發光免疫分析儀聯合檢測超敏C反應蛋白、降鈣素原及免疫功能對小兒肺炎診斷的價值

張華俐 王 超 張 蕊 張 健 范 蓉

發光免疫分析儀聯合檢測超敏C反應蛋白、降鈣素原及免疫功能對小兒肺炎診斷的價值

張華俐①王 超①張 蕊②張 健③范 蓉①

目的：探討發光免疫分析儀聯合檢測超敏C反應蛋白(hs-CRP)、降鈣素原(PCT)和免疫功能在小兒肺炎診斷中的價值。方法：選取200例肺炎患兒，按感染的病原體種類將其分為細菌性肺炎組(70例)，支原體肺炎組(65例)和病毒性肺炎組(65例)，同時選取40名健康體檢兒童為健康對照組，采集4組血樣，采用發光免疫分析儀聯合檢測，并比較4組的hs-CRP、PCT和免疫功能。結果：4組hs-CRP水平進行比較，其中細菌性肺炎組患兒hs-CRP水平高于其他3組，差異有統計學意義(t=2.358，t=3.062，t=2.816；P＜0.05)；支原體肺炎組患兒hs-CRP高于病毒性肺炎組患兒與健康對照組，差異有統計學意義(t=3.128，t=3.752；P＜0.05)；病毒性肺炎組與對照組比較，無統計學差異。細菌性肺炎組患兒的PCT水平顯著高于其他3組，差異有統計學意義(t=2.613，t=2.774，t=5.273；P＜0.05)；而陽性率也顯著高于其他3組，差異有統計學意義(x2=24.67，P＜0.05)。3組肺炎患兒CD4+低于健康對照組，差異有統計學意義(t=3.687，t=6.204，t=2.379；P＜0.05)；CD4+/CD8+低于健康對照組，差異有統計學意義(t=2.083，t=3.068，t=6.297；P＜0.05)；CD4+CD25+Treg低于健康對照組，差異有統計學意義(t=7.104，t=2.339，t=2.621；P＜0.05)。細菌性肺炎組和支原體肺炎組的CD8+高于健康對照組，差異有統計學意義(t=3.255，t=2.694；P＜0.05)。結論：發光免疫分析儀聯合檢測hs-CRP、PCT和免疫功能可以用于兒童肺炎的早期鑒別診斷，并有利于患兒預后。

超敏C反應蛋白；降鈣素原；免疫功能；聯合測定；小兒肺炎

[First-author’s address]Department of Laboratory, The First Hospital of Shijiazhuang, Shijiazhuang 050011, China.

肺炎是一種嚴重危害兒童身體健康的多發病和常見病，其發病率和病死率均居兒科各疾病之首[1]。肺炎以病原學角度分類為細菌性肺炎、支原體肺炎及病毒性肺炎，其治療和預后均有較大差異，故早期的鑒別診斷尤為重要[2-3]。目前，肺炎的診斷主要基于臨床癥狀，或采用X射線檢查、咽拭子細菌培養或支原體屬檢測等方法[4]。但臨床癥狀及X射線檢查特異度低，咽拭子或支原體屬檢測特異性雖高，但耗時較長，細菌培養需3 d以上，不適用于早期診斷。因此，目前亟需尋找快速可行的方案對各型肺炎進行鑒別診斷，以避免抗生素的臨床濫用。

發光免疫分析儀聯合檢測超敏C反應蛋白(high sensitive C reactive protein，hs-CRP)能準確的檢測低濃度C反應蛋白，而C反應蛋白又是一種典型的急性期反應蛋白[5]。血清降鈣素原(procalcitonin，PCT)是在細菌感染時增高，且與感染程度呈正相關[6]。血清hs-CRP和PCT的檢測可用來區別細菌與病毒感染。CD4＋CD25＋調節性T細胞(regulatory T cell，Treg)具有抑制免疫調節功能，對于免疫功能低下患兒需要進行對癥治療，可避免抗生素的濫用，以改善預后[7]。為此，本研究采用發光免疫分析儀聯合檢測hs-CRP、PCT和免疫功能用于兒童肺炎的早期鑒別診斷。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年7月至2015年7月石家莊市第一醫院收治的200例肺炎患兒，按感染的病原體種類將其分為細菌性肺炎組(70例)、支原體肺炎組(65例)和病毒性肺炎組(65例)；同期選取40名健康體檢兒童為健康對照組。細菌性肺炎組中男性41例，女性29例；平均年齡(6.4±1.5)歲，平均病程(7.3±2.4)d。支原體肺炎組中男性39例，女性26例；平均年齡(6.6±1.5)歲，平均病程(7.4±2.2)d。病毒性肺炎組中男性38例，女性27例；平均年齡(6.6±1.7)歲，平均病程(7.5±2.3)d。健康對照組中男性23名，女性17名；平均年齡(6.5±1.6)歲。四組兒童的一般資料比較無差異，具有可比性。

1.2 納入與排除標準

(1)納入標準：①符合小兒肺炎的診斷標準；②健康對照組近4周內無呼吸道感染史；③簽署研究知情同意書。

(2)排除標準：①患其他肺部疾病者，如肺結核、哮喘等；②伴身體其他系統器質性疾病者；③不能配合研究者。

1.3 儀器設備與試劑

采用MODELAR P800型全自動生化分析儀(瑞士羅氏公司)；Lumino發光免疫分析儀(德國)；EPICS XL流式細胞儀(美國貝克曼庫爾特)。試劑來自于南京基蛋生物科技有限公司。

1.4 檢測方法

(1)三組肺炎患兒于入院初期均接受治療前采集空腹靜脈血，健康對照組兒童采集抗凝靜脈血。

(2)使用MODELAR P800型全自動生化分析儀采用免疫散射比濁法進行hs-CRP檢測。

(3)使用Lumino發光免疫分析儀進行PCT檢測，PCT＞0.5 μg/L則為陽性。

(4)使用EPICS XL流式細胞儀進行免疫功能檢測，檢測外周血T淋巴細胞亞群，檢測外周血CD4＋CD25＋Treg細胞水平，即CD4+CD25+Treg細胞占CD4+T細胞百分比。

1.5 觀察與評價指標

檢測三組肺炎患兒血清hs-CRP、PCT、CD4+、CD4+CD25+Treg水平以及CD4+/CD8+T細胞比值，并與健康對照組兒童進行對比分析。

1.6 統計學方法

使用SPSS 13.0統計軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差(x-±s)表示，多組間比較采用F檢驗，有統計學差異的進一步比較采用Dunnett t檢驗；計數資料采用卡方檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 四組hs-CRP水平檢測結果比較

將四組hs-CRP水平檢測結果進行比較，其中細菌性肺炎組患兒hs-CRP水平最高，支原體肺炎組患兒hs-CRP水平次之，兩組與健康對照組比較，差異有統計學意義(t=2.358，t=3.062，P＜0.05)。病毒性肺炎組患兒與健康對照組比較，差異無統計學意義(t=0.935，P＞0.05)，見表1。

表1 四組hs-CRP水平比較(±s)

表1 四組hs-CRP水平比較(±s)

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2.2 四組PCT檢測結果比較

細菌性肺炎組PCT水平及陽性例數顯著高于其他3組，其陽性率為44.29%，與健康對照組比較，差異有統計學意義(x2=24.67，P＜0.05)。健康對照組細菌性肺炎組PCT水平與其他3組比較，差異有統計學意義F=487.79，P＜0.05)，見表2。

2.3 四組CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋比值及CD25＋Treg水平比較

(1)三組肺炎患兒CD4＋水平低于健康對照組，其差異有統計學意義(t=3.687，t=6.204，t=2.379；P＜0.05)。

(2)細菌性肺炎組和支原體肺炎組的CD8＋水平高于健康對照組，差異有統計學意義(t=3.255，t=2.694；P＜0.05)。

(3)三組肺炎患兒CD4+/CD8+比值低于健康對照組，差異有統計學意義(t=2.083，t=3.068，t=6.297；P＜0.05)。

(4)三組肺炎患兒CD4+CD25+Treg水平低于健康對照組，差異有統計學意義(t=7.104，t=2.339，t=2.621；P＜0.05)。

(5)四組CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值和CD25+Treg水平比較，其差異有統計學意義(F=30.81，F=10.97，F=10.520，F=36.42；P＜0.05)，見表3。

表3 四組CD4＋/CD8＋比值CD4＋、CD4＋CD25＋Treg水平比較(±s)

表3 四組CD4＋/CD8＋比值CD4＋、CD4＋CD25＋Treg水平比較(±s)

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表2 四組PCT檢測結果比較(±s)

表2 四組PCT檢測結果比較(±s)

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3 討論

CRP是一種典型的急性期反應蛋白，由細胞因子誘導分泌，當有急性炎癥、創傷等CRP會升高[8]。目前，采用先進的超敏感檢測技術能夠準確地檢測出低濃度C反應蛋白，稱為hs-CRP，其在疾病急性期即可檢測到。hs-CRP不受外界因素的影響，與炎癥變化同步，同時其升高程度與感染程度呈正相關，而病毒感染時變化則不明顯[9-10]。對hs-CRP動態監測可以輔助臨床診斷及治療。對肺炎患兒而言，血清hs-CRP用來區別細菌與病毒感染。本研究結果顯示，將四組hs-CRP水平進行比較，其中細菌性肺炎組患兒hs-CRP水平高于其他3組，病毒性肺炎組與健康對照組比較，無統計學差異。

血清PCT是一種無激素活性的降鈣素前肽物質，機體正常情況下其含量極低，但當嚴重細菌感染時，PCT濃度水平可增高10000倍[11]。PCT的穩定性好，可作為細菌性和非細菌性感染的鑒別依據[12-13]。本研究結果顯示，細菌性肺炎組患兒的PCT水平及陽性數顯著高于其他三組，與其他3組間比較無差異，這也與前述研究結論類似。

本研究將對肺炎患兒的hs-CRP、PCT和免疫功能進行聯合測定，對于小兒肺炎的早期診斷具有極大的參考價值，同時具有較高的特異度，彌補了現有檢測方案的不足，如臨床癥狀及X射線檢查特異度低，咽拭子或支原體屬檢測特異性雖高，但耗時較長。

綜上所述，聯合測定hs-CRP、PCT和免疫功能對于小兒肺炎診療而言，具有極大的臨床參考價值，值得推廣應用。

[1]官旭華，Benjamin J Silk，Aaron T，等.中國大陸肺炎發病率與死亡率：1985-2008年中英文文獻的系統分析[J].公共衛生與預防醫學，2011，22(1)：14-19.

[2]王曉明.176例兒童重癥肺炎的病原學及臨床分析[D].大連：大連醫科大學，2014.

[3]江永青，胡志堅，荀春華.CD64和CRP聯合檢測對小兒肺炎早期診斷的價值[J].實驗與檢驗醫學，2014，32(3)：304-306.

[4]魯繼榮，劉麗.兒童肺炎的病原學特點和診斷[J].中華實用兒科臨床雜志，2008，23(16)：1225-1228.

[5]張曉慧，李光韜，張卓莉.C反應蛋白與超敏C反應蛋白的檢測及其臨床意義[J].中華臨床免疫和變態反應雜志，2011，5(1)：74-79.

[6]呼新建，常曉悅，邊喜明，等.AECOPD血清PCT檢測的臨床價值及其與肺功能的關系[J].臨床肺科雜志，2011，16(9)：1388-1390.

[7]艾國.CD4+CD25+FOXP3+Treg細胞及其功能性分子FGL2在自身免疫性肝炎中的作用和機制研究[D].武漢：華中科技大學，2013.

[8]王衛明，單其俊，曹克將.C反應蛋白的研究進展[J].心血管病學進展，2005，26(1)：73-75.

[9]許俊，鄭曉豐.超敏C反應蛋白檢測方法和臨床應用進展[J].實驗與檢驗醫學，2011，29(6)：620-622.

[10]王玉梅，孫麗娟，王善菊.血清PCT和CRP對社區獲得性肺炎的診斷價值[J].放射免疫學雜志，2011，24(4)：447-449.

[11]徐冬梅，鄭穎，李蓓，等.血清PCT、CRP和IL-18檢測對急性上呼吸道感染患兒的臨床意義[J].中國衛生檢驗雜志，2012，22(11)：2698-2700.

[12]渠巍，馬莉，李虹，等.肺炎、反復上呼吸道感染患兒細胞免疫功能的評價[J].貴州醫藥，2007，31(3)： 229-231.

[13]張綺翎，趙青，霍淑芬，等.降鈣素原及超敏C反應蛋白檢測在早期新生兒感染的臨床意義[J].中國醫學裝備，2015，12(4)：68-71.

Diagnostic value of high sensitive C reactive protein, calcitonin, and immune function in children with pneumonia/

ZHANG Hua-li, WANG Chao, ZHANG Rui, et al// China Medical Equipment,2016,13(12):109-112.

Objective: To evaluate the diagnostic value of high sensitive C reactive protein(,hs-CRP) procalcitonin(PCT), and immune function in children with pneumonia. Methods: 200 children with pneumonia from July 2014 to July 2015 in the hospital were collected, and were divided into three groups according to the kinds of pathogens infection: bacterial pneumonia group (70 cases), mycoplasma pneumonia group (65 cases) and viral pneumonia group (65 cases). And 40 cases of earlier outpatient health physical examination were selected as healthy control group. Blood samples in the four groups were collected, and the hs-CRP, PCT and immune function were compared. Results: The levels of hs-CRP in the 4 groups were compared, and the level of hs-CRP in the bacterial pneumonia group was higher than that in the other 3 groups (t=2.358, t=3.062, t=2.816; P＜0.05). The level of hs-CRP in mycoplasma pneumonia group was higher than that in the control group (t=3.128, t=3.752; P＜0.05). There was no significant difference between viral pneumonia group and the control group (P＞0.05). The level of PCT in bacterial pneumonia group was higher than that in other three groups (t=2.613, t=2.774, t=5.273; P＜0.05) and the positive cases of PCT in bacterial pneumonia group was higher than that in other three groups (x2=24.67, P＜0.05). CD4+in 3 groups of pneumonia patients were lower than those in the control group (t=3.687, t=6.204, t=2.379; P＜0.05). CD4+/ CD8+in 3 groups of pneumonia patients were lower than those in the control group (t=2.083, t=3.068, t=6.297; P＜0.05). Treg CD4+CD25+in 3 groups of pneumonia patients were lower than those in the control group (t=7.104, t=2.339, t=2.621; P＜0.05). Compared with the control group, CD8+of the bacterial and mycoplasma pneumonia group was higher (t=3.255, t=2.694; P＜0.05). Conclusion: The combined detection of hs-CRP, PCT and immune function can be used in early diagnosis of pneumonia in children, and it is beneficial to the prognosis of the patients.

High sensitive C reactive protein; Calcitonin; Immune function; Combined determination; Children with pneumonia

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2016.12.031

1672-8270(2016)12-0109-04

R725.6

A

2016-09-23

①石家莊市第一醫院檢驗科 河北 石家莊 050011

②石家莊市第三醫院檢驗科 河北 石家莊 050011

③河北醫科大學第四醫院疼痛科 河北 石家莊 050011

張華俐，女，(1980- )，碩士，主治醫師。石家莊市第一醫院檢驗科，從事臨床血液檢驗與診斷工作。