螺旋藻多糖對(duì)心理應(yīng)激大鼠心肌抗氧化的影響

張婷波

【摘要】目的：研究螺旋藻對(duì)心理應(yīng)激大鼠心肌抗氧化的影響。方法：用無(wú)規(guī)律喂水/空瓶刺激法制作心理應(yīng)激大鼠模型，造模14天后采用比色法檢測(cè)心肌中超氧化物歧化酶（SOD）；還原型谷胱甘肽（GSH）；丙二醛（MDA）含量。結(jié)論：螺旋藻多糖可以提高應(yīng)激大鼠心肌抗氧化能力，同時(shí)也增加脂質(zhì)過(guò)氧化物的生成。

【關(guān)鍵詞】螺旋藻多糖；心理應(yīng)激；心肌；抗氧化

應(yīng)激指機(jī)體在受到各種因素刺激時(shí)所出現(xiàn)的非特異性個(gè)身反應(yīng)，已有研究表明，長(zhǎng)期的心理應(yīng)激會(huì)損傷心肌細(xì)胞，引起各種心血管疾病。應(yīng)激狀態(tài)下細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，氧分子參與細(xì)胞反應(yīng)，產(chǎn)生高活性自由基，誘導(dǎo)膜發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化。但生物體內(nèi)有一系列的防御機(jī)制包括超氧化物歧化酶（SOD），還原型谷胱甘肽（GSH），再加上其它內(nèi)源性抗氧化劑等。大量研究表明，SOD、GSH和脂質(zhì)過(guò)氧產(chǎn)物丙二醛（MDA）是氧化損傷的可靠指標(biāo)。螺旋藻多糖可提高血液中SOD的活性，降低MDA的含量。本實(shí)驗(yàn)利用空瓶刺激法造成應(yīng)激動(dòng)物模型，測(cè)定大鼠心肌組織SOD、GSH、MDA的含量，從而探討螺旋藻多糖對(duì)應(yīng)激大鼠心肌抗氧化的影響。

1材料

（1）動(dòng)物：成年健康雄性SPF大鼠，10～15周齡，體重200g～250g，由昆明醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心提供。

（2）藥品和試劑：螺旋藻多糖提取于云南天然鈍頂螺旋藻，本實(shí)驗(yàn)室自行提取的過(guò)程及方法參照文獻(xiàn)操作。SOD、GSH、MDA試劑盒購(gòu)自南京建成生物試劑公司。

（3）儀器勻漿機(jī)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)、電熱恒溫水浴箱、臺(tái)式離心機(jī)、顆粒制冰機(jī)、移液器

2方法

2.1分組

將大鼠分為四組，每組10只，空白對(duì)照組：一直定時(shí)喂水，即每天早、晚9點(diǎn)喂水，10min/次，腹腔注射生理鹽水，1次/日。后3組前7天早和晚9點(diǎn)喂水，10min/次，第8天給予情緒應(yīng)激刺激，按隨機(jī)數(shù)字表無(wú)規(guī)律喂水或空瓶刺激，并分別給藥，方法同空白對(duì)照組：模型組注射生理鹽水，SP-H組注射螺旋藻多糖100mg/kg、SP-L組注射螺旋藻多糖200mg/kg，持續(xù)14天。

2.2生化指標(biāo)的測(cè)定

大鼠作斷頭處死，立即稱量心臟體重，在冰浴條件下制成10%組織勻漿液待用。SOD、GSH及MDA含量可用試劑盒測(cè)定，并嚴(yán)格按照試劑盒的要求進(jìn)行測(cè)定和對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。

3結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。

4討論

本實(shí)驗(yàn)中利用空瓶刺激法制造大鼠焦慮的心理應(yīng)激模型，使其氧自由基增多和（或）清除能力降低導(dǎo)致活性氧簇（ROS）在體內(nèi)或細(xì)胞內(nèi)蓄積而引起的氧化損傷過(guò)程。氧自由基直接或間接作用于機(jī)體心肌細(xì)胞，改變其超微結(jié)構(gòu)，使其變性、壞死。導(dǎo)致心肌收縮和舒張功能受損。SOD、GSH與正常產(chǎn)生的自由基作用，從而起保護(hù)的作用。當(dāng)存在斷鏈的抗氧化劑時(shí)，自由基引起的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)可避免或延遲，這種功能阻止細(xì)胞膜的脂質(zhì)過(guò)氧化，減少M(fèi)DA的生成，保持細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整。

本實(shí)驗(yàn)研究顯示，與對(duì)照組和模型組比較，SP-H、SP-L組GSH，MDA均明顯增高，而SOD在與對(duì)照組比較明顯升高，提示螺旋藻多糖可提高心肌的抗氧化能力。這可能與螺旋藻多糖具有清除自由基有關(guān)，且螺旋藻多糖對(duì)O2-的清除作用與螺旋藻多糖的劑量呈一定的量效關(guān)系。另外螺旋藻多糖還可以有效抑制小鼠心臟過(guò)氧化的發(fā)生且MDA的抑制率隨螺旋藻多糖濃度的增加而提高。

綜上所述，心理應(yīng)激可以使心肌細(xì)胞產(chǎn)生氧自由基，進(jìn)而破壞心肌收縮、舒張功能，而螺旋藻多糖可以發(fā)揮抗氧化功能，減少心肌SOD、GSH消耗，但不能減少M(fèi)DA生成。