血管內皮生長因子及其受體與卵巢癌相關性的研究進展

楊 娜 陳 琦

(南昌大學第二附屬醫院婦產科，江西 南昌 330006)

血管內皮生長因子及其受體與卵巢癌相關性的研究進展

楊 娜 陳 琦

(南昌大學第二附屬醫院婦產科，江西 南昌 330006)

血管內皮生長因子；受體；卵巢癌

卵巢癌早期往往不易診斷，約75%是在卵巢癌晚期及發生轉移遍布腹膜、肝臟的實質或胸膜后才被確診〔1〕。盡管目前卵巢癌的治療手段有所提高，但卵巢癌Ⅲ、Ⅳ期患者總體5年生存率分別為36%和17%〔2〕。血管內皮生長因子(VEGF)為特異的內皮細胞有絲分裂素，通過其特異性受體(VEGFR)介導，在卵巢癌的發生、發展中發揮了舉足輕重的作用，最終導致惡性腹水的產生。卵巢癌發生、發展機制分子水平的鑒定，為卵巢癌的診斷、靶向治療和預后提供依據。本文就VEGF及其受體與卵巢癌相關性的最新研究進展作一綜述。

1 VEGF及VEGFR的結構及生物學功能

VEGF家族都是分泌型二聚體糖蛋白，包括VEGF(即VEGF-A)、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F和胎盤生長因子(PIGF)-1、胎盤生長因子-2〔3〕。VEGFR家族：3種酪氨酸蛋白激酶受體(RTKS)超家族，分別為VEGFR-1(Fit-1)、VEGFR-2(激酶插入區受體/胎肝激酶1受體,KDR/FIk-1)、VEGFR-3(Fh-4)〔4〕；另外兩種受體為np-1(neuropilin-1)和np-2〔5〕。VEGF及VEGFR在血清、腹水及卵巢癌組織高表達，與卵巢腫瘤進展和預后密切相關。VEGF-A可結合兩個酪氨酸激酶受體(VEGFR-1和VEGFR-2)，大多數VEGF-A的生物效應是通過激活受體VEGFR-2介導的〔6〕。VEGFA與VEGFR2結合可以阻止漂浮在腹水中的卵巢癌球體凋亡〔7〕。VEGF-C和VEGF-D與VEGFR3結合對淋巴管生成發揮重要作用〔8〕。蒙玉剛等〔9〕通過研究發現宮頸癌有淋巴結轉移組血清VEGF-C和VEGF-D與VEGFR3水平均明顯高于宮頸癌無淋巴結轉移組,并表示血清VEGF-C和VEGF-D與VEGFR3水平為預測宮頸癌早期淋巴轉移的有用指標。VEGF通過選擇性地與內皮細胞上的受體結合而發揮以下生物學效應：促進內皮細胞分裂增殖，促進血管生長作用，提高血管通透。

2 VEGF及VEGFR與卵巢癌的診斷、臨床治療療效和預后

目前多數研究結果不論單因素還是多因素分析均認為VEGF是卵巢癌診斷以及評估患者臨床治療療效和預后的一項重要指標。CA125是卵巢癌最常用的腫瘤標志物，但在某些結核、子宮內膜異位癥、炎癥患者中CA125也有較高表達，而且在有些癌性腹水中脫落細胞呈現假陰性結果，這些均給臨床診斷帶來困惑。李海霞等〔10〕采用酶聯免疫吸附試驗結果顯示卵巢癌性腹水中VEGF蛋白表達情況顯著高于結核性腹水。此研究彌補了CA125在這方面的不足，為卵巢癌的診斷開辟了新的思路。Chambers等〔11〕使用Logistic回歸研究卵巢癌組織中VEGF-A表達水平與臨床治療療效的關系，發現VEGF-A表達水平和腫瘤進展之間有顯著的相關性，卵巢腫瘤組織高水平表達VEGF-A對貝伐單抗聯合厄羅替尼化療方案耐藥，而卵巢腫瘤VEGF-A表達稍升高時，卵巢癌對此聯合化療方案的反應是比較穩定的。然而，VEGFR-1表達水平和腫瘤進展之間無統計學意義的關聯。Yu等〔12〕通過一項薈萃分析結果顯示，在卵巢癌早期原發腫瘤或者血清中VEGF高表達，患者總生存期(OS)和無瘤生存期(RFS)低，但在卵巢癌晚期無明顯預測意義，這說明VEGF的表達是患者卵巢癌早期的重要預后因素。Sallinen等〔13〕研究發現卵巢癌患者與正常人、卵巢良性腫瘤患者、交界性腫瘤患者相比促血管生成素(Ang)-1、Ang-2、VEGF、VEGF-D、VEGF/sVEGFR-2 and Ang-2/sVEGFR-2的水平是升高的，sVEGFR-2是降低的。Ang-2/sVEGFR-2升高的卵巢癌患者通常存在腹水、卵巢癌的分期及分級較高，且術后原發性殘癌>1 cm者Ang-2/sVEGFR-2水平升高，且疾病容易復發。Ang-1、Ang-2、VEGF、VEGF-D、VEGF/sVEGFR-2 and Ang-2/ sVEGFR-2水平升高，sVEGFR-2水平降低對卵巢癌患者總生存期(OS)和無瘤生存期(RFS)單因素生存分析具有顯著預測作用。提示 Ang-2、Ang-2/sVEGFR-2可做為臨床上降低患者生存期的血管生成標志物。

3 VEGF及VEGFR與卵巢癌的生長、浸潤及轉移

微環境被認為是促進癌細胞生長、浸潤和轉移的關鍵因素之一。VEGF不僅能促進血管形成，并且可通過旁分泌、自分泌機制促進腫瘤細胞增殖與轉移。Hedgehog/Gli信號通路是控制胚胎發育過程中細胞生長和分化的經典信號轉導途徑，國內外研究發現該信號通路的激活能夠導致包括卵巢癌在內的多種惡性腫瘤的發生〔14〕。本課題組前期研究發現GANT61可能通過抑制Hh信號通路終末轉錄因子Gli進一步靶向抑制與卵巢上皮癌血管生成密切相關的基因VEGF的表達，從而抑制卵巢上皮癌的血管生成，進而減少腫瘤細胞的生長〔15〕。VEGF能增加新生血管的通透性，協助癌細胞進入血液并轉移到其他組織，促使腫瘤發生轉移〔16〕。Chen等〔17〕通過創建了一個誘導型基因敲除小鼠模型研究發現VEGF通過介導粘著斑酪氨酸激酶(FAK)增加血管通透性。FAK抑制劑作用于血管內皮細胞可以阻止體內VEGF刺激其下游的血管內皮生長因子受體或Src酪氨酸激酶活化，從而阻止增強血管的滲透性。Yang等〔18〕研究發現VEGF-B通過重塑腫瘤微血管促進腫瘤轉移，在腫瘤中敲除VEGF-B可增加血管周圍細胞覆蓋。且盡管原發腫瘤生長受損，VEGF-B高水平表達的腫瘤仍然容易發生轉移。VEGF-B是一個血管重塑因子促進腫瘤轉移，靶向VEGF-B可能是癌轉移的一個重要的治療方法。張巍等〔19〕實驗研究表明卵巢癌組織中VEGF蛋白陽性率明顯高于正常卵巢組織和纖維腺瘤組織，有淋巴結轉移組織中VEGF蛋白陽性率明顯高于無轉移組織。單核細胞趨化蛋白(MCP)-1可促進局部組織細胞表達VEGF并誘導血管生成，但僅限于動物實驗或腫瘤組織中。該實驗中MCP-1與VEGF表達呈正相關，即兩者呈同向表達，表明MCP-1在卵巢癌侵襲及轉移過程中也起重要作用，但是否通過調節VEGF表達間接發揮促血管生成作用，需深入研究。王麗梅等〔20〕研究顯示，VEGF可能通過與VEGFR-1結合，在淋巴結的轉移中起重要作用。另外，VEGF通過與VEGFR-2結合促進卵巢癌的肝轉移及血性轉移。楊麗娜等〔21〕研究發現在卵巢癌中Twist蛋白和 VEGF 表達呈明顯正相關(r=0.646,P<0.01 ),且認為Twist 和 VEGF 在卵巢癌侵襲轉移中起協同作用。其機制可能是:(1)Twist 增加VEGF 表達,促進腫瘤血管、淋巴管生成,增加其通透性,從而增加其侵襲、轉移能力；(2)VEGF 通過上調 Twist表達,誘導上皮間質轉化(EMT),從而增強腫瘤細胞侵襲能力,利于播散、轉移。但兩者的具體作用機制有待進一步明確。因此，進一步研究VEGF及其受體調控卵巢癌生長、侵襲及轉移的分子機制將有利于更好尋找有效的治療藥物。

4 VEGF及VEGFR與卵巢癌腹水

由于卵巢位于盆腔深部，早期缺乏典型的臨床癥狀及體征，卵巢癌患者第一個明顯的臨床癥狀是由于高容量腹水的產生增加了腹部周徑。但卵巢癌伴惡性腹水患者預后一般較差，因此進一步研究卵巢癌VEGF及其受體與卵巢癌腹水的關系，緩解腹水癥狀，成為許多患者的主要治療目標。腹水形成最主要的病理機制是腹膜血管的通透性增加。Bekes等〔22〕通過對血管內皮通透性的分子調控研究表明，VEGF在血管病理通透性增加和腹水形成中起著重要的作用，主要通過下調血管內皮細胞鈣黏蛋白(VE-claudin)和緊密連接蛋白(claudin)5。王麗梅等〔20〕研究顯示，大量腹水及腹腔細胞學呈陽性的卵巢癌患者中，VEGF及其受體VEGFR-1表達增加，而KDR表達與腹水無相關性。這提示VEGF可能通過與VEGFR-1結合，促進惡性腹水的生成。Liao等〔23〕經研究發現轉化生長因子(TGF)-β阻滯劑能明顯抑制VEGF的表達，同時通過抑制腹水生成及改善腹水的排放來減少腹水量。因此可以考慮使用TGF-β抑制劑作為有腹水癥狀患者的保守治療方法。

5 VEGF及VEGFR與卵巢癌的靶向治療

卵巢癌細胞對化療藥物的耐藥嚴重阻礙了化療藥物的抗腫瘤效應。隨著卵巢癌相關臨床靶點被陸續發現，針對性地治療卵巢癌，使得卵巢癌患者的長期生存率有所改善。VEGF作為重要的血管生成因子在各種實體腫瘤發生中起重要作用，通過抑制VEGF調節血管生成作用，抑制腫瘤及其他以病理性血管生成為特征的疾病，已成為一種有效的治療方法〔24〕。雖然胎盤生長因子作為靶向治療的意義仍然不完全清楚，Anti-PIGF治療目前正在進行臨床試驗。Jenny等〔25〕研究12個小鼠腫瘤模型發現用Anti-PIGF抑制原發性腫瘤生長被一個過度表達VEGFR-1的細胞系所限制。所有對Anti-PIGF敏感的腫瘤細胞系中VEGFR-1是陽性，相反，所有對Anti-PIGF耐藥的腫瘤細胞系中VEGFR-1是陰性的。這些數據表明，Anti-PIGF治療效果可能是阻斷腫瘤PLGF/VEGFR-1細胞信號轉導。由此我們可以推測VEGFR-1的表達可以作為患者選擇Anti-PIGF治療的一個生物標志物。BRCA突變基因攜帶者一生有40%到80%的風險患乳腺癌和20%～40%的風險患卵巢癌〔26〕。Lim 等〔27〕研究發現抑制VEGFR3表達導致BRCA基因下調，誘導細胞生長周期阻滯，增強化療的作用。這表明VEGFR3是治療卵巢癌一個重要的臨床靶點。蛋白酪氨酸磷酸酶4A3(PTP-4A3)在腫瘤血管中廣泛表達，Zimmerman等〔28〕研究發現蛋白酪氨酸磷酸酶4A3參與VEGF信號通路傳導，有助于病理性血管生成，在控制惡性細胞的遷移和侵襲中起重要作用。蛋白酪氨酸磷酸酶4A3是血管內皮生長因子下游潛在的治療靶點，可以作為癌癥抗血管生成治療的多通道靶點。Sunitinib(SU11248)是一種新型的小分子多靶點受體酪氨酸激酶(RTK)抑制劑，通過靶向抑制 VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-β以及PDGFR-a抑制腫瘤生長。Biagi等〔29〕進行了Sunitinib的Ⅱ期臨床試驗，通過給30名鉑類敏感的復發性卵巢癌患者單獨間歇給藥結果顯示：3.3%有應答和10%CA125產生變化，53%疾病穩定，整體中位無進展生存期為4.1個月。副作用主要有疲勞，胃腸道癥狀，手足綜合征，高血壓，無消化道穿孔發生。Fang等〔30〕通過體外實驗表示：VEGF111b蛋白在絲裂霉素C誘導下具有抗血管生成作用。Li等〔31〕通過體內和體外研究發現：VEGF111b在裸鼠體內過表達可抑制卵巢癌細胞生長，主要作用機制可能是VEGF111b與VEGF-R2結合，減少VEGF-R2酪氨酸磷酸化和阻止其下游信號傳導,這為卵巢癌的分子靶向治療開辟了新的途徑。

6 展 望

近年來，隨著對腫瘤研究的不斷深入，微觀分子腫瘤途徑發展，靶向治療特別是抗腫瘤血管生成藥物的研發成功，給卵巢癌的治療提供了全新的治療思路。當前雖然在研發血管生成抑制劑上已經取得了一些成果，但對抗腫瘤血管生成的內在分子調控機制尚有待于進一步闡明。目前國內外已有研究發現VEGF很可能是Hh信號通路促腫瘤生長的下游靶基因。因此，繼續深入研究VEGF及其受體與Hh信號通路在卵巢癌發生、發展過程中可能的分子調控機制，為卵巢癌的分子靶向治療提供了新思路。

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〔2016-06-07修回〕

(編輯 曲 莉)

國家自然科學基金項目(No.81460392);江西省衛計委科技項目(No.20131062)

陳 琦(1974-)，女，博士，主任醫師，副教授，主要從事婦科腫瘤研究。

楊 娜(1990-)，女，碩士在讀，主要從事婦科腫瘤研究。

R73

A

1005-9202(2017)02-0491-04；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.02.105