地中海貧血不同基因型血常規(guī)參數(shù)MCV、MCH、RDW及HB的差異研究

畢瑩 蒲昭質(zhì)

(貴州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550004)

地中海貧血不同基因型血常規(guī)參數(shù)MCV、MCH、RDW及HB的差異研究

畢瑩 蒲昭質(zhì)

(貴州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550004)

地中海貧血； 基因型； 血常規(guī)參數(shù)

地中海貧血為一種常見(jiàn)的珠蛋白生成障礙性貧血，是發(fā)病率較高的常染色體隱形遺傳病。根據(jù)合成障礙的珠蛋白類(lèi)型，地中海貧血主要分為α地中海貧血和β地中海貧血。其發(fā)病機(jī)制是α及β珠蛋白基因先天性缺陷(缺失或突變)，造成α及β珠蛋白肽鏈合成減少或缺失，從而引起血紅蛋白生成障礙，導(dǎo)致無(wú)效造血和溶血性貧血。目前，地中海貧血的確診實(shí)驗(yàn)為地中海貧血基因的檢測(cè)，但在一些不能開(kāi)展基因檢測(cè)的基層醫(yī)院，血常規(guī)參數(shù)的測(cè)定仍是地中海貧血的重要篩查指標(biāo)。為了解地中海貧血各基因型間血常規(guī)參數(shù)的差異性，本文對(duì)幾種常見(jiàn)基因型地中海貧血的血常規(guī)參數(shù)平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量(MCH)、紅細(xì)胞分布寬度(RDW)和血紅蛋白(HB)進(jìn)行對(duì)比?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2012年1月至2013年12月就診于貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院分子遺傳室的地中海貧血患者為研究對(duì)象，抽取患者外周血并提取外周血基因組DNA作為檢測(cè)標(biāo)本。

1.2 方法 (1)缺失型α地中海貧血基因診斷：采用Gap-PCR法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)于深圳益生堂生物有限公司。(2)β地中海貧血基因診斷：采用反向點(diǎn)雜交法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)于深圳益生堂生物有限公司。(3)血常規(guī)檢測(cè)：抽取受檢者2 mL靜脈血，使用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定MCV、MCH、RDW及HB。

2 結(jié) 果

2.1 缺失型α地中海貧血中-α3.7/αα與--SEA/αα、--SEA/-α3.7組間MCV、MCH差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，RDW僅在--SEA/αα與--SEA/-α3.7組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而-α3.7/αα與--SEA/-α3.7組間HB差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

基因型nMCVMCHRDWHB?α3．7/αα9(12．8) 85．4±10．3826．88±2．9817．29±4．72116．67±29．94▲?α4．2/αα2(2．8)81．85±2．3323．30±0．1420．75±7．0079．50±12．02??SEA/αα53(74．6) 75．30±7．70?22．98±2．52?17．52±3．89▲103．94±25．37??SEA/?α3．77(9．8) 73．09±9．04?21．96±4．23?21．09±4．1385．57±26．10

注：與-α3.7/αα比較，*P<0.05；與--SEA/-α3.7比較，▲P<0.05。

2.2 突變型β地中海貧血中，CD17純合子與CD17雜合子、CD41-42雜合子及IVS-Ⅱ-654雜合子組間MCV、MCH差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；CD41-42純合子與CD41-42雜合子、IVS-Ⅱ-654雜合子組間MCH、RDW差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；CD17純合子與CD17雜合子組，CD41-42純合子與CD41-42雜合子組，CD41-42/CD17與CD17雜合子、CD41-42雜合子、IVS-Ⅱ-654雜合子及CD17純合子組間HB差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

基因型nMCVMCHRDWHBCD17/N53(36．8)71．01±11．03?21．78±3．32?19．06±11．5294．92±23．85#☆CD41?42/N50(34．7)71．10±9．68?22．53±3．73?17．87±6．26▲105．24±23．85#IVS?Ⅱ?654/N23(16．0)72．30±11．09?22．56±4．14?17．12±2．35▲99．61±26．09#CD17/CD177(4．9)84．90±6．0628．94±1．5820．40±5．09106．29±22．11#CD41?42/CD41?427(4．9)76．79±6．7531．19±12．7024．84±6．4483．29±20．03☆CD41?42/CD174(2．7)76．45±7．6924．15±5．1424．95±5．7058．25±21．33?

注：與CD17/CD17比較，*P<0.05；與CD41-42/CD41-42比較，▲P<0.05；與CD41-42/CD17比較，#P<0.05；與CD41-42/N比較，☆P<0.05。

2.3 突變型β地中海貧血中CD17、CD41-42位點(diǎn)的突變，表現(xiàn)為β鏈的完全不合成(β0)；IVS-Ⅱ-654位點(diǎn)的突變表現(xiàn)為β鏈的部分不合成(β+)，按此標(biāo)準(zhǔn)可將β地中海貧血分為3組，各組間結(jié)果見(jiàn)表3。

表型nMCVMCHRDWHBβ0/βN10371．05±10．35?22．15±3．53?18．52±9．33?99．93±24．30?β0/β01879．87±7．5228．75±8．3623．14±5．8886．67±27．34β+/βN2372．31±11．09?22．56±4．14?17．12±2．35?99．61±26．09

注：與β0/β0比較，*P<0.05。

3 討 論

地中海貧血的主要發(fā)病機(jī)制是α珠蛋白肽鏈與β珠蛋白肽鏈合成速率的不平衡，從而引起溶血性貧血。在我國(guó)長(zhǎng)江以南各省發(fā)病率較高，尤其廣西、廣東和海南三省最為嚴(yán)重，貴州也屬地中海貧血的高發(fā)區(qū)。

α地中海貧血是世界上最多見(jiàn)的單基因遺傳病，缺失型α地中海貧血是包含α珠蛋白基因在內(nèi)的大段DNA的缺失，東南亞缺失型--SEA，右側(cè)缺失型-α3.7和左側(cè)缺失型-α4.2為中國(guó)常見(jiàn)的3種類(lèi)型，其中以東南亞缺失型最為常見(jiàn)。本次研究結(jié)果顯示，來(lái)我院檢測(cè)的患者中α地中海貧血基因型也是以東南亞缺失型 --SEA/αα為主，其次為右側(cè)缺失型-α3.7/αα及雜合缺失型--SEA/-α3.7；與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)的α地中海貧血基因突變類(lèi)型和構(gòu)成比類(lèi)似[1]。表1結(jié)果顯示，隨著α珠蛋白基因缺陷數(shù)目的增加，MCV、MCH也隨之降低，小細(xì)胞低色素的特征越來(lái)越明顯，這可能是由于--SEA/αα和--SEA/-α3.7兩種基因型中缺失了兩個(gè)以上的α珠蛋白基因，α肽鏈合成受到較大抑制，血紅蛋白合成減少，導(dǎo)致MCV、MCH及HB的降低，而反映紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的RDW則呈上升趨勢(shì)。

β地中海貧血在我國(guó)人群中發(fā)現(xiàn)的突變類(lèi)型己超過(guò)200種，其中CD41-42、IVS-Ⅱ-654、CD17、CD71-72、-28、-29為最常見(jiàn)的突變類(lèi)型[2]。表2結(jié)果顯示，來(lái)我院檢測(cè)的患者中β地中海貧血基因突變類(lèi)型以CD17雜合子所占比例最高(37.2%)，其次為CD41-42雜合子，與黃盛文等[3]報(bào)道結(jié)果相似。與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)的β地中海貧血基因突變類(lèi)型明顯不同。如廣東、廣西地區(qū)β地中海貧血基因突變類(lèi)型以CD41-42為最多[4-5]，而海南黎族人群β地中海貧血基因突變類(lèi)型幾乎全是CD41-42[6]。表明即使在國(guó)內(nèi)，不同地域和人群的β地中海貧血基因突變譜的構(gòu)成也不盡相同。在本研究結(jié)果中各基因型間的血常規(guī)參數(shù)大部分存在差異(P<0.05)，但這種差異不能提示β珠蛋白基因受損程度與血常規(guī)參數(shù)之間有對(duì)應(yīng)關(guān)系，可能與本次研究的標(biāo)本在受檢時(shí)病程的長(zhǎng)短、是否經(jīng)過(guò)治療等有關(guān)。

有研究顯示RDW與貧血程度成正相關(guān)，貧血程度越嚴(yán)重，RDW升高越明顯。這可能是溶血產(chǎn)生的紅細(xì)胞碎片或網(wǎng)織紅細(xì)胞增加所致[7]。本組結(jié)果也顯示出RDW與β肽鏈的合成缺陷有關(guān)，合成越受限RDW越高。而β0雜合子RDW值較β+雜合子高但MCV值則較β+雜合子低。提示β珠蛋白基因受損程度越嚴(yán)重，MCV值越低，RDW值越大。

綜上所述，α、β地中海貧血各基因型間血常規(guī)參數(shù)MCV、MCH、RDW和HB存在一定差異，這種差異可能與缺陷基因的不同有關(guān)。珠蛋白基因缺陷的數(shù)目是引起地中海貧血不同血液學(xué)表型的直接原因，而血液學(xué)表型的嚴(yán)重性又不能簡(jiǎn)單歸咎于珠蛋白基因缺陷的程度。單從基因的角度并不能全部判定每一病例的臨床血液學(xué)特征，而對(duì)于那些為同一基因型的個(gè)體，其血液學(xué)指標(biāo)的差異就更不易做出解釋。但在不能夠開(kāi)展基因檢測(cè)的醫(yī)院，可通過(guò)血常規(guī)參數(shù)對(duì)地中海貧血進(jìn)行篩查并了解貧血的程度，對(duì)于地中海貧血防控仍具有其重要意義。

[1] 田文芳，唐喜軍.廣東省珠海地區(qū)α和β地中海貧血基因突變類(lèi)型研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8(12)：1487-1488.

[2] 徐湘民.地中海貧血預(yù)防控制操作指南[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2011：30-35.

[3] 黃盛文，羅振元.貴州地區(qū)β地中海貧血基因診斷[J].中國(guó)婦幼保健，2010，25(26)： 3813-3814.

[4] 褚玉新，王曉春.廣東省β地中海貧血基因突變類(lèi)型研究[J].中國(guó)地方病學(xué)雜志， 2010，29(2)：78-79.

[5] 張強(qiáng)，范歆.廣西壯族自治區(qū)β地中海貧血基因突變分析[J].中國(guó)地方病學(xué)雜志， 2014，33(6)：615-618.

[6] 周代鋒，蔡望偉.用等位基因特異性PCR進(jìn)行β-地中海貧血產(chǎn)前基因診斷[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，9(4)：210-213.

[7] 丁高儂，鄭雁堅(jiān).MCV、MCH和RDW對(duì)孕前篩查地中海貧血的意義[J].白求恩軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，9(3)：163-165.

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1000-744X(2016)04-0370-03

2016-01-03)