造成兩者結合方式不同的主要原因，為兩者結合關鍵基團。

1.5 植物色素

Hoshyar R等[17]研究發現，藏紅花酸、藏紅花苷、藏紅花醛、藏紅花素與G-四鏈體相互作用為溝槽結合模式，結合能力藏紅花酸＞藏紅花素，藏紅花苷＞藏紅花醛。Rajesh J等[18]研究發現，姜黃素及姜黃素-銅（Ⅱ）配合物與DNA相互作用是溝槽結合模式。Ahmadi F等[19]研究發現，鋁-姜黃素配合物與DNA結合的模式為溝槽結合。

藏紅花酸、藏紅花苷、藏紅花醛、藏紅花素、姜黃素均為脂溶性的植物色素，CD譜表明，該類化合物與DNA相互作用多為溝槽結合。藏紅花酸、藏紅花苷、藏紅花醛、藏紅花素與DNA的結合能力有差異：藏紅花酸是具有共軛多烯烴的直鏈結構，碳鏈兩端的第2個碳上均為—COOH；藏紅花素是由藏紅花酸與2個分子龍膽二糖結合而成的酯，即兩端—COOH中的H被龍膽二糖取代。而藏紅花酸與DNA結合能力遠大于藏紅花素，提示藏紅花酸類結構的中藥分子中兩端—COOH為其結合的關鍵基團。藏紅花醛結構為1，3-三甲基-2-甲氧基-1，5-環己二烯，藏紅花苷在其5位連接1個葡萄糖分子，藏紅花苷與DNA結合能力強于藏紅花醛，說明該類結構中5位為其結合的關鍵位點。

2 CD在中藥小分子與蛋白質相互作用中的應用

藥物小分子進入體內后，經過體內運輸和儲存，到達受體部位與之結合后發揮藥效。蛋白質受體的構象變化對其發揮生理功效有重大意義。CD譜對構象變化靈敏，常用于探討蛋白質二級結構構象的變化。蛋白質典型的α-螺旋結構在位于208、222 nm處有雙負峰；β-折疊約在215 nm處存在1個負峰；200 nm附近的負峰是無規則卷曲的特征曲線。利用軟件或計算公式可以計算出蛋白中α-螺旋等二級結構含量的改變。下面仍從中藥小分子的常見分類分別進行介紹。

2.1 苯丙素類

謝余寰[20]研究發現，短葉蘇木酚酸與牛血清白蛋白（BSA）相互作用后，使該蛋白α-螺旋含量增加。王靜[21]研究發現，綠原酸與溶菌酶（LYSO）相互作用，使其α-螺旋結構增加，空間結構更加緊密；使BSA和人血清白蛋白（HSA）的α-螺旋含量均增加，對HSA影響更大。吳愛芝等[22]研究發現，肉蓯蓉苷F（CF）與BSA結合形成復合物，使其α-螺旋含量減少；同時研究了金屬離子Cu2+、Fe3+、Zn2+、Mg2+對CF與BSA結合的影響，發現4種金屬離子均可以增強二者的結合作用。宋志英[23]研究發現，PSO、異補骨脂素（ISO）、5-甲氧基補骨脂素（5-MOP）、8-甲氧基補骨脂素（8-MOP）與LYSO相互作用后，分別使蛋白中α-螺旋結構的含量降低27.1%、11.5%、10.6%、0.917%，作用強度大小為8-MOP＞5-MOP＞ISO＞PSO；且4種稀土離子鑭離子（La3+）、釓離子（Gd3+）、鐿離子（Yb3+）、镥離子（Lu3+）加入后，增強了該類小分子與LYSO的相互作用。岳園園[24]研究發現，秦皮乙素是通過與HSA結合，使其α-螺旋含量降低而發揮相應的藥理作用。

綠原酸、短葉蘇木酚酸、CF、白藜蘆醇均為簡單苯丙素類化合物，CD譜表明，其與蛋白質作用后，大多使α-螺旋含量增加，但CF卻使α-螺旋含量減少。分析結構差異發現，CF在3位被1分子的蕓香糖取代，說明簡單苯丙素類化合物中3位可能為決定其與蛋白作用方式的關鍵位點。PSO、ISO、5-MOP、8-MOP、秦皮乙素均為香豆素類化合物，與蛋白作用后均使α-螺旋含量減少。簡單苯丙素類與香豆素類的結構差異表現為，香豆素類具有苯駢α-吡喃酮母核的結構，因此推斷香豆素類吡喃環上的內酯鍵可能是造成兩者結合方式不同的主要原因。PSO、ISO、5-MOP、8-MOP與蛋白作用強度的差異與其結構有關，PSO、ISO呋喃環位置不同，PSO在6、7位，ISO在7、8位，8-MOP在8位-OCH3取代，5-MOP在5位-OCH3取代。這說明5、6、7、8位取代基差異可直接影響該類化合物與蛋白作用強度，為其作用關鍵位點。

2.2 黃酮類

王瑞玲[7]研究表明，4′-苯基-3-溴-8-[N，N-二（2-羥基乙基）氨基甲基]黃酮是通過與HSA結合后改變其二級結構，使其α-螺旋含量降低，從而發揮抗菌、抗病毒作用。王瑛[25]研究發現，陳皮中的桔皮素和3，5，6，7，8，3′，4′-七甲氧基黃酮與免疫球蛋白E相互作用，α-螺旋結構、β-轉角結構含量降低，β-折疊和無規則卷曲結構含量增加。吳錦繡等[26]研究發現，蘆丁與BSA、HSA相互作用后，BSA和HSA的α-螺旋結構減少。王春等[27]研究發現，槲皮素使BSA的α-螺旋結構明顯減少。黃燦[28]研究發現，劍葉龍血素A、劍葉龍血素B均使BSA的α-螺旋含量明顯減少，且劍葉龍血素B的作用力更強。岳園園[24]研究發現，川陳皮素、杧果素均是通過與HSA結合，使其α-螺旋含量降低，而發揮相應的藥理作用。閆家凱[29]研究發現，木犀草素使α-葡萄糖苷酶的α-螺旋含量減少，而β-轉角和無規則卷曲的含量不斷增加，使α-葡萄糖苷酶的構象發生變化，使其二級結構重新排列，誘導酶活性口袋關閉，使該酶活性降低。王亞杰等[30]研究發現，桑色素使黃嘌呤氧化酶β-折疊含量增加，α-螺旋、β-轉角和無規則卷曲的含量降低，使該酶的結構更加緊湊而不利于其活性中心暴露于反應環境中，從而降低了其活性。田建裊等[31]研究發現，柚皮苷使α-糜蛋白酶的α-螺旋含量減少。Shao J等[32]研究發現，葛根素使細胞色素P450酶（CYP）的疏水作用減弱，α-螺旋含量下降。Tang L等[33]研究發現，矢車菊素-3-O-葡萄糖苷使BSA的α-螺旋含量增加。He W等[34]研究發現，山姜素使HSA的α-螺旋和β-折疊結構減少，無規則卷曲增加。He Y等[35]研究發現，葛根素使HSA中α-螺旋輕微減少。

桔皮素、柚皮苷、山姜素屬于二氫黃酮類，木犀草素、川陳皮素、桑色素、4′-苯基-3-溴-8-[N，N-二（2-羥基乙基）氨基甲基]黃酮、3，5，6，7，8，3′，4′-七甲氧基黃酮屬于黃酮類，蘆丁、槲皮素屬于黃酮醇類，劍葉龍血素A、劍葉龍血素B屬于二氫查爾酮類，杧果素屬于苯駢色原酮類，葛根素屬于異黃酮類，矢車菊素-3-O-葡萄糖苷屬于花色素類。CD譜表明，黃酮類的中藥小分子與蛋白質作用后，大多使其α-螺旋含量減少，但矢車菊素-3-O-葡萄糖苷使α-螺旋含量增加。黃酮類基本母核的C環無羰基，1位氧原子以佯鹽的形式存在，使其具有如親水性強等類似鹽的性質，該特殊結構可能是花色素類黃酮與蛋白質結合時使其α-螺旋含量增加的原因。劍葉龍血素B對蛋白的作用強于劍葉龍血素A，分析兩者結構差異，劍葉龍血素B的4位上比劍葉龍血素A多1個—OCH3，提示二氫查爾酮類化合物的4位可能為其相互作用的活性位點。

2.3 萜類

劉金河等[36]研究發現，甘草次酸使得Bloom解旋酶α-螺旋結構減少，改變其構象。劉璐莎等[37]研究發現，土貝母皂苷Ⅱ使HSA的α-螺旋含量減少。劉志芳等[38]研究發現，熊果酸和齊墩果酸均使胰脂肪酶α-螺旋含量降低，熊果酸比齊墩果酸的影響更顯著。丁蘭等[39]研究發現，熊果酸使BSA的α-螺旋顯著減少，肽鏈伸展，疏水作用減弱。丁蘭等[40]研究發現，貝殼杉烷二萜類化合物Leukamenin E單體使BSA結構收縮，α-螺旋結構增加。Chen YC等[41]研究發現，柴胡皂苷C使HSA的α-螺旋減少，β-折疊和無規則卷曲增加。本課題組研究發現，澤瀉調酯有效成分23-乙酰澤瀉醇B和24-乙酰澤瀉醇A使HSA、人血紅蛋白的α-螺旋含量降低，β-折疊和無規則卷曲含量增加，23-乙酰澤瀉醇B引起的結構變化程度比24-乙酰澤瀉醇A高[42-43]。該作用結果可能與2種化合物的側鏈結構的差異有關，側鏈打開則結合力強，側鏈與母環折疊則結合力弱。

土貝母皂苷Ⅱ、柴胡皂苷C、甘草次酸、齊墩果酸、熊果酸、23-乙酰澤瀉醇B和24-乙酰澤瀉醇A均屬三萜類，Leukamenin E單體屬二萜類。CD譜表明，三萜類中藥小分子與蛋白質的相互作用大多使其α-螺旋含量降低，但Leukamenin E則相反。二者基本碳架均為異戊二烯單位，但Leukamenin E的11位上連1個羰基，由此推測萜類化合物的11位為其相互作用的關鍵位點。熊果酸比齊墩果酸對蛋白作用更強，兩者為同分異構體，結構差異為E環上2個甲基位置不同，熊果酸甲基在C19位，齊墩果酸在C20位，由此推測19、20位為兩者相互作用的關鍵位點。

2.4 生物堿

苑莉莉等[44]研究發現，喜樹堿（HCPT）使BSA的α-螺旋含量減少，導致肽鏈變得疏松。周能等[45-46]研究發現，荷花堿使BSA肽鏈收縮，導致α-螺旋結構增加。楊健等[47]研究發現，青藤堿加入后使BSA構象改變，α-螺旋減少，β-折疊增加。楊美玲等[48]研究發現，苦參堿使HSA的α-螺旋結構的含量顯著降低。徐香玉等[49]研究發現，氧化苦參堿使BSA的α-螺旋含量降低，β-轉角和無規則卷曲結構部分轉變成了β-折疊結構，有序性增強。閆瀟娜[50]研究發現，黃藤素（PMT）使牛血紅蛋白（BHb）α-螺旋含量降低；在BHb-PMT體系中加入鎂離子（Mg2+）、Zn2+、銅離子（Cu2+）、鐵離子（Fe3+）、Co2+、鎳離子（Ni2+），發現Mg2+、Zn2+、Cu2+、Co2+不利于BHb與PMT的結合，而Fe3+、Ni2+則反之。

苦參堿、氧化苦參堿屬賴氨酸系生物堿類中的喹諾里西啶類，HCPT是色氨酸系生物堿類中的單萜吲哚類，荷花堿、青藤堿、黃藤素均屬異喹啉類。CD譜表明，生物堿與蛋白質結合后，大多使α-螺旋減少，β-折疊增加。但荷花堿使α-螺旋增加，其結構為2個芐基異喹啉通過1～3個醚鍵相連接，由此推測可能是其分子中的醚鍵引起了BSA肽鏈的收縮，拉近肽鏈中的—C＝O和—NH，形成新的氫鍵，使α-螺旋結構含量增大。這提示同一生源途徑結合化學結構類型的生物堿與蛋白質相互作用對蛋白質二級結構產生的影響大體可能相似，但也可以通過改變其分子結構，改變其與蛋白質的結合方式。

2.5 醌類

田萌等[51]研究發現，大黃素、大黃酸、大黃酚通過改變胰蛋白酶的二級結構，使其α-螺旋含量減少，β-折疊含量增加，抑制其活性，作用強度大小為大黃酸＞大黃素＞大黃酚。劉華等[52]研究發現，大黃酸通過使α-淀粉酶的α-螺旋含量下降來實現對α-淀粉酶的抑制作用。馬躍文等[53]研究發現，大黃酸和大黃素通過與過氧化氫酶結合，使過氧化氫酶的α-螺旋含量下降，其中大黃素對過氧化氫酶作用較強。趙芳等[54]研究發現，大黃酸銅（Ⅱ）配合物使BSA的α-螺旋含量減小，使色氨酸殘基所處微環境的疏水性增加。

大黃素、大黃酸、大黃酚均屬于羥基蒽醌類，CD譜表明，其與蛋白質相互作用后，大多使α-螺旋含量減少，β-折疊含量增加，且三者的作用強度大小為大黃酸＞大黃素＞大黃酚。分析其結構：大黃酸3位是—COOH，6位是—H；大黃素3位是—CH3，6位是—OH；大黃酚的3位是—CH3，6位是—H。由此推測，3、6位為羥基蒽醌類小分子與蛋白質結合的關鍵位點，該位置取代基極性越大，則結合力越強。

3 結語

目前，X-射線晶體衍射是檢測生物大分子構象變化最準確的方法，但結構復雜、柔性大的蛋白質難以得到理想的晶體結構，且對分子量較大的蛋白質，所得數據過于龐大，難以計算處理。相比之下，CD譜則具有樣品用量少，操作簡單、快速，對生物大分子構象變化敏感，不受分子大小限制等優點。近年來，CD譜被廣泛用于研究中藥小分子與生物大分子相互作用的研究。根據中藥小分子與DNA、蛋白質相互作用后，DNA、蛋白質的CD譜中特征峰的強度改變及位移，可知中藥小分子與DNA的結合模式及對蛋白質二級結構的改變，并可根據公式計算改變的程度。筆者已將CD技術應用于中藥小分子乙酰澤瀉醇與HSA、Hb相互作用的研究[42-43]，探討了其調脂活性差異與小分子結構差異的關聯，其結果可為調脂中藥澤瀉的藥效機制提供依據。

CD下一步突破點與重點研究趨勢：針對CD譜存在提供的構象方面信息較少的缺陷，研究者們進行了兩方面的后續研究。（1）進行誘導CD的探索性研究。很多中藥小分子沒有光學活性，但與生物大分子相互作用后，分子構象發生變化，通過兩者之間的電子躍遷偶極矩的耦合可獲得誘導CD。在中藥小分子與生物大分子的混合體系的CD譜中，根據誘導CD信號，可得到更多兩者相互作用的結合信息，如出現裂分誘導CD信號，則提示出現中藥小分子二聚體或更大聚合體。中藥小分子與DNA作用后，通過誘導CD信號的變化，根據4個序列的譜型特征，可推測其與DNA結合的序列。中藥小分子與蛋白質作用后，誘導CD信號則可提供兩者的結合位點、結合構象等信息。（2）將CD譜與紫外-可見吸收光譜法、熒光光譜，分子模擬等技術聯用[2，5，42-43，52]，紫外、熒光、分子模擬可提供兩者相互作用的結合距離、結合位點、結合模式、結合能、靜電能等多方面的結合參數。多種技術間彼此互為驗證、互相補充，一方面可大大拓展CD的適用范圍，另一方面可從不同的角度完善其結構分析結果，進而提高了分析結果的可靠性和準確性。

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1001-0408（2017）10-1402-06

2016-06-21

2016-08-23）

（編輯：余慶華）

國家自然科學基金資助項目（No.81303173，No. 81173483）；江蘇省自然科學基金面上項目（No.BK20161576）；江蘇省高校自然科學研究面上項目（No.14KJB360001）；江蘇高校品牌專業建設工程資助項目（No.PPZY2015A070）

＊副教授，碩士生導師。研究方向：中藥藥效物質的化學生物學研究。電話：025-85811520。E-mail：6612386@qq.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.10.29