兩種鼠血清與兩種培養(yǎng)基對(duì)PK15細(xì)胞培養(yǎng)的比較

肖兵南，高中文，李劍鋒，蔣小文

（1湖南民康生物技術(shù)研究所，湖南長(zhǎng)沙410022；2.湖南省寧鄉(xiāng)縣畜產(chǎn)品檢測(cè)中心，湖南寧鄉(xiāng)410600）

兩種鼠血清與兩種培養(yǎng)基對(duì)PK15細(xì)胞培養(yǎng)的比較

肖兵南1，高中文1，李劍鋒2，蔣小文1

（1湖南民康生物技術(shù)研究所，湖南長(zhǎng)沙410022；2.湖南省寧鄉(xiāng)縣畜產(chǎn)品檢測(cè)中心，湖南寧鄉(xiāng)410600）

為比較研究DMEM培養(yǎng)基和RPM I-1640培養(yǎng)基對(duì)PK15細(xì)胞的培養(yǎng)效果，選擇效果好的作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，用大鼠血清和小鼠血清分別以不同量添加進(jìn)行培養(yǎng)，用細(xì)胞顯微病變（CPE）觀察法和四甲基偶氮唑鹽(MTT)測(cè)定法測(cè)定其對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，為血藥試驗(yàn)選擇試驗(yàn)動(dòng)物提供依據(jù)。結(jié)果表明：DMEM培養(yǎng)基較RPM I-1640培養(yǎng)基對(duì)PK15細(xì)胞的培養(yǎng)效果好，加5％大鼠血清或2.5％小鼠血清配制DMEM培養(yǎng)基的培養(yǎng)，對(duì)PK15細(xì)胞的培養(yǎng)生長(zhǎng)無(wú)副作用，即兩種血清的無(wú)毒安全濃度分別為5％和2.5％。

鼠血清；培養(yǎng)基；DMEM；RPM I-1640；PK15細(xì)胞；培養(yǎng)

用含藥血清進(jìn)行體外試驗(yàn)時(shí),經(jīng)常會(huì)遇到選擇何種試驗(yàn)動(dòng)物的問(wèn)題，原則上首先要使體外培養(yǎng)細(xì)胞在該種動(dòng)物血清中生長(zhǎng)良好、形態(tài)正常,對(duì)照組血清質(zhì)量穩(wěn)定,并且血清添加量能夠比較高[1]。豬腎上皮細(xì)胞PK15，來(lái)源于豬腎，正常的細(xì)胞形態(tài)為上皮樣，貼壁生長(zhǎng)。PK15細(xì)胞對(duì)多種病毒比較敏感，如豬圓環(huán)病毒（PCV）、豬細(xì)小病毒（PPV）、豬瘟病毒（CSFV）等，可應(yīng)用于豬圓環(huán)病毒疫苗、豬細(xì)小病毒疫苗、豬瘟病毒疫苗等的制備，在科研中被廣泛使用，其優(yōu)點(diǎn)是它的遺傳穩(wěn)定，營(yíng)養(yǎng)要求較低，可使用多種培養(yǎng)基，易培養(yǎng)、易保存[2,3]。為此，本試驗(yàn)選用無(wú)血清培養(yǎng)基DMEM和RPMI-1640對(duì)PK15細(xì)胞作比較培養(yǎng)試驗(yàn)，篩選出效果好的作基礎(chǔ)培養(yǎng)基，再添加大鼠和小鼠兩種常用試驗(yàn)動(dòng)物的血清，配制不同濃度的鼠血清培養(yǎng)基對(duì)PK15進(jìn)行培養(yǎng)試驗(yàn)，測(cè)定其對(duì)PK15細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，為血藥試驗(yàn)選擇試驗(yàn)動(dòng)物提供依據(jù)。……